| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 1 禽类非特异性免疫及昆虫杆状病毒综述 | 第13-44页 |
| ·禽类非特异性免疫研究进展 | 第13-24页 |
| ·非特异性免疫细胞及其主要作用 | 第13-16页 |
| ·细胞因子及其主要作用 | 第16-19页 |
| ·细胞信号转导 | 第19-22页 |
| ·禽用非特异性免疫增强剂研究进展 | 第22-24页 |
| ·昆虫杆状病毒简介 | 第24-32页 |
| ·杆状病毒的结构和分类 | 第24-26页 |
| ·杆状病毒的生活史 | 第26-27页 |
| ·杆状病毒侵染细胞的机制 | 第27-28页 |
| ·杆状病毒的应用 | 第28-30页 |
| ·杆状病毒对哺乳动物非特异性免疫功能的增强作用 | 第30-31页 |
| ·柞蚕杆状病毒简介 | 第31-32页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第32页 |
| 参考文献 | 第32-44页 |
| 2 柞蚕杆状病毒对禽类非特异性免疫的激活作用 | 第44-63页 |
| ·材料与设备 | 第44-46页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·实验试剂 | 第44-45页 |
| ·实验试剂配制 | 第45页 |
| ·实验仪器 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-52页 |
| ·外周血单个核细胞分离方法 | 第46-47页 |
| ·原代巨噬细胞分离培养 | 第47页 |
| ·鸡异嗜白细胞分离方法 | 第47页 |
| ·巨噬细胞系(HD11)培养 | 第47页 |
| ·柞蚕出芽型杆状病毒粒子(BV)的提取 | 第47-48页 |
| ·病毒含量测定 | 第48页 |
| ·NO含量测定 | 第48-49页 |
| ·鸡异嗜白细胞脱粒作用检测 | 第49页 |
| ·细胞因子mRNA表达量的测定 | 第49-51页 |
| ·鸡胚半数感染量(EID_(50))的测定 | 第51页 |
| ·活体攻毒实验 | 第51-52页 |
| ·统计学分析 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-59页 |
| ·RNA质量测定结果 | 第52-53页 |
| ·实时定量PCR标准曲线制作 | 第53页 |
| ·BV对外周血单个核细胞激活作用 | 第53-55页 |
| ·BV对鸡巨噬细胞系HD11的激活作用 | 第55-57页 |
| ·BV对原代巨噬细胞的激活作用 | 第57-58页 |
| ·BV对鸡异嗜白细胞的激活作用 | 第58-59页 |
| ·活体攻毒实验 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·小结 | 第61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 3 柞蚕杆状病毒侵入鸡巨噬细胞的机制 | 第63-76页 |
| ·材料与设备 | 第63-65页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·实验试剂 | 第64页 |
| ·实验试剂配制 | 第64页 |
| ·实验仪器 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-67页 |
| ·细胞培养 | 第65页 |
| ·BV病毒粒子提取 | 第65页 |
| ·柞蚕包涵体型杆状病毒粒子(ODV)的提取 | 第65页 |
| ·BV/ODV的DNA提取 | 第65-66页 |
| ·柞蚕出芽型杆状病毒液(BV)纯度分析 | 第66页 |
| ·BV灭活试验 | 第66页 |
| ·病毒DNA的转染试验 | 第66-67页 |
| ·HD11细胞膜内吞和内体成熟抑制试验 | 第67页 |
| ·统计学分析 | 第67页 |
| ·实验结果 | 第67-72页 |
| ·dsRNA、DNA和脂多糖对试验结果影响的分析 | 第67-69页 |
| ·不同BV灭活方式对其诱导HD11细胞活化的影响 | 第69页 |
| ·BV DNA诱导HD11细胞活化的验证 | 第69-70页 |
| ·ODV及其DNA对HD11细胞活化的影响 | 第70-71页 |
| ·MDC对BV诱导HD11细胞IL-12 mRNA表达的影响 | 第71页 |
| ·氯喹对BV及LPS诱导HD11细胞IL-12 mRNA表达的影响 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| ·小结 | 第74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 4 BV激活HD11细胞的Toll样受体分析 | 第76-91页 |
| ·材料与设备 | 第77页 |
| ·实验材料 | 第77页 |
| ·实验试剂 | 第77页 |
| ·实验试剂配制 | 第77页 |
| ·实验仪器 | 第77页 |
| ·实验方法 | 第77-81页 |
| ·细胞培养 | 第77-78页 |
| ·BV病毒粒子提取 | 第78页 |
| ·未激活的HD11细胞中各ChTLR的表达分析 | 第78-79页 |
| ·BV诱导HD11细胞ChTLR表达的检测 | 第79-80页 |
| ·siRNA转染HD11细胞 | 第80页 |
| ·siRNA浓度对HD11细胞表达ChTLR21的影响 | 第80页 |
| ·siRNA对BV诱导HD11细胞表达ChTLR21的影响 | 第80页 |
| ·siRNA对BV诱导的HD11细胞免疫反应的影响 | 第80-81页 |
| ·统计学分析 | 第81页 |
| ·实验结果 | 第81-86页 |
| ·未激活HD11细胞中各ChTLR的表达 | 第81页 |
| ·实时定量标准曲线制作 | 第81-82页 |
| ·BV对HD11细胞中各ChTLR表达的影响 | 第82-83页 |
| ·siRNA浓度对HD11细胞ChTLR21表达的影响 | 第83页 |
| ·siRNA对BV诱导的HD11细胞TLR21表达的影响 | 第83-84页 |
| ·ChTLR21 siRNA对BV诱导HD11细胞表达细胞因子的影响 | 第84-85页 |
| ·ChTLR21siRNA对BV诱导HD11细胞分泌NO的影响 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| ·小结 | 第88页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 5 BV激活HD11细胞的MAPK及NF-κ B信号转导通路研究 | 第91-107页 |
| ·材料与设备 | 第91-94页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·实验试剂 | 第91-92页 |
| ·实验试剂配制 | 第92-93页 |
| ·实验仪器 | 第93-94页 |
| ·实验方法 | 第94-97页 |
| ·细胞培养 | 第94页 |
| ·BV病毒粒子提取 | 第94页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第94页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第94-95页 |
| ·转膜方法 | 第95页 |
| ·免疫印迹 | 第95-96页 |
| ·蛋白抑制剂的抑制效果分析 | 第96页 |
| ·蛋白抑制剂对BV诱导的HD11细胞免疫反应的影响 | 第96-97页 |
| ·统计学分析 | 第97页 |
| ·实验结果 | 第97-102页 |
| ·BV对MAPK家族各通路的活化 | 第97-98页 |
| ·p38 MAPK抑制剂对BV诱导的HD11细胞活化的影响 | 第98-99页 |
| ·JNK抑制剂对BV诱导的HD11细胞活化的影响 | 第99-100页 |
| ·ERK抑制剂对BV诱导的HD11细胞活化的影响 | 第100-101页 |
| ·BV对NF-κ B通路的活化 | 第101页 |
| ·NF-κ B抑制剂对BV诱导的HD11细胞活化的影响 | 第101-102页 |
| ·讨论 | 第102-105页 |
| ·小结 | 第105页 |
| 参考文献 | 第105-107页 |
| 6 结论与展望 | 第107-110页 |
| ·结论 | 第107页 |
| ·创新点摘要 | 第107-108页 |
| ·有待进一步开展的工作 | 第108页 |
| ·展望 | 第108-110页 |
| 附录A 缩略词表 | 第110-113页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 作者简介 | 第115-116页 |
