| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 ：文献综述 | 第11-29页 |
| ·前言 | 第11-12页 |
| ·水稻纹枯病 | 第12-16页 |
| ·纹枯病菌的症状及其侵染循环 | 第12-13页 |
| ·纹枯病菌的致病因子 | 第13-14页 |
| ·毒素 | 第13-14页 |
| ·胞壁降解酶 | 第14页 |
| ·寄主的抗病机理 | 第14-16页 |
| ·形态结构的抗病性 | 第14-15页 |
| ·水稻抗病的生理生化特点 | 第15-16页 |
| ·转基因水稻的探索 | 第16-22页 |
| ·转基因水稻的研究进展 | 第16-18页 |
| ·转基因水稻发展中存在的问题及对策 | 第18-22页 |
| ·转基因水稻的生物安全性分析 | 第19-21页 |
| ·提高转基因水稻安全性的策略 | 第21-22页 |
| ·水稻纹枯病抗病转基因育种 | 第22-27页 |
| ·转化植物自身的几丁质酶等基因 | 第23-24页 |
| ·转化生防菌中的抗纹枯病基因 | 第24-25页 |
| ·天麻抗真菌蛋白(GAFP)是广谱抗真菌蛋白 | 第25-27页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第27页 |
| ·技术路线 | 第27-29页 |
| 第二章 ：水稻转GAFP基因遗传转化体系的建立及影响因子的研究 | 第29-43页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·供试水稻材料 | 第29页 |
| ·质粒及菌株 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·植物转化载体的构建 | 第30-32页 |
| ·质粒DNA的提取及纯化 | 第32-33页 |
| ·提取质粒试剂的配制 | 第32页 |
| ·农杆菌天麻抗真菌蛋白基因质粒DNA的小量提取采用碱裂解法 | 第32-33页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化体系的建立 | 第33-35页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·外源质粒导入农杆菌 | 第33-34页 |
| ·愈伤组织的培养及转基因植株的获得 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-41页 |
| ·目的基因产物的离体抑菌试验 | 第35-36页 |
| ·同源序列比对结果 | 第36-37页 |
| ·根癌农杆菌中植物表达载体的检测及测序验证 | 第37-38页 |
| ·影响水稻再生体系的相关因子的研究 | 第38-40页 |
| ·NaClO浓度及处理时间对水稻成熟胚诱导的影响 | 第38-39页 |
| ·添加ABA对愈伤诱导的影响 | 第39-40页 |
| ·转GAFP基因水稻植株的获得 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·外植体的来源 | 第41页 |
| ·添加ABA对愈伤组织的影响 | 第41-42页 |
| ·籼稻的组织培养 | 第42-43页 |
| 第三章 ：转基因水稻植株的分子检测 | 第43-53页 |
| ·材料和方法 | 第43-48页 |
| ·主要溶液的配制 | 第43页 |
| ·转基因水稻植株的基因组DNA提取 | 第43-44页 |
| ·转基因水稻植株的PCR检测 | 第44页 |
| ·转基因水稻植株的Southern blot检测 | 第44-46页 |
| ·探针的标记 | 第45页 |
| ·DNA酶切和电泳 | 第45页 |
| ·DNA真空转移准备 | 第45页 |
| ·真空转膜 | 第45-46页 |
| ·杂交过程 | 第46页 |
| ·转基因植株的荧光实时定量RT-PCR检测 | 第46-48页 |
| ·RNA提取 | 第46-47页 |
| ·RT反应 | 第47页 |
| ·Real-time PCR | 第47-48页 |
| ·转基因后代的遗传分析及纯合阳性株系的筛选 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-51页 |
| ·转基因水稻的PCR鉴定 | 第48-49页 |
| ·转基因水稻的Southern blot鉴定 | 第49页 |
| ·部分转基因水稻的荧光实时定量RT-PCR鉴定 | 第49-51页 |
| ·RNA的提取与检测 | 第49-50页 |
| ·目的基因的实时定量PCR检测结果 | 第50-51页 |
| ·转基因后代的遗传分析和纯合转基因株系的筛选 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第51-52页 |
| ·实时定量PCR在转基因检测中存在的问题 | 第52页 |
| ·转基因植株的遗传研究 | 第52-53页 |
| 第四章 ：转GAFP基因植株田间纹枯病抗性鉴定 | 第53-60页 |
| ·材料和方法 | 第53-54页 |
| ·供试水稻材料 | 第53页 |
| ·田间试验设计 | 第53页 |
| ·菌系及接种方法 | 第53页 |
| ·病级病指调查方法和调查时间 | 第53-54页 |
| ·病级调查指标及方法 | 第53-54页 |
| ·调查时间 | 第54页 |
| ·试验统计方法 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-59页 |
| ·徐稻3号(粳稻)背景的纹枯病抗性鉴定 | 第54-56页 |
| ·R6547(籼稻)背景的纹枯病抗性鉴定 | 第56-58页 |
| ·外源基因表达水平与抗性之间的关系 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·纹枯病鉴定评价指标的确定 | 第59页 |
| ·转基因后代纯系的纹枯病抗性评价 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |