摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 引言 | 第13-19页 |
·马铃薯Y 病毒的危害 | 第13页 |
·马铃薯Y 病毒病原学 | 第13-14页 |
·马铃薯Y 病毒的传播方式和主要防治策略 | 第14页 |
·植物病毒检测技术研究进展 | 第14-17页 |
·生物学鉴定 | 第15页 |
·光镜和电镜观察 | 第15页 |
·免疫学方法 | 第15页 |
·免疫电镜测定(ISEM) | 第15-16页 |
·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测 | 第16页 |
·核酸杂交技术检测 | 第16页 |
·PCR 检测技术及其新的发展 | 第16-17页 |
·拮抗细菌对烟草病害防治作用的研究 | 第17-18页 |
·研究目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 马铃薯Y 病毒拮抗细菌的筛选 | 第19-30页 |
·材料、试剂和仪器 | 第19页 |
·试验材料 | 第19页 |
·药品和试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·试验方法和步骤 | 第19-22页 |
·细菌的分离纯化培养 | 第19-20页 |
·Real-time PCR 定量检测PVY 体系的建立 | 第20-22页 |
·利用Real-time PCR 定量检测PVY 体系筛选PVY 拮抗细菌 | 第22页 |
·结果与分析 | 第22-27页 |
·细菌分离和纯化 | 第22-23页 |
·RNA 检测 | 第23页 |
·PVY 基因和actin 基因的标准曲线 | 第23页 |
·Real-time PCR 定量检测体系的准确性分析 | 第23-27页 |
·Real-time PCR 定量检测体系的重现性分析 | 第27页 |
·PVY 拮抗细菌 | 第27页 |
·讨论 | 第27-29页 |
·PVY 的主要检测手段 | 第27-28页 |
·荧光定量PCR 体系的优化 | 第28-29页 |
·小结 | 第29-30页 |
第三章 拮抗细菌C10 的分子鉴定 | 第30-38页 |
·材料、试剂和仪器 | 第30页 |
·材料 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·试验方法和步骤 | 第30-34页 |
·拮抗细菌C10 基因组DNA 的提取 | 第30-31页 |
·16s rDNA 扩增 | 第31-32页 |
·目的片段回收 | 第32页 |
·连接 | 第32-33页 |
·连接产物对感受态细胞的转化 | 第33页 |
·质粒提取 | 第33页 |
·重组克隆的双酶切鉴定 | 第33-34页 |
·16s rDNA 序列测定与分析 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-36页 |
·细菌C10 基因组DNA 提取结果 | 第34-35页 |
·16s rDNA 扩增产物检测 | 第35页 |
·双酶切鉴定重组克隆结果 | 第35页 |
·16s rDNA 序列测定结果 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第四章 拮抗细菌C10 活性蛋白的分离纯化 | 第38-45页 |
·材料、试剂和仪器 | 第38页 |
·供试材料 | 第38页 |
·药品和试剂 | 第38页 |
·仪器 | 第38页 |
·试验方法 | 第38-41页 |
·蛋白浓度测定 | 第38页 |
·C10 发酵液的制备 | 第38页 |
·上样蛋白的制备 | 第38-39页 |
·DEAE-SepharoseTM Fast Flow 阴离子交换层析 | 第39页 |
·离子交换层析后洗脱液中蛋白拮抗活性的测定 | 第39页 |
·Sephadex-G75 凝胶过滤层析 | 第39页 |
·凝胶过滤层析后洗脱液中蛋白拮抗活性的测定 | 第39页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第39-40页 |
·银染 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·蛋白质的沉淀方法比较 | 第43页 |
·离子交换层析和凝胶层析的选择 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-45页 |
第五章 作用机制初探 | 第45-55页 |
·材料、试剂和仪器 | 第45页 |
·试验材料 | 第45页 |
·试剂 | 第45页 |
·仪器 | 第45页 |
·试验方法和步骤 | 第45-47页 |
·透射电镜下观察C10 发酵液中活性蛋白对PVY 粒体形态的影响 | 第45-46页 |
·拮抗细菌C10 发酵液诱导三生-NN 烟系统抗性的研究 | 第46-47页 |
·C10 发酵液对感染PVY 的三生-NN 烟的作用研究 | 第47页 |
·结果与分析 | 第47-52页 |
·活性蛋白对PVY 粒体形态的影响 | 第47页 |
·C10 发酵液诱导三生-NN 烟产生系统抗性 | 第47-50页 |
·C10 发酵液对烟草叶片内POD 和PPO 活性的影响 | 第50-51页 |
·C10 发酵液对感染PVY 的三生-NN 烟体内病毒复制具有抑制作用 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
·天然产物对植物病毒粒体的体外抑制作用 | 第52-53页 |
·POD 和PPO 活性与烟草对病毒抗性的关系 | 第53-54页 |
·C10 对马铃薯Y 病毒病的拮抗作用机制较复杂 | 第54页 |
·小结 | 第54-55页 |
第六章 结论与讨论 | 第55-57页 |
·讨论 | 第55页 |
·C10 的开发应用前景 | 第55页 |
·PVY 生物防治展望 | 第55页 |
·主要结论 | 第55-56页 |
·创新点 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |