| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-17页 |
| ·CSFV基因组的结构 | 第12-13页 |
| ·N~(pro)蛋白 | 第13页 |
| ·RANTES概述 | 第13-14页 |
| ·化学结构 | 第13页 |
| ·作用机制 | 第13-14页 |
| ·功能研究 | 第14页 |
| ·调控RANTES的信号转导途径 | 第14-17页 |
| ·丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)通路 | 第15页 |
| ·NF-κB途径 | 第15页 |
| ·JAK-STAT途径 | 第15页 |
| ·PKC途径 | 第15-16页 |
| ·磷脂酰肌醇3-激酶(p13-K)途径 | 第16页 |
| ·CD28通路 | 第16-17页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 第3章 材料与方法 | 第18-28页 |
| ·试验材料 | 第18-20页 |
| ·毒株、细胞与菌株 | 第18页 |
| ·载体与质粒 | 第18-19页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第19页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第19页 |
| ·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20-28页 |
| ·CSFV的增殖 | 第20页 |
| ·细胞基因组的提取 | 第20页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第20页 |
| ·PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第20-21页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第21页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第22页 |
| ·连接产物的转化 | 第22页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第22-24页 |
| ·脂质体介导转染法 | 第24-25页 |
| ·CSFV感染后细胞上清中病毒的50%组织细胞感染量(TCID_(50))的检测 | 第25页 |
| ·实时荧光定量PCR检测感染CSFV的PK-15细胞中RANTES相对表达水平 | 第25-26页 |
| ·荧光素酶报告基因的检测 | 第26页 |
| ·重叠延伸PCR基本操作流程及示意图 | 第26-28页 |
| 第4章 结果与分析 | 第28-45页 |
| ·CSFV感染PK-15细胞后RANTES mRNA表达的动力学 | 第28-31页 |
| ·CSFV感染力(TCID_(50))的测定 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR检测CSFV抑制poly(I:C)诱导RANTES | 第29-30页 |
| ·猪RANTES启动子荧光素酶报告系统的建立 | 第30页 |
| ·CSFV能抑制poly(I:C)诱导的RANTES | 第30-31页 |
| ·CSFV N~(pro)参与抑制RANTES表达 | 第31-42页 |
| ·RT-PCR扩增CSFV的各cDNA片段 | 第31-34页 |
| ·CSFV各蛋白cDNA片段酶切 | 第34-35页 |
| ·CSFV抑制poly(I:C)诱导的RANTES与N~(pro)有关 | 第35页 |
| ·猪RANTES启动子突变体的构建 | 第35-38页 |
| ·N~(pro)抑制RANTES与RANTES启动子区域ISRE结合位点有关 | 第38-40页 |
| ·N~(pro)N端21位氨基酸对于抑制poly(I:C)诱导的RANTES不是必需的 | 第40-41页 |
| ·N~(pro)抑制poly(I:C)诱导的RANTES的与其切割活性有关 | 第41-42页 |
| ·CSFV感染抑制RANTES表达信号通路的研究 | 第42-45页 |
| 5 讨论与结论 | 第45-49页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| ·猪RANTES启动子荧光素酶报告系统的构建 | 第45页 |
| ·CSFV N~(pro)抑制poly(I:C)诱导的RANTES | 第45-46页 |
| ·RIG-I/MADA5参与N~(pro)抑制poly(I:C)诱导的RANTES | 第46-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58页 |
