| 符号说明 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 第一章 文献回顾 | 第16-22页 |
| ·人肝细胞色素P450 酶研究进展 | 第16-18页 |
| ·CYP450 酶的命名 | 第16页 |
| ·CYP450 酶的结构、分类及分布 | 第16页 |
| ·CYP450 酶对药物代谢的影响 | 第16-17页 |
| ·中药对细胞色素P450 影响的研究进展 | 第17-18页 |
| ·CYP2C19 及其等位基因多态性研究进展 | 第18-22页 |
| ·CYP2C19 位置及其结构 | 第19页 |
| ·CYP2C19 基因多态性及表型分布 | 第19-20页 |
| ·CYP2C19 参与代谢底物 | 第20页 |
| ·CYP2C19 基因多态性与药物代谢 | 第20-22页 |
| 第二章 CYP2C19 基因多态性真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立 | 第22-39页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·主要试验试剂及耗材 | 第22页 |
| ·主要试验仪器设备 | 第22-23页 |
| ·主要试剂配制 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-33页 |
| ·引物设计与合成 | 第24页 |
| ·人肝脏CYP2C19*1 cDNA的扩增 | 第24-25页 |
| ·目的基因野生型T载体的构件及测序鉴定 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化（CaCl2 法） | 第25-26页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| ·人肝脏CYP2C19 重组表达载体的构建及鉴定 | 第26-28页 |
| ·细胞培养及转染 | 第28页 |
| ·G418 筛选稳定表达目的基因的细胞株 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR 检测各稳转细胞系 CYP2C19 SNPs mRNA 表达水平 | 第29-30页 |
| ·Western-Blott 检测各稳转细胞系 CYP2C19 SNPs 蛋白表达 | 第30-33页 |
| ·结果 | 第33-37页 |
| ·人肝脏中提取的CYP2C19*1 野生型mRNA | 第33页 |
| ·pcDNA3.1(-)-CYP2C19 重组表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·稳定表达CYP2C19 各目的基因HepG2 细胞系鉴定 | 第34-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·CYPs异源表达体系的选择 | 第37页 |
| ·表达产物的分析 | 第37页 |
| ·重组CYPs的应用前景 | 第37-39页 |
| 第三章 人重组CYP2C19 基因多态性酶动力学分析及基于荧光的药物高通量筛选 | 第39-48页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·主要主要试验试剂及耗材 | 第39页 |
| ·主要试验仪器设备 | 第39页 |
| ·主要试剂配制 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| ·酶促反应条件优化 | 第40-41页 |
| ·酶动力学分析 | 第41页 |
| ·反苯环丙胺对人重组CYP2C19 野生株的抑制实验 | 第41-42页 |
| ·药物高通量筛选 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-47页 |
| ·酶促反应条件的优化与确定 | 第43页 |
| ·酶促反应时间线性的确定 | 第43-44页 |
| ·人重组CYP2C19 基因多态性酶动力学分析 | 第44-45页 |
| ·反苯环丙胺对人重组CYP2C19 野生型细胞株的抑制反应 | 第45页 |
| ·药物高通量筛选 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 全文总结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附图 | 第56-59页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
