| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 第1章 引言 | 第14-35页 |
| ·海洋球石藻病毒的研究概况 | 第14-22页 |
| ·海洋球石藻病毒的分类及分布 | 第14-15页 |
| ·海洋球石藻病毒的生活史 | 第15-16页 |
| ·海洋球石藻病毒的基因组结构 | 第16-18页 |
| ·海洋球石藻病毒的系统发育特征 | 第18-19页 |
| ·海洋球石藻病毒介导的基因横向转移 | 第19-22页 |
| ·海洋球石藻病毒的功能基因 | 第22-28页 |
| ·硫氧还蛋白基因 | 第22-24页 |
| ·主要外壳蛋白基因 | 第24-25页 |
| ·丝氨酸蛋白酶基因 | 第25-26页 |
| ·鞘脂类物质合成基因 | 第26-27页 |
| ·其它功能基因 | 第27-28页 |
| ·海洋球石藻病毒 SPT 基因 | 第28-32页 |
| ·海洋球石藻病毒 SPT 独特的基因结构 | 第28-29页 |
| ·海洋球石藻病毒 SPT 可能的关联蛋白 | 第29页 |
| ·海洋球石藻病毒 SPT 的底物偏好性 | 第29-30页 |
| ·海洋球石藻病毒 SPT 的抑制剂 | 第30页 |
| ·海洋球石藻病毒 SPT 可能的调控方式 | 第30-31页 |
| ·海洋球石藻病毒 SPT﹑神经酰胺合成和宿主细胞程序性死亡之间的关系 | 第31-32页 |
| ·神经酰胺在细胞代谢中的作用及其应用前景 | 第32-33页 |
| ·神经酰胺诱导的细胞凋亡 | 第32-33页 |
| ·神经酰胺的应用潜力 | 第33页 |
| ·本论文的研究目的与意义 | 第33-35页 |
| 第2章 海洋球石藻病毒丝氨酸棕榈酰转移酶(SPT)亚基基因 LCB2 的克隆﹑表达和活性鉴定 | 第35-54页 |
| ·材料与方法 | 第36-43页 |
| ·实验藻种、病毒株 | 第36页 |
| ·实验试剂、菌种和质粒 | 第36页 |
| ·海洋球石藻的培养及其病毒颗粒的增殖 | 第36页 |
| ·EhV99B1 病毒颗粒的超滤浓缩和保存 | 第36-37页 |
| ·EhV99B1-SPT 全长基因的克隆和生物信息学分析 | 第37-40页 |
| ·EhV99B1-LCB2 亚基基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·重组 EhV99B1-LCB2 表达质粒的构建 | 第41-42页 |
| ·重组 EhV99B1-LCB2 质粒的诱导表达 | 第42页 |
| ·重组 EhV99B1-LCB2 活性鉴定 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-52页 |
| ·EhV99B1-SPT 基因的扩增及 T 克隆的构建 | 第43页 |
| ·EhV99B1-SPT 的生物信息学特征 | 第43-49页 |
| ·EhV99B1-LCB2 亚基基因的克隆﹑表达和活性鉴定 | 第49-52页 |
| ·分析与讨论 | 第52-54页 |
| ·EhV99B1 介导的基因横向转移 | 第52页 |
| ·EhV99B1-SPT 的结构特点 | 第52-54页 |
| 第3章 海洋球石藻神经酰胺类物质的鉴定及其 HPLC 测定方法的建立 | 第54-66页 |
| ·材料与方法 | 第56-59页 |
| ·试剂和仪器 | 第56页 |
| ·海洋球石藻的培养 | 第56页 |
| ·海洋球石藻神经酰胺的薄层层析法分析和鉴定 | 第56-57页 |
| ·海洋球石藻神经酰胺苯甲酰化后的薄层层析法分析和鉴定 | 第57-58页 |
| ·海洋球石藻细胞中神经酰胺高效液相色谱(HPLC)检测方法的建立 | 第58-59页 |
| ·实验结果 | 第59-63页 |
| ·薄层层析法鉴定海洋球石藻细胞中的神经酰胺 | 第59页 |
| ·薄层层析法鉴定苯甲酰化后的球石藻神经酰胺样品 | 第59-61页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)检测海洋球石藻两种神经酰胺的含量 | 第61-63页 |
| ·分析与讨论 | 第63-66页 |
| 第4章 海洋球石藻病毒感染诱导其 SPT 基因的表达特征及其与宿主神经酰胺合成之间的关系 | 第66-82页 |
| ·材料与方法 | 第67-71页 |
| ·主要的仪器和试剂 | 第67页 |
| ·海洋球石藻细胞的培养及其病毒的感染 | 第67页 |
| ·海洋球石藻细胞总 RNA 的提取 | 第67-68页 |
| ·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第68页 |
| ·引物设计 | 第68页 |
| ·RT-PCR 扩增目的基因 | 第68-69页 |
| ·实时荧光定量 PCR 测定 EhV99B1-SPT 基因的相对表达量 | 第69-70页 |
| ·海洋球石藻细胞总蛋白的提取 | 第70页 |
| ·Western Bloting 技术分析 EhV99B1-SPT 蛋白的相对表达量 | 第70页 |
| ·EhV99B1 感染不同时间段球石藻细胞内神经酰含量的变化 | 第70-71页 |
| ·实验结果 | 第71-79页 |
| ·EhV99B1 感染对宿主细胞生长的影响 | 第71页 |
| ·荧光定量 PCR 中 2-ΔΔCt 法评价 | 第71-75页 |
| ·EhV99B1 感染对 EhV99B1-SPT 基因转录水平的影响 | 第75-77页 |
| ·EhV99B1 感染抑制宿主细胞蛋白质的合成 | 第77页 |
| ·EhV99B1 感染对 EhV99B1-SPT 基因在翻译水平的影响 | 第77-78页 |
| ·EhV99B1 感染对宿主细胞神经酰胺含量的影响 | 第78-79页 |
| ·分析与讨论 | 第79-82页 |
| ·EhV99B1-SPT 基因在转录水平的表达特征 | 第79-80页 |
| ·EhV99B1-SPT 在翻译水平的表达特征 | 第80页 |
| ·EhV99B1-SPT 基因的表达导致宿主神经酰胺的积累 | 第80-82页 |
| 第5章 本论文的主要结果与创新点 | 第82-84页 |
| ·本论文的主要结论 | 第82页 |
| ·本论文的创新点 | 第82-83页 |
| ·研究展望 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-99页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第99页 |
