| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 名词缩写 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-11页 |
| 第二章 文献综述 | 第11-23页 |
| 类胡萝卜素的代谢途径及代谢工程研究进展 | 第11-23页 |
| 一． 类胡萝卜素的生物合成途径及其在细菌、真菌、藻类和高等植物中的比较 | 第11-16页 |
| （一） 类胡萝卜素代谢途径概述 | 第12-14页 |
| （二） 细菌、藻类、真菌和高等植物的类胡萝卜素代谢途径的比较 | 第14-16页 |
| 二． 类胡萝卜素代谢途径的主要酶和基因 | 第16-18页 |
| 三． 类胡萝卜素代谢工程 | 第18-21页 |
| （一） 大肠杆菌和酵母菌中类胡萝卜素的基因工程 | 第18-19页 |
| （二） 通过基因组合控制类胡萝卜素代谢途径 | 第19-20页 |
| （三） 植物中类胡萝卜素合成的转基因操作 | 第20-21页 |
| 四． 类胡萝卜素代谢工程展望 | 第21-23页 |
| 第三章 材料与方法 | 第23-38页 |
| 一． 材料 | 第23页 |
| 二． 主要仪器 | 第23-24页 |
| 三． 方法 | 第24-38页 |
| （一） RNA的提取（TE3D法）和DNaseI处理 | 第24-25页 |
| 1． RNA提取：（TE3D法） | 第24页 |
| 2． DNaseI处理RNA样品 | 第24-25页 |
| （二） RT反应及RT-PCR反应 | 第25-29页 |
| 1． RT反应 | 第25页 |
| 2． RT-PCR反应 | 第25-26页 |
| 3． 简并引物的设计 | 第26-29页 |
| （三） Southern杂交 | 第29-36页 |
| 1． 探针的来源 | 第29页 |
| 2． 探针的获得 | 第29-34页 |
| （1）． GGPS，PSY，PDS，β—LYS，ε—LYS，BCH，VDE，ZEP探针的获得 | 第30-32页 |
| Ⅰ 感受态细胞的制备 | 第30页 |
| Ⅱ 质粒DNA的转化 | 第30-31页 |
| Ⅲ 质粒DNA的提取 | 第31页 |
| Ⅳ 酶切鉴定 | 第31-32页 |
| Ⅴ 琼脂糖中DNA的快速回收 | 第32页 |
| （2）． ZDS探针的获得 | 第32-34页 |
| Ⅰ 根据已发表的拟南芥中ZDS序列设计特异性引物 | 第32页 |
| Ⅱ 从本实验室已有的拟南芥基因组DNA中PCR扩增出特异片断 | 第32-33页 |
| Ⅲ PCR产物测序 | 第33-34页 |
| 3． 探针的标记 | 第34页 |
| 4． 电泳及转膜 | 第34-35页 |
| 5． Southern杂交 | 第35-36页 |
| 6． 检测 | 第36页 |
| （四） 高效液相色谱（HPLC）测定类胡萝卜素含量 | 第36-38页 |
| 1． 试剂 | 第36页 |
| 2． 仪器 | 第36-37页 |
| 3． 样品中类胡萝卜素的提取 | 第37页 |
| 4． 标准液的配制 | 第37页 |
| 5． 色谱条件 | 第37页 |
| 6． 类胡萝卜素含量的计算 | 第37-38页 |
| 第四章 结果与分析 | 第38-54页 |
| （一） RNA的提取 | 第38页 |
| （二） 简并引物的筛选 | 第38-39页 |
| （三） 探针的获得 | 第39-43页 |
| 1． GGPS，PSY，PDS，BCH，LYS，VDE，ZEP探针的回收 | 第39-41页 |
| 2． ZDS探针的制备 | 第41-43页 |
| （四） RT-PCR及Southern杂交检测 | 第43-47页 |
| （五） 高效液相色谱（HPLC）测定类胡萝卜素含量 | 第47-54页 |
| 1． 吸收波长的选择 | 第47页 |
| 2． 流动相的选择 | 第47页 |
| 3． 定性分析 | 第47页 |
| 4． 标准工作曲线 | 第47-48页 |
| 5． 8个样品中类胡萝卜素含量 | 第48-54页 |
| 第五章 讨论 | 第54-59页 |
| （一） 本研究采用的技术特点 | 第54页 |
| （二） 比较分析橘红心大白菜和普通大白菜成熟期即结球期类胡萝卜素合成途径中9个主要酶基因的表达 | 第54-57页 |
| （三） 大白菜和其他植物中类胡萝卜素含量的比较 | 第57-58页 |
| （四） 本研究下一步工作的开展 | 第58-59页 |
| 第六章 主要结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
