棉铃虫滞育相关基因蜕皮激素调节蛋白和FK506结合蛋白的研究
缩略词表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第9-12页 |
·昆虫滞育研究和进展 | 第9-10页 |
·棉铃虫的滞育研究 | 第10页 |
·差异显示技术(DD-PCR) | 第10-12页 |
第二章 材料与方法 | 第12-26页 |
·棉铃虫的饲养和基本操作 | 第12页 |
·细胞的培养 | 第12-13页 |
·传代培养 | 第12页 |
·细胞的冻存 | 第12页 |
·细胞的复苏 | 第12-13页 |
·细胞转染 | 第13页 |
·细胞计数 | 第13页 |
·组织和细胞的收集 | 第13-14页 |
·总RNA 的抽提 | 第14页 |
·反转录合成cDNA 第一链 | 第14页 |
·DD-PCR | 第14-17页 |
·差异显示的基本原理 | 第14-15页 |
·测序凝胶板的制备 | 第15-16页 |
·玻璃板的处理 | 第15-16页 |
·凝胶的制备 | 第16页 |
·电泳 | 第16页 |
·预电泳 | 第16页 |
·样品的制备 | 第16页 |
·上样及电泳 | 第16页 |
·银染 | 第16-17页 |
·Real-Time PCR | 第17-18页 |
·PCR 反应 | 第18页 |
·RACE反应 | 第18-19页 |
·质粒DNA 小量抽提 | 第19-20页 |
·感受态细胞制备和连接转化 | 第20-21页 |
·感受态细胞制备 | 第20页 |
·连接 | 第20页 |
·转化过程 | 第20-21页 |
·DNA 电泳和DNA 胶回收 | 第21页 |
·DNA 重组 | 第21页 |
·随机引物法标记杂交探针 | 第21页 |
·Northern 杂交 | 第21-24页 |
·制备变性胶 | 第21页 |
·电泳 | 第21-22页 |
·转膜 | 第22页 |
·预杂交 | 第22页 |
·杂交 | 第22页 |
·洗膜 | 第22页 |
·曝光显影 | 第22页 |
·洗膜 | 第22-24页 |
·免疫组化 | 第24页 |
·数据的统计和分析 | 第24-26页 |
第三章 微分差异显示(DD-PCR) | 第26-30页 |
·DD-PCR差异显示结果 | 第26-27页 |
·差异片段的序列分析 | 第27页 |
·差异鉴定 | 第27-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第四章 蜕皮激素调节蛋白(e5116) | 第30-35页 |
·棉铃虫 esr16 cDNA 的克隆 | 第30页 |
·原核表达制备抗体 | 第30-31页 |
·esr16 mRNA 和蛋白的组织分布 | 第31-32页 |
·esr16 mRNA 和蛋白的发育时相变化 | 第32-33页 |
·研究在滞育解除过程中 esr16 表达量变化 | 第33页 |
·细胞水平 esr16 应答 20E 的表达变化 | 第33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
第五章 FK506 结合蛋白(FKBP12) | 第35-41页 |
·棉铃虫FKBP12 cDNA 的克隆 | 第35-36页 |
·原核表达制备抗体 | 第36页 |
·FKBP12 mRNA 和蛋白的组织分布 | 第36-37页 |
·FKBP12 mRNA 和蛋白的发育时相变化 | 第37-38页 |
·研究在滞育解除过程中FKBP12 表达量变化 | 第38页 |
·细胞水平FKBP12应答20E的表达变化 | 第38页 |
·滞育蛹与非滞育蛹中TOR 基因的表达变化 | 第38-39页 |
·RNAi | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
硕士期间已发表和待发表的论文 | 第49页 |