| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| ·国内外养羊业的发展现状 | 第9-10页 |
| ·骨骼肌概述 | 第10-11页 |
| ·组织特异性启动子 | 第11-13页 |
| ·绿色荧光蛋白 | 第13-15页 |
| ·钙粘蛋白 | 第15-16页 |
| ·钙粘蛋白概念及作用 | 第15-16页 |
| ·M-钙粘蛋白的表达模式 | 第16页 |
| ·基因治疗 | 第16-17页 |
| ·研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-33页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·载体和菌种 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·主要试剂盒与试剂 | 第18-19页 |
| ·培养基及主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-33页 |
| ·引物设计 | 第20页 |
| ·骨骼肌α-肌动蛋白启动子 5’侧翼区和 3’侧翼区的获得 | 第20-22页 |
| ·载体 pGEM+5’+3’的构建 | 第22-26页 |
| ·核心基因 M-EGFP 的获得 | 第26-28页 |
| ·载体 pGEM+5’+3’+M-EGFP 的构建 | 第28-29页 |
| ·骨骼肌细胞的获得 | 第29-33页 |
| ·细胞转染 | 第33页 |
| ·骨骼肌细胞鉴定 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-46页 |
| ·山羊骨骼肌特异表达载体 pIMAU-EGFP 的构建流程 | 第33页 |
| ·山羊骨骼肌特异表达载体各元件的获得 | 第33-37页 |
| ·骨骼肌启动子5’-侧翼序列和 3’-侧翼序列的扩增和纯化结果 | 第33-34页 |
| ·EGFP 基因的扩增结果 | 第34-35页 |
| ·核心基因 M-EGFP 扩增结果 | 第35-37页 |
| ·EGFP 和核心基因 M-EGFP 的纯化结果 | 第37页 |
| ·载体 pGEM+5’+3’的构建 | 第37-41页 |
| ·pGEM-T 载体与 5’-侧翼核苷酸序列的连接 | 第37-38页 |
| ·pGEM+5’质粒的提取 | 第38-39页 |
| ·pGEM+5’载体与 3’-侧翼核苷酸序列的连接 | 第39页 |
| ·质粒 pGEM+5’+3’的提取及酶切鉴定 | 第39-41页 |
| ·载体 pGEM+5’+3’+M-EGFP 的构建 | 第41-44页 |
| ·载体 pGEM+5’+3’与 M-EGFP 的连接 | 第41-43页 |
| ·重组 pGEM+5’+3’+M-EGFP 的质粒提取 | 第43页 |
| ·重组质粒 pGEM+5’+3’+M-EGFP 的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·载体 pIMAU-EGFP 的细胞验证 | 第44-46页 |
| ·骨骼肌细胞的培养 | 第44-45页 |
| ·载体 pIMAU-EGFP 的转染结果 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
