| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-26页 |
| ·大豆菌核病的研究进展 | 第13-15页 |
| ·菌核病的浸染过程 | 第13-14页 |
| ·菌核病的致病机制 | 第14-15页 |
| ·菌核病的防治 | 第15页 |
| ·草酸氧化酶基因(OxO)的研究进展 | 第15-17页 |
| ·草酸氧化酶的主要功能 | 第16-17页 |
| ·草酸氧化酶在植物抗病防御过程中的作用 | 第16页 |
| ·草酸氧化酶在植物发育过程中的作用 | 第16页 |
| ·草酸氧化酶在植物抗盐胁迫中的作用 | 第16-17页 |
| ·草酸氧化酶基因的克隆与遗传转化 | 第17页 |
| ·草酸氧化酶基因的克隆 | 第17页 |
| ·草酸氧化酶基因的遗传转化 | 第17页 |
| ·植物基因工程的研究进展 | 第17-23页 |
| ·农杆菌介导法 | 第19-20页 |
| ·基因枪轰击法 | 第20-21页 |
| ·花粉管通道法 | 第21-22页 |
| ·聚乙醇(PEG)介导转化法 | 第22-23页 |
| ·超声波转化法 | 第23页 |
| ·本研究的目的意义、主要研究内容和技术路线 | 第23-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| ·本研究的主要研究内容和技术路线 | 第24-26页 |
| 2 大豆胚尖再生体系的建立与优化 | 第26-44页 |
| ·材料和方法 | 第26-30页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·大豆材料 | 第26页 |
| ·培养基种类及成分 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·实验使用试剂及其主要试剂的配制 | 第27-29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·大豆种子的消毒 | 第29页 |
| ·外植体的获得 | 第29页 |
| ·外植体培养条件 | 第29页 |
| ·不同激素配比对胚尖诱导不定芽的影响 | 第29-30页 |
| ·不同基因型的胚尖诱导不定芽的比较 | 第30页 |
| ·不定芽的延伸 | 第30页 |
| ·不定芽生根培养基的选择 | 第30页 |
| ·再生苗的移栽 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-39页 |
| ·消毒方法的选择 | 第30-32页 |
| ·不同激素配比对胚尖诱导不定芽的影响 | 第32-33页 |
| ·不同基因型对胚尖诱导不定芽的影响 | 第33-34页 |
| ·不定芽最适生根培养基的选择 | 第34-38页 |
| ·再生苗的获得 | 第38-39页 |
| ·讨论与小结 | 第39-44页 |
| ·不同消毒剂对种子消毒效果的影响 | 第40-41页 |
| ·不同激素的浓度配比对不同外植体胚尖诱导不定芽的影响 | 第41页 |
| ·不同激素配比对不定芽生根的影响 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-44页 |
| 3 根癌农杆菌介导OxO遗传转化大豆成熟胚胚尖的研究 | 第44-68页 |
| ·材料和方法 | 第44-54页 |
| ·实验材料 | 第44-48页 |
| ·大豆品种 | 第44页 |
| ·实验菌株 | 第44页 |
| ·研究所用培养基种类及其配制 | 第44-45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45-46页 |
| ·研究所用试剂及主要试剂的配制 | 第46-48页 |
| ·实验方法 | 第48-54页 |
| ·重组质粒pCAMBIA3304-OxO转化农杆菌LBA4404的PCR验证 | 第48-49页 |
| ·大豆胚尖外植体的获得与预培养 | 第49-50页 |
| ·根癌农杆菌的活化与侵染液的制备 | 第50页 |
| ·外植体的浸染及共培养 | 第50页 |
| ·不同基因型对遗传转化的影响 | 第50页 |
| ·恢复培养时间对遗传转化的影响 | 第50-51页 |
| ·PPT筛选浓度的确定 | 第51页 |
| ·抗性芽的获得及不定根的诱导 | 第51页 |
| ·抗性苗的获得与移栽 | 第51页 |
| ·转基因植株的Gus组织化学染色 | 第51-52页 |
| ·转基因苗的gfp荧光观察 | 第52页 |
| ·转基因植株的PCR验证 | 第52-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-64页 |
| ·重组质粒pCAMBIA3304-OxO转化根癌农杆菌LBA4404的PCR检测 | 第54-55页 |
| ·PPT筛选浓度的确定 | 第55-56页 |
| ·影响遗传转化的因素 | 第56-60页 |
| ·浸染时间对遗传转化的影响 | 第56-57页 |
| ·共培养时间对遗传转化的影响 | 第57-58页 |
| ·不同基因型对遗传转化的影响 | 第58-59页 |
| ·恢复培养时间对遗传转化的影响 | 第59-60页 |
| ·抗性苗的获得与移栽 | 第60-62页 |
| ·抗性苗的Gus组织化学染色结果 | 第62-63页 |
| ·抗性苗的gfp荧光蛋白观察 | 第63页 |
| ·抗性苗的PCR验证结果 | 第63-64页 |
| ·讨论与小结 | 第64-68页 |
| ·预培养对遗传转化的影响 | 第64-65页 |
| ·农杆菌浸染时间对遗传转化的影响 | 第65-66页 |
| ·共培养时间对遗传转化的影响 | 第66页 |
| ·恢复培养和筛选方式对遗传转化的影响 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 4 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 附录一 主要英文缩写词列表 | 第75-76页 |
| 附录二 植物表达载体pCAMBIA3304质粒图谱 | 第76-77页 |
| 附录三 DNA Marker | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 个人简历 | 第79页 |
| 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第79页 |
