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蓝藻抗病毒蛋白CVN及衍生物抗甲型流感体内外活性的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-7页
第一章 前言第7-18页
   ·甲型流感的研究现状第7-9页
     ·流感简介第7页
     ·甲型流感的结构、分类与复制第7-9页
   ·甲型流感药物的研究现状第9-13页
     ·流感疫苗第9-10页
     ·临床用药第10-11页
       ·M2 离子通道阻滞剂第10-11页
       ·NA 抑制剂第11页
     ·基于不同靶点的潜在药物第11-13页
       ·HA 抑制剂第11-12页
       ·RNA 聚合酶抑制剂第12页
       ·siRNA 药物第12页
       ·唾液酸酶融合蛋白(DAS181)第12-13页
   ·CVN 的研究现状第13-17页
     ·CVN 结构第13页
     ·CVN 活性及作用机理第13-15页
       ·抗免疫缺陷病毒(HIV)第13-14页
       ·抗埃博拉病毒(Ebola virus)第14页
       ·抗流感病毒(Influenza virus)第14页
       ·抗丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)第14页
       ·抗单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)第14-15页
     ·CVN 的制备方法第15-17页
       ·原核表达第15页
       ·真核表达第15页
       ·课题组前期制备的 CVN 及衍生物第15-17页
   ·本课题的研究目的与意义第17页
   ·技术路线第17-18页
第二章 材料与方法第18-26页
   ·实验材料第18-19页
     ·主要仪器与设备第18页
     ·病毒,细胞,鸡胚及小鼠第18页
     ·主要试剂与试剂盒第18页
     ·主要试剂配方第18-19页
     ·药物第19页
   ·实验方法第19-26页
     ·ELISA 鉴定 CVN 及衍生物与 HA 蛋白的相互作用第19页
     ·红细胞血凝抑制实验第19-20页
       ·测定病毒血凝单位第19-20页
       ·鉴定药物抑制血凝作用第20页
     ·细胞水平检测 CVN 及衍生物抗 IAV 的活性第20-21页
       ·药物细胞毒性测定第20页
       ·病毒滴定和测定 EC50第20页
       ·免疫荧光观察药物抗病毒的作用第20-21页
       ·不同加药方式检测 CVN, LCVN 抑制流感复制的阶段第21页
     ·CVN 及衍生物抗甲型流感病毒半体内鸡胚水平的实验研究第21-22页
       ·鸡胚培养与病毒接种第21-22页
       ·鸡胚尿囊液中病毒血凝效价的滴定第22页
     ·CVN 及衍生物在小鼠体内抗甲型流感的实验研究第22-26页
       ·流感病毒鼠肺适应株的建立第22-23页
       ·小鼠死亡率实验第23页
       ·鼠肺组织病毒检测与病变观察第23-26页
第三章 实验结果第26-39页
   ·CVN 及衍生物与 HA 蛋白的相互作用第26-27页
   ·CVN 及衍生物抑制红细胞凝集第27页
   ·细胞水平上 CVN 及衍生物在 MDCK 抗 IAV 的作用第27-30页
     ·CVN 及衍生物的细胞毒性第27-28页
     ·CVN 及衍生物对四株流感病毒的半数有效浓度第28-29页
     ·CVN 及衍生物的抗流感病毒的免疫荧光观察第29-30页
     ·CVN 及 LCVN 在不同加药时间对流感病毒增殖的影响第30页
   ·CVN 及衍生物在鸡胚半体内中的抗 IAV 活性第30-32页
     ·病毒 EID50第30-31页
     ·加药后鸡胚尿囊中病毒血凝滴度第31-32页
   ·鼠肺适应株及其半数致死率(LD50)第32-33页
     ·适应株的建立第32-33页
     ·传代株 LD50第33页
   ·死亡保护实验第33-36页
     ·小鼠体重变化第33-34页
     ·CVN 及 LCVN 对感染小鼠死亡保护实验结果第34-36页
   ·肺指数变化第36页
   ·肺中病毒量检测第36-37页
   ·肺组织切片与染色第37-39页
第五章 讨论第39-43页
总结与展望第43-44页
参考文献第44-48页
附录1 硕士期间发表论文第48-49页
致谢第49页

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