中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
英文缩略词 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 不同物种的Mx蛋白 | 第13-15页 |
2 Mx蛋白的分子结构 | 第15页 |
3 Mx蛋白的表达调控 | 第15-17页 |
4 Mx蛋白的抗病毒作用 | 第17-19页 |
5 Mx蛋白的应用前景 | 第19-22页 |
第二章 实验研究 | 第22-55页 |
实验一 牛Mx1基因的克隆、原核表达及其抗体制备 | 第22-36页 |
摘要 | 第22-23页 |
1 材料与方法 | 第23-28页 |
·材料 | 第23页 |
·方法 | 第23-28页 |
2 结果 | 第28-34页 |
·目的基因的RT-PCR扩增 | 第28页 |
·重组质粒菌液PCR鉴定 | 第28-29页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
·牛Mx1蛋白基因cDNA测序结果及推导的氨基酸序列分析 | 第29-31页 |
·牛Mx1蛋白氨基酸序列二级结构与三级结构预测 | 第31页 |
·Mx1蛋白基因的系统发生分析 | 第31-32页 |
·重组质粒在BL21表达菌中的鉴定 | 第32-33页 |
·外源蛋白的诱导表达及鉴定 | 第33-34页 |
·抗血清的效价测定 | 第34页 |
3 讨论 | 第34-36页 |
实验二 稳定表达牛Mx1蛋白BHK-21细胞株的构建及鉴定 | 第36-45页 |
摘要 | 第36页 |
1 材料与方法 | 第36-40页 |
·材料 | 第36-37页 |
·方法 | 第37-40页 |
2 结果 | 第40-44页 |
·牛Mx1基因真核表达载体的PCR鉴定 | 第40页 |
·牛Mx1基因真核表达载体的酶切鉴定 | 第40-41页 |
·转入外源基因的BHK-21细胞G418筛选结果 | 第41页 |
·阳性重组BHK-21细胞基因组DNA的PCR鉴定结果 | 第41页 |
·RT-PCR检测牛Mx1基因在重组BHK-21细胞中的表达 | 第41-42页 |
·稳定表达牛Mx1蛋白阳性细胞的Westernblot鉴定结果 | 第42页 |
·阳性细胞的间接免疫荧光检测(IFA)检测结果 | 第42-43页 |
·BHK-21细胞生长曲线测定结果 | 第43页 |
·牛Mx1基因在重组BHK-21细胞中的遗传稳定性 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-45页 |
实验三 牛Mx1蛋白抗FMDV活性分析 | 第45-55页 |
摘要 | 第45页 |
1 材料与方法 | 第45-48页 |
·材料 | 第45-46页 |
·方法 | 第46-48页 |
2 结果 | 第48-52页 |
·细胞病变(CPE)观察结果 | 第48页 |
·Real-timePCR检测牛Mx1蛋白对FMDVVP1基因的抑制 | 第48-51页 |
·病毒滴度的测定 | 第51-52页 |
·间接免疫荧光(IFA)检测FMDV结果 | 第52页 |
3 讨论 | 第52-55页 |
全文总结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
附录 | 第61-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67页 |
在学校期间参与的研究课题 | 第67页 |
发表论文 | 第67-68页 |
申请的国家专利 | 第68页 |
获奖情况 | 第68-69页 |
导师评阅表 | 第69页 |