| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-41页 |
| 第一章 桃拉综合征病毒的研究进展 | 第11-31页 |
| 1 桃拉综合征简介 | 第11-17页 |
| ·病原学 | 第11-12页 |
| ·TSV流行情况 | 第12-13页 |
| ·易感动物 | 第13-14页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第14-16页 |
| ·传播途径及传播机制 | 第16-17页 |
| 2 桃拉综合征病毒的分子生物学特征 | 第17-19页 |
| ·基因组特征 | 第17-19页 |
| ·基因的多样性和基因表达 | 第19页 |
| 3 病毒感染机制和宿主防御方面的研究 | 第19-20页 |
| 4 桃拉综合征病毒的诊断 | 第20-22页 |
| ·动物试验 | 第20页 |
| ·组织学和免疫学方法 | 第20-22页 |
| ·PCR技术 | 第22页 |
| 5 小结 | 第22-24页 |
| 参考文献 | 第24-31页 |
| 第二章 胶体金技术的基本原理及在疾病诊断方面的应用 | 第31-41页 |
| 1 免疫胶体金技术的基本原理 | 第31-32页 |
| 2 胶体金颗粒的制备 | 第32-33页 |
| 3 两种主要免疫胶体金快速诊断的技术 | 第33-35页 |
| ·胶体金免疫层析试验 | 第33-34页 |
| ·斑点免疫金渗滤试验 | 第34页 |
| ·四种方法 | 第34-35页 |
| 4 免疫胶体金快速诊断技术在疾病检测方面的应用 | 第35-37页 |
| ·病毒病 | 第35-36页 |
| ·细菌病 | 第36页 |
| ·寄生虫病 | 第36页 |
| ·其他疾病 | 第36-37页 |
| 5 展望 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 第二篇 试验研究 | 第41-87页 |
| 第一章 桃拉综合症病毒VP1基因保守区和全长的克隆表达 | 第41-57页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 1 材料 | 第41-43页 |
| ·毒株 | 第41-42页 |
| ·菌株 | 第42页 |
| ·主要酶和试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·PCR引物设计 | 第42-43页 |
| 2 方法 | 第43-48页 |
| ·病料组织中总RNA的提取 | 第43页 |
| ·RT-PCR | 第43-44页 |
| ·PCR产物的鉴定、回收与纯化 | 第44页 |
| ·PCR产物的T/A连接 | 第44页 |
| ·连接产物的转化 | 第44-45页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第45页 |
| ·重组质粒pET 32a-VP1cr/VP1构建 | 第45-46页 |
| ·连接产物的转化同1.5 | 第46页 |
| ·重组质粒pET32a-VP1cr/VP1的双酶切鉴定 | 第46页 |
| ·测序分析 | 第46页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第46-47页 |
| ·SDS-PAGE检测重组蛋白的表达 | 第47页 |
| ·pET32a-VP1cr/VP1重组蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48-52页 |
| ·TSV检测结果 | 第48页 |
| ·目的基因的RT-PCR扩增及重组质粒pET32a-VP1cr/VP1双酶切鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第49页 |
| ·包涵体的纯化 | 第49-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| Abstract | 第55-57页 |
| 第二章 桃拉综合征病毒融合蛋白pET32a-VP1cr/VP1的多克隆抗体的制备与纯化 | 第57-73页 |
| 摘要 | 第57-58页 |
| 1 材料 | 第58页 |
| ·实验动物 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58页 |
| ·主要仪器设备 | 第58页 |
| 2 方法 | 第58-62页 |
| ·蛋白含量测定 | 第58-59页 |
| ·透析,浓缩和浓度测定 | 第59页 |
| ·免疫接种 | 第59-60页 |
| ·采血及血清分离 | 第60页 |
| ·多克隆抗体效价的测定 | 第60-61页 |
| ·多克隆抗体的纯化 | 第61页 |
| ·TSV病毒的粗提 | 第61-62页 |
| ·Western blot分析 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62-68页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第62-63页 |
| ·方阵滴定结果 | 第63-64页 |
| ·多克隆抗体效价测定 | 第64-66页 |
| ·四种多克隆抗体的纯化结果 | 第66-67页 |
| ·Western blot分析结果 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| Abstract | 第72-73页 |
| 第三章 桃拉综合征病毒胶体金免疫层析检测法的初步研究 | 第73-87页 |
| 摘要 | 第73页 |
| 1 材料 | 第73-74页 |
| 2 方法 | 第74-77页 |
| ·抗体纯化 | 第74页 |
| ·抗体透析除盐及浓度测定 | 第74页 |
| ·蛋白与胶体金结合最佳pH测定 | 第74页 |
| ·最佳抗体蛋白结合量 | 第74-75页 |
| ·金标抗体的制备 | 第75页 |
| ·金标垫的制备 | 第75-76页 |
| ·样品垫的制备 | 第76页 |
| ·印膜 | 第76页 |
| ·试纸条的组装 | 第76-77页 |
| ·试纸条的检测和结果判定 | 第77页 |
| 3 结果 | 第77-81页 |
| ·胶体金的最佳结合pH | 第77-79页 |
| ·抗体最佳结合量的测定 | 第79-80页 |
| ·组装与测试 | 第80-81页 |
| 4 讨论 | 第81-84页 |
| ·关于胶体金的质量 | 第81页 |
| ·试剂的配制及抗体的处理 | 第81-82页 |
| ·关于缓冲液选择 | 第82页 |
| ·胶体金的标记 | 第82页 |
| ·膜的选择 | 第82-83页 |
| ·关于检测结果 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-85页 |
| Abstract | 第85-87页 |
| 全文总结 | 第87-89页 |
| 附录 | 第89-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
