| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一部分 小鼠ES细胞分化肝细胞表型及功能的时程研究 | 第17-30页 |
| 一、材料与仪器 | 第18-19页 |
| 二、实验方法 | 第19-23页 |
| (一)ES细胞支持培养 | 第19-20页 |
| (二)ES细胞体外分化为肝细胞培养 | 第20-21页 |
| (三)RT-PCR法检测肝细胞发育依赖性基因表达 | 第21-22页 |
| (四)免疫荧光法检测肝细胞表型及特征性白蛋白表达 | 第22-23页 |
| (五)ELISA法检测上清液白蛋白分泌量 | 第23页 |
| 三、实验结果 | 第23-27页 |
| (一)ES细胞及不同分化阶段的细胞形态观察 | 第23-25页 |
| (二)肝细胞发育依赖性基因在分化过程中的表达 | 第25-26页 |
| (三)肝细胞特征性蛋白在分化细胞中的表达情况 | 第26-27页 |
| (四)白蛋白在分化过程中的分泌变化 | 第27页 |
| 四、讨论 | 第27-29页 |
| 五、小结 | 第29-30页 |
| 第二部分 微粒体Ⅱ相代谢酶在ES细胞分化为肝细胞过程中的表达 | 第30-42页 |
| 一、材料与仪器 | 第31-33页 |
| 二、实验方法 | 第33-36页 |
| (一)RT-PCR法检测Ⅱ相代谢酶基因表达 | 第33-35页 |
| (二)Westernblot法检测UGT1a1、UGT1a6、mGST1蛋白表达 | 第35-36页 |
| 三、实验结果 | 第36-40页 |
| (一)Ⅱ相代谢酶基因在分化肝细胞过程中的基因表达 | 第36-37页 |
| (二)UGTs在分化肝细胞过程中的蛋白表达 | 第37-39页 |
| (三)mGST1在分化肝细胞过程中的蛋白表达 | 第39-40页 |
| 四.讨论 | 第40-41页 |
| 五.小结 | 第41-42页 |
| 第三部分 微粒体Ⅱ相代谢酶在ES细胞分化肝细胞中的代谢功能研究 | 第42-53页 |
| 一、材料与仪器 | 第42-44页 |
| 二、实验方法 | 第44-48页 |
| (一)HPLC法检测在ES分化的肝细胞UGTs代谢活性 | 第44-46页 |
| (二)mGST1在ES分化的肝细胞中的代谢活性 | 第46-48页 |
| 三、实验结果 | 第48-51页 |
| (一)分化成熟肝细胞UGTs的代谢活性 | 第48-50页 |
| (二)分化成熟肝细胞mGST1的代谢活性 | 第50-51页 |
| 四、讨论 | 第51-52页 |
| 五、小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 综述 | 第57-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
