| 目录 | 第1-6页 |
| 图表目录 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 论文主要英文缩写 | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-19页 |
| 第一章 论文所用的技术与方法 | 第19-38页 |
| ·分子克隆 | 第19-22页 |
| ·小量质粒制备 | 第19-20页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·转化 | 第20-21页 |
| ·玻璃奶胶回收 | 第21-22页 |
| ·PCR产物回收 | 第22页 |
| ·连接反应 | 第22页 |
| ·细胞相关技术 | 第22-26页 |
| ·细胞传代 | 第22-23页 |
| ·细胞冻存 | 第23-24页 |
| ·细胞复苏 | 第24-25页 |
| ·细胞转染 | 第25页 |
| ·细胞感染 | 第25-26页 |
| ·羟胺法分析蛋白棕榈酰化 | 第26-27页 |
| ·原理 | 第26页 |
| ·试剂、耗材和仪器 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27页 |
| ·细胞膜组分与DRM分离 | 第27-30页 |
| ·超离分离细胞膜组分 | 第27-29页 |
| ·DRM分离 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE | 第29-30页 |
| ·蛋白定位分析 | 第30-32页 |
| ·免疫印迹 | 第30-31页 |
| ·免疫荧光 | 第31-32页 |
| ·主要溶液配方 | 第32-38页 |
| ·试剂来源汇总 | 第32-33页 |
| ·实验相关药品 | 第33页 |
| ·实验主要试剂配制 | 第33-38页 |
| 第二章 鼠冠状病毒RNA定向重组系统的建立 | 第38-48页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-40页 |
| ·细胞株、毒株和质粒 | 第38页 |
| ·试剂、耗材和仪器 | 第38-40页 |
| ·方法 | 第40-46页 |
| ·质粒构建 | 第40-41页 |
| ·转录模板DNA的制备 | 第41页 |
| ·体外转录 | 第41页 |
| ·电转染fMHV感染的FCWF细胞 | 第41-42页 |
| ·噬斑实验(plaque assay) | 第42-44页 |
| ·重组病毒RNA提取 | 第44页 |
| ·RT-PCR | 第44-46页 |
| ·序列测定 | 第46页 |
| ·重组病毒总结 | 第46页 |
| ·重组病毒制备要点 | 第46-48页 |
| 第三章 鼠冠状病毒S蛋白膜内区缺失突变对外源蛋白表达的影响 | 第48-65页 |
| ·前言 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·结果 | 第52-61页 |
| ·重组病毒的产生情况 | 第52-53页 |
| ·重组病毒在L2细胞上的复制能力分析 | 第53页 |
| ·重组MHV对L2细胞致病性分析 | 第53-56页 |
| ·重组MHV感染L2后外源蛋白的表达情况 | 第56-57页 |
| ·重组MHV对其他小鼠来源细胞的感染及其外源蛋白表达情况 | 第57-59页 |
| ·外源蛋白在重组MHV感染细胞内的定位 | 第59-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第四章 S蛋白膜内区半胱氨酸残基在鼠冠状病毒复制中的作用 | 第65-83页 |
| ·前言 | 第65-66页 |
| ·实验材料 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-70页 |
| ·结果 | 第70-80页 |
| ·重组病毒的产生情况 | 第70页 |
| ·单个半胱氨酸点突变对重组病毒复制无明显影响 | 第70-72页 |
| ·半胱氨酸残基数量决定病毒复制能力 | 第72-74页 |
| ·半胱氨酸富含区的完整性影响S蛋白在细胞内的定位 | 第74页 |
| ·MHV S蛋白半胱氨酸富含区的棕榈酰化 | 第74-76页 |
| ·半胱氨酸富含区棕榈酰化不影响S蛋白自身的稳定性 | 第76-78页 |
| ·棕榈酰化影响S蛋白定位至DRM | 第78-80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 论文总结 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-89页 |
| 综述Ⅰ 病毒跨膜蛋白的结构功能与药物设计 | 第89-99页 |
| 参考文献 | 第95-99页 |
| 综述Ⅱ 蛋白的棕榈酰化修饰及其研究方法进展 | 第99-119页 |
| 参考文献 | 第109-119页 |
| 主要研究成果 | 第119-120页 |
| 发表文章首页 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
