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PVY拮抗细菌的筛选及其作用机制研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-19页
   ·马铃薯Y 病毒的危害第13页
   ·马铃薯Y 病毒病原学第13-14页
   ·马铃薯Y 病毒的传播方式和主要防治策略第14页
   ·植物病毒检测技术研究进展第14-17页
     ·生物学鉴定第15页
     ·光镜和电镜观察第15页
     ·免疫学方法第15页
     ·免疫电镜测定(ISEM)第15-16页
     ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测第16页
     ·核酸杂交技术检测第16页
     ·PCR 检测技术及其新的发展第16-17页
   ·拮抗细菌对烟草病害防治作用的研究第17-18页
   ·研究目的和意义第18-19页
第二章 马铃薯Y 病毒拮抗细菌的筛选第19-30页
   ·材料、试剂和仪器第19页
     ·试验材料第19页
     ·药品和试剂第19页
     ·主要仪器第19页
   ·试验方法和步骤第19-22页
     ·细菌的分离纯化培养第19-20页
     ·Real-time PCR 定量检测PVY 体系的建立第20-22页
     ·利用Real-time PCR 定量检测PVY 体系筛选PVY 拮抗细菌第22页
   ·结果与分析第22-27页
     ·细菌分离和纯化第22-23页
     ·RNA 检测第23页
     ·PVY 基因和actin 基因的标准曲线第23页
     ·Real-time PCR 定量检测体系的准确性分析第23-27页
     ·Real-time PCR 定量检测体系的重现性分析第27页
     ·PVY 拮抗细菌第27页
   ·讨论第27-29页
     ·PVY 的主要检测手段第27-28页
     ·荧光定量PCR 体系的优化第28-29页
   ·小结第29-30页
第三章 拮抗细菌C10 的分子鉴定第30-38页
   ·材料、试剂和仪器第30页
     ·材料第30页
     ·试剂第30页
     ·主要仪器第30页
   ·试验方法和步骤第30-34页
     ·拮抗细菌C10 基因组DNA 的提取第30-31页
     ·16s rDNA 扩增第31-32页
     ·目的片段回收第32页
     ·连接第32-33页
     ·连接产物对感受态细胞的转化第33页
     ·质粒提取第33页
     ·重组克隆的双酶切鉴定第33-34页
     ·16s rDNA 序列测定与分析第34页
   ·结果与分析第34-36页
     ·细菌C10 基因组DNA 提取结果第34-35页
     ·16s rDNA 扩增产物检测第35页
     ·双酶切鉴定重组克隆结果第35页
     ·16s rDNA 序列测定结果第35-36页
   ·讨论第36-37页
   ·小结第37-38页
第四章 拮抗细菌C10 活性蛋白的分离纯化第38-45页
   ·材料、试剂和仪器第38页
     ·供试材料第38页
     ·药品和试剂第38页
     ·仪器第38页
   ·试验方法第38-41页
     ·蛋白浓度测定第38页
     ·C10 发酵液的制备第38页
     ·上样蛋白的制备第38-39页
     ·DEAE-SepharoseTM Fast Flow 阴离子交换层析第39页
     ·离子交换层析后洗脱液中蛋白拮抗活性的测定第39页
     ·Sephadex-G75 凝胶过滤层析第39页
     ·凝胶过滤层析后洗脱液中蛋白拮抗活性的测定第39页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第39-40页
     ·银染第40-41页
   ·结果与分析第41-43页
   ·讨论第43-44页
     ·蛋白质的沉淀方法比较第43页
     ·离子交换层析和凝胶层析的选择第43-44页
   ·小结第44-45页
第五章 作用机制初探第45-55页
   ·材料、试剂和仪器第45页
     ·试验材料第45页
     ·试剂第45页
     ·仪器第45页
   ·试验方法和步骤第45-47页
     ·透射电镜下观察C10 发酵液中活性蛋白对PVY 粒体形态的影响第45-46页
     ·拮抗细菌C10 发酵液诱导三生-NN 烟系统抗性的研究第46-47页
     ·C10 发酵液对感染PVY 的三生-NN 烟的作用研究第47页
   ·结果与分析第47-52页
     ·活性蛋白对PVY 粒体形态的影响第47页
     ·C10 发酵液诱导三生-NN 烟产生系统抗性第47-50页
     ·C10 发酵液对烟草叶片内POD 和PPO 活性的影响第50-51页
     ·C10 发酵液对感染PVY 的三生-NN 烟体内病毒复制具有抑制作用第51-52页
   ·讨论第52-54页
     ·天然产物对植物病毒粒体的体外抑制作用第52-53页
     ·POD 和PPO 活性与烟草对病毒抗性的关系第53-54页
     ·C10 对马铃薯Y 病毒病的拮抗作用机制较复杂第54页
   ·小结第54-55页
第六章 结论与讨论第55-57页
   ·讨论第55页
     ·C10 的开发应用前景第55页
     ·PVY 生物防治展望第55页
   ·主要结论第55-56页
   ·创新点第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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