| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 文献综述 | 第14-31页 |
| 第一章 哺乳动物植入前胚胎发育 | 第14-19页 |
| ·早期胚胎的卵裂 | 第14-16页 |
| ·卵裂的方式 | 第14-15页 |
| ·卵裂的特征与时程 | 第15-16页 |
| ·卵裂球的命运 | 第16-19页 |
| ·卵裂球命运的研究方法 | 第16页 |
| ·早期胚胎分化 | 第16-19页 |
| 第二章 小鼠植入前胚胎发育的基因表达与调控 | 第19-31页 |
| ·哺乳动物植入前胚胎发育中基因表达与调控的研究方法 | 第19-22页 |
| ·差异显示反转录 PCR | 第19-20页 |
| ·代表性差异分析 PCR 技术 | 第20页 |
| ·抑制性消减杂交技术检测技术 | 第20页 |
| ·表达谱芯片（cDNA microarray） | 第20-22页 |
| ·荧光定量 PCR 技术 | 第22页 |
| ·信号通路与胚胎发育 | 第22-31页 |
| ·丝裂原活化蛋白激酶信号通路 | 第22-23页 |
| ·Wnt 信号通路 | 第23-24页 |
| ·PI3K/Akt 信号通路 | 第24-25页 |
| ·Notch 信号通路 | 第25-26页 |
| ·Janus 激酶-信号转导子与转录激活子信号通路 | 第26-27页 |
| ·骨形态发生蛋白信号通路 | 第27-28页 |
| ·信号网络与胚胎发育 | 第28-31页 |
| 试验部分 | 第31-71页 |
| 第三章 小鼠 2-细胞晚期胚胎基因表达谱的研究 | 第31-44页 |
| ·材料与方法 | 第31-35页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·试验动物 | 第32页 |
| ·小鼠胚胎第二次有丝分裂时程确定 | 第32页 |
| ·小鼠 2-细胞晚期胚胎基因表达谱 | 第32-33页 |
| ·小鼠 2－细胞晚期胚胎半定量 RT-PCR | 第33-35页 |
| ·结果 | 第35-42页 |
| ·小鼠胚胎第二次有丝分裂时程确定 | 第35页 |
| ·胚胎 Total RNA 的紫外分光光度检测及甲醛变性胶电泳 | 第35页 |
| ·经单轮和双轮扩增后的 cRNA 的紫外分光光度及甲醛变性胶电泳检测 | 第35-36页 |
| ·芯片结果 | 第36-38页 |
| ·差异基因的信号通路分析 | 第38-39页 |
| ·候选基因的筛选 | 第39页 |
| ·SuperScript Ⅲ CellsDirect cDNA Synthesis kit 的对照 | 第39-40页 |
| ·12 条基因的半定量 PCR 结果 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·芯片取样时间分析 | 第42页 |
| ·芯片结果分析与基因的筛选 | 第42页 |
| ·半定量 RT-PCR 结果分析 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 2-细胞晚期胚胎姐妹卵裂球间基因的差异表达初探 | 第44-48页 |
| ·材料与方法 | 第45页 |
| ·胚胎的收集 | 第45页 |
| ·单链 cDNA 的合成 | 第45页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第45页 |
| ·结果 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第五章 小鼠 2-细胞晚期胚胎姐妹卵裂球中 Axin1、Cdc25c 和 Cdkn2d mRNA 的荧光定量PCR 研究 | 第48-55页 |
| ·材料与方法 | 第48-49页 |
| ·小鼠 2-细胞胚胎卵裂球的收集 | 第48页 |
| ·cDNA 合成 | 第48-49页 |
| ·Axin1, Cdc25c and Cdkn2d mRNA 的荧光定量分析 | 第49页 |
| ·统计学分析 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-52页 |
| ·荧光定量 PCR 扩增后标准曲线 | 第49-52页 |
| ·Axin1、Cdc25c 和 Cdkn2d 荧光定量 PCR 的结果 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·mRNA 的不对称分布与细胞分化 | 第52-53页 |
| ·Axin1、Cdc25c 和 Cdkn2d 与第二次有丝分裂 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第六章 Axin1、Cdc25c 和 Cdkn2d 三种蛋白在 2-细胞姐妹卵裂球中的共定位研究 | 第55-66页 |
| ·材料与方法 | 第55-58页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·Axin、Cdc25c 和 Cdkn2d 多克隆抗体的制备 | 第55-57页 |
| ·-细胞晚期胚胎的免疫荧光染色 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-64页 |
| ·目的基因的获得 | 第58页 |
| ·PCR 产物的克隆鉴定与序列分析 | 第58-59页 |
| ·目标蛋白的表达及纯化 | 第59页 |
| ·多克隆抗体的纯化及检测 | 第59-61页 |
| ·免疫荧光染色 | 第61-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·Axin1、Cdc25c 和 Cdkn2d 原核表达载体的构建和多克隆抗体的制备 | 第64页 |
| ·Axin1、Cdc25c 和 Cdkn2d 的免疫荧光染色 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 第七章 不同构型小鼠 4-细胞胚胎基因差异表达研究 | 第66-71页 |
| ·材料与方法 | 第66-67页 |
| ·超数排卵与正常发情小鼠 4-细胞胚胎构型的观察 | 第66页 |
| ·4-细胞期不同构型胚胎的培养 | 第66-67页 |
| ·4-细胞期不同构型胚胎的收集 | 第67页 |
| ·单链 cDNA 的合成 | 第67页 |
| ·半定量 PCR 检测 | 第67页 |
| ·结果 | 第67-69页 |
| ·超数排卵与正常发情小鼠 4-细胞胚胎构型的观察与培养 | 第67页 |
| ·Βeta-actin 的 PCR 检测 | 第67页 |
| ·6 条基因的半定量 PCR 检测 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·超数排卵对早期胚胎发育的影响 | 第69页 |
| ·不同构型 4-细胞胚胎的基因表达差异 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 全文结论 | 第71-72页 |
| 创新之处和进一步研究的课题 | 第72-73页 |
| 创新之处 | 第72页 |
| 进一步研究的课题 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-86页 |
| 附录 1 主要溶液配制 | 第86-89页 |
| 附录 2 主要仪器 | 第89-90页 |
| 附录 3 缩略语 | 第90-92页 |
| 附录 4 半定量 RT-PCR 产物测序结果 | 第92-95页 |
| 附录 5 荧光定量 PCR 产物测序结果 | 第95-96页 |
| 附录 6 原核表达基因的测序结果 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简介 | 第98页 |
