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淡色库蚊酚氧化酶proPOA3基因克隆及其与溴氰菊酯抗性关系的研究

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
前言第14-17页
第一部分 淡色库蚊proPOA3基因克隆与鉴定第17-36页
 材料与方法第17-28页
  1 材料第17-18页
   ·供试蚊第17页
   ·主要试剂第17-18页
   ·主要仪器第18页
  2 方法第18-28页
   ·淡色库蚊proPOA3克隆第18-27页
   ·生物信息学分析第27-28页
 结果第28-34页
  1 淡色库蚊proPOA3克隆第28-30页
   ·淡色库蚊RNA的提取及鉴定第28页
   ·淡色库蚊proPOA3基因ORF序列扩增第28-29页
   ·淡色库蚊proPOA3基因5’端以及3’端序序列扩增第29-30页
   ·淡色库蚊proPOA3基因全长序列拼接第30页
  2 淡色库蚊proPOA3基因生物信息学分析第30-34页
   ·淡色库蚊proPOA3基因序列分析第30页
   ·淡色库蚊proPOA3基因同源性分析第30-33页
   ·淡色库蚊proPOA3基因进化树分析第33页
   ·淡色库蚊proPOA3基因编码蛋白结构域分析第33-34页
 讨论第34-36页
第二部分 淡色库蚊proPOA3基因高表达对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响第36-55页
 材料与方法第36-49页
  1 材料第36-37页
   ·供试蚊及细胞系第36-37页
   ·主要试剂第37页
   ·主要仪器第37页
  2 方法第37-49页
   ·淡色库蚊proPOA3昆虫表达载体构建第38-41页
   ·淡色库蚊proPOA3瞬时转染对蚊细胞溴氰菊酯敏感性测定第41-43页
   ·瞬时转染效率鉴定第43-49页
 结果第49-52页
  1 淡色库蚊proPOA3昆虫表达载体构建第49-50页
  2 ProPOA3瞬时转染鉴定第50-51页
   ·RT-PCR鉴定第50页
   ·Western blot鉴定第50-51页
  3 淡色库蚊proPOA3 高表达后蚊细胞对溴氰菊酯敏感性的变化第51-52页
 讨论第52-55页
第三部分 ProPOA3在溴氰菊酯不同抗性水平蚊种群中的表达分析材料与方法第55-67页
 材料与方法第55-61页
  1 材料第55-56页
   ·供试蚊第55-56页
   ·主要试剂第56页
   ·主要仪器第56页
  2 方法第56-61页
   ·淡色库蚊现场自然种群proPOA3的表达分析第56-58页
   ·三带喙库蚊、中华按蚊和微小按蚊现场自然种群proPOA3的表达分析第58-59页
   ·淡色库蚊溴氰菊酯逐代筛选种群proPOA3的表达分析第59-61页
 结果第61-65页
  1 ProPOA3在淡色库蚊自然种群敏感、抗性组中的表达差异第61页
  2 ProPOA3在不同蚊种自然种群敏感、抗性组中的表达差异第61-62页
  3 ProPOA3 在淡色库蚊溴氰菊酯逐代筛选种群中的表达差异第62-65页
   ·淡色库蚊溴氰菊酯逐代筛选种群的实验室选育第62页
   ·ProPOA3在淡色库蚊溴氰菊酯逐代筛选种群中的表达变化第62-65页
 讨论第65-67页
第四部分 ProPOA3在溴氰菊酯不同抗性水平蚊种群中的基因多态性分析第67-78页
 材料与方法第67-71页
  1 材料第67-68页
   ·供试蚊第67-68页
   ·主要试剂第68页
   ·主要仪器第68页
  2 方法第68-71页
   ·淡色库蚊自然种群proPOA3基因的多态性分析第68-70页
   ·淡色库蚊溴氰菊酯逐代筛选种群proPOA3基因的多态性分析第70-71页
 结果第71-75页
  1 淡色库蚊自然种群proPOA3基因多态性检测第71-72页
   ·单蚊基因组DNA提取第71页
   ·淡色库蚊自然种群proPOA3基因多态性第71-72页
  2 淡色库蚊溴氰菊酯逐代筛选种群proPOA3基因多态性检测第72-75页
   ·单蚊基因组DNA提取第72页
   ·淡色库蚊溴氰菊酯逐代筛选种群proPOA3基因多态性变化第72-75页
 讨论第75-78页
参考文献第78-89页
综述第89-103页
 参考文献第98-103页
攻读学位期间发表文章情况第103-104页
致谢第104页

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