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绒山羊皮肤毛囊生长相关基因筛选方法的探索

摘要第1-4页
Abstract第4-11页
1 前言第11-29页
   ·库的概述第11页
   ·哺乳动物皮肤与毛囊的结构组成特征第11-14页
     ·皮肤的结构组成第11-12页
     ·毛囊的结构组成第12-14页
   ·毛囊形态建成及其周期性发育第14-18页
     ·毛囊形态建成第14-17页
     ·毛囊周期性发育第17-18页
   ·参与动物皮毛发育的信号因子第18-23页
     ·褪黑激素和褪黑激素受体第18-19页
     ·Wnt信号通路因子第19-20页
     ·TGF-β信号通路因子第20-21页
     ·MAKP信号通路因子第21-22页
     ·Notch信号通路因子第22-23页
   ·MicroRNA与动物皮毛发育第23-27页
     ·Mi croRNA的发现、特点及鉴定方法第23-24页
     ·MicroRNA的生成和作用机制第24-25页
     ·MicroRNA的功能及其在动物皮肤毛囊发育中的研究进展第25-27页
     ·MicroRNA靶基因预测的方法第27页
   ·绒山羊绒毛发育机理第27-28页
     ·绒山羊毛囊形态建成第27-28页
     ·绒山羊毛囊的周期性变化第28页
   ·本研究的意义第28-29页
     ·拟解决的问题第28页
     ·本研究的意义第28-29页
2 绒山羊皮、毛、绒样品库的构建第29页
   ·试验动物、时间和地点第29页
   ·绒山羊皮肤样品库的构建第29页
   ·绒山羊毛、绒样品库的构建第29页
   ·小结第29页
3 利用褪黑激素筛选绒山羊皮肤毛囊发育相关基因第29-40页
   ·试验材料第30页
     ·试验样品第30页
     ·主要试剂和仪器第30页
     ·引物合成第30页
   ·试验方法第30-33页
     ·总RNA提取第30页
     ·cDNA合成第30-31页
     ·反转录PCR第31-32页
     ·基因片段克隆测序第32页
     ·实时荧光定量PCR第32-33页
   ·结果分析第33-38页
     ·总RNA提取检测结果第33-34页
     ·mRNA反转录PCR结果第34-35页
     ·绒毛生长相关基因定量结果第35-37页
       ·标准曲线结果第35页
       ·绒毛生长相关基因表达规律及埋植褪黑激素后的变化第35-37页
     ·埋植褪黑激素绒毛生长相关基因表达差异分析第37页
     ·埋植褪黑激素FGF5的表达与绒毛生长的变化第37-38页
     ·埋植组和对照组内各基因相关性变化第38页
   ·讨论第38-40页
   ·小结第40页
4 利用miRNAs筛选与绒山羊皮肤毛囊发育相关的基因第40-58页
   ·试验材料第41页
     ·试验样品第41页
     ·主要试剂和仪器第41页
     ·引物合成第41页
   ·试验方法第41-46页
     ·RNA提取第41-43页
     ·总RNA cDNA与miRNA cDNA合成第43页
     ·反转录PCR第43-44页
     ·miRNA克隆测序第44页
     ·实时荧光定量PCR第44页
     ·miRNA靶基因筛选及检测第44-46页
     ·靶基因回收及克隆测序第46页
   ·结果与分析第46-54页
     ·总RNA提取检测结果第46-47页
     ·miRNA反转录PCR及测序结果第47-48页
     ·miRNA实时荧光定量PCR结果第48-50页
       ·标准曲线结果第48-49页
       ·各miRNA在一个绒毛周期内的表达规律第49-50页
     ·miRNA靶基因电泳检测结果第50-53页
     ·miRNA表达水平与其靶基因个数的相关性分析第53页
     ·靶基因测序结果第53-54页
   ·讨论第54-57页
   ·小结第57-58页
5 结论第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-65页
附录第65-71页
作者简介第71页

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