| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-30页 |
| ·Keap1-Nrf2-ARE 信号通路 | 第11-21页 |
| ·Nrf2 的发现 | 第11-12页 |
| ·Keap1 的发现 | 第12页 |
| ·Nrf2 调控的下游靶基因 | 第12-14页 |
| ·Keap1-Nrf2-ARE 信号通路的调控机制 | 第14-17页 |
| ·Keap1-Nrf2 蛋白质相互作用研究进展 | 第17-18页 |
| ·Nrf2/ARE 与其他信号转导通路之间的交联 | 第18-19页 |
| ·Nrf2/ARE 信号通路与疾病 | 第19-21页 |
| ·电离辐射与人类健康 | 第21-23页 |
| ·电离辐射致机体损伤的机制—由自由基导致的氧化应激损伤 | 第22页 |
| ·抗氧化剂在辐射防护药物中占据重要地位 | 第22-23页 |
| ·SPR 技术相关综述 | 第23-24页 |
| ·SPR 技术—一种新的蛋白质相互作用研究技术 | 第23页 |
| ·SPR 技术的原理 | 第23-24页 |
| ·SPR 技术的应用 | 第24页 |
| ·重组蛋白质原核可溶性表达文献综述 | 第24-28页 |
| ·温度 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·裂解液 | 第25-26页 |
| ·周质空间定位 | 第26页 |
| ·利用标签进行融合表达 | 第26页 |
| ·菌株 | 第26-27页 |
| ·与相互作用蛋白质共表达 | 第27页 |
| ·分子伴侣 | 第27-28页 |
| ·其它策略 | 第28页 |
| ·本课题的研究意义 | 第28-30页 |
| 第二章 PMID 激活 Nrf2/ARE 信号通路及其细胞保护作用 | 第30-52页 |
| ·材料与方法 | 第30-37页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·常用溶液的配制 | 第31-33页 |
| ·细胞 | 第33页 |
| ·细胞培养条件 | 第33页 |
| ·化合物 | 第33页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第33-34页 |
| ·细胞总蛋白质的提取 | 第34页 |
| ·BCA 法测定蛋白质浓度 | 第34页 |
| ·Western Blot | 第34-35页 |
| ·EMSA | 第35页 |
| ·细胞活力测定 | 第35-36页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·小鼠分组及给药 | 第36页 |
| ·小鼠脏器组织的处理及抗氧化相关的检测 | 第36-37页 |
| ·统计学检验分析 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-48页 |
| ·PMID 激活 Nrf2/ARE 信号通路 | 第37-42页 |
| ·PMID 的细胞毒性与神经细胞保护作用 | 第42-45页 |
| ·PMID 在小鼠体内上调抗氧化物表达水平 | 第45-48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第三章 PMID 激活 Nrf2/ARE 信号通路的分子机制研究 | 第52-75页 |
| ·材料与方法 | 第52-59页 |
| ·主要仪器设备 | 第52页 |
| ·常用溶液的配制 | 第52页 |
| ·质粒 | 第52页 |
| ·细胞 | 第52页 |
| ·细胞培养条件 | 第52页 |
| ·化合物 | 第52页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第52-53页 |
| ·质粒 pFLAG-CMV-2-Keap1-C151S 突变体的构建 | 第53-57页 |
| ·细胞总蛋白质的提取 | 第57页 |
| ·质粒 DNA 的小量提取 | 第57页 |
| ·Western Blot | 第57页 |
| ·RNA 干扰实验 | 第57-58页 |
| ·哺乳动物细胞转染 | 第58页 |
| ·免疫共沉淀(co-IP) | 第58页 |
| ·荧光素酶报告基因检测 | 第58页 |
| ·统计学检验分析 | 第58-59页 |
| ·结果 | 第59-72页 |
| ·PMID 通过阻断 Keap1/Cul3 蛋白质相互作用稳定 Nrf2 蛋白质 | 第59-65页 |
| ·磷酸化过程参与了 PMID 对 Nrf2/ARE 信号通路的激活 | 第65-70页 |
| ·PMID 无直接清除自由基的能力 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 第四章 PMID 的辐射防护作用 | 第75-90页 |
| ·材料与方法 | 第75-76页 |
| ·实验动物 | 第75页 |
| ·小鼠分组及给药 | 第75页 |
| ·照射条件 | 第75-76页 |
| ·外周血白细胞，血小板和红细胞计数 | 第76页 |
| ·小鼠骨髓造血细胞集落形成实验 | 第76页 |
| ·小鼠骨髓细胞染色体畸变 | 第76页 |
| ·结果 | 第76-87页 |
| ·PMID 对小剂量电离辐射的防护作用 | 第76-84页 |
| ·PMID 对致死剂量（LD100/30）电离辐射的防护作用 | 第84-86页 |
| ·PMID 对半数致死剂量（LD50/30）电离辐射的防护作用 | 第86-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·本章小结 | 第89-90页 |
| 第五章 基于 SPR 技术的 Nrf2-Keap1 相互作用研究模型的建立 | 第90-105页 |
| ·实验设计 | 第90页 |
| ·材料与方法 | 第90-94页 |
| ·三种截短体原核表达载体的构建 | 第90-92页 |
| ·诱导表达 | 第92页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE | 第92-93页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第93-94页 |
| ·亲和纯化 | 第94页 |
| ·脱盐 | 第94页 |
| ·超滤浓缩 | 第94页 |
| ·BCA 法测定蛋白质浓度 | 第94页 |
| ·结果 | 第94-103页 |
| ·Nrf2(1-50aa)的原核表达载体构建、诱导表达、鉴定以及纯化 | 第94-97页 |
| ·Nrf2(51-100aa)的原核表达载体构建、诱导表达、鉴定以及纯化 | 第97-100页 |
| ·Keap1-IDC 的原核表达载体构建、诱导表达、鉴定以及纯化 | 第100-103页 |
| ·讨论 | 第103-104页 |
| ·本章小结 | 第104-105页 |
| 第六章 结论与展望 | 第105-107页 |
| ·结论 | 第105-106页 |
| ·PMID 激活 Nrf2/ARE 信号通路及其细胞保护作用 | 第105页 |
| ·PMID 激活 Nrf2/ARE 的机制研究 | 第105页 |
| ·PMID 的辐射防护作用 | 第105页 |
| ·体外 Nrf2-Keap1 相互作用研究模型的建立 | 第105-106页 |
| ·展望 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-123页 |
| 附录 英文缩略语 | 第123-125页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
