| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-20页 |
| ·Neddylation 修饰系统概述 | 第11-15页 |
| ·Neddylation 修饰的级联酶促反应 | 第11-13页 |
| ·Neddylation 修饰中的 E3 和底物 | 第13-15页 |
| ·HECT 类泛素连接酶 Smurf1 的主要功能及其调控机制 | 第15-19页 |
| ·Nedd4 泛素连接酶家族简介 | 第15-16页 |
| ·Smurf1 的主要功能 | 第16-18页 |
| ·Smurf1 连接酶的主要调控制 | 第18-19页 |
| ·本论文的研究目的 | 第19-20页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第20-25页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·免疫印迹相关试剂 | 第20页 |
| ·细胞裂解相关试剂 | 第20页 |
| ·细胞培养相关试剂 | 第20-21页 |
| ·抗体及药品 | 第21页 |
| ·质粒 | 第21页 |
| ·细胞培养 | 第21-22页 |
| ·细胞转染 | 第22页 |
| ·免疫印迹 | 第22页 |
| ·免疫共沉淀 | 第22页 |
| ·报告基因实验 | 第22-23页 |
| ·实时定量 PCR | 第23页 |
| ·GST pull-down 实验 | 第23页 |
| ·体内修饰实验 | 第23页 |
| ·体外修饰实验 | 第23-24页 |
| ·间接免疫荧光 | 第24页 |
| ·流式细胞术 | 第24-25页 |
| 第3章 泛素连接酶 Smurf1 的 Neddylation 修饰及调控功能 | 第25-45页 |
| ·Nedd8 和 Smurf1 相互作用 | 第25-27页 |
| ·Nedd8 调控 Smurf1 的稳定性和泛素连接酶活性 | 第27-29页 |
| ·Nedd8 对 Smurf1 蛋白水平的调控 | 第27页 |
| ·Nedd8 增强 Smurf1 自我泛素化修饰对其底物的影响 | 第27-29页 |
| ·Nedd8 通过 Neddylation 修饰调控 Smurf1 的稳定性和 E3 活性 | 第29-31页 |
| ·Neddylation 修饰调控 Smurf1 的稳定性 | 第29-31页 |
| ·Neddylation 修饰增强 Smurf1 的 E3 活性 | 第31页 |
| ·Smurf1 能够被 Nedd8 进行 Neddylation 修饰 | 第31-35页 |
| ·Smurf1 在细胞内可以被 Neddylation 修饰 | 第31-33页 |
| ·Smurf1 在体外能够自我催化 Neddylation 修饰 | 第33-35页 |
| ·Smurf1 是一个新的 HECT 类 Neddylation 修饰 E325 | 第35-38页 |
| ·Smurf1 与 Neddylation E2 直接相互作用 | 第35-37页 |
| ·Smurf1 存在 Neddylation 修饰酶活中心 | 第37-38页 |
| ·Nedd8 通过 Neddylation 修饰 Smurf2 的稳定性和泛素连接酶活性 | 第38-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| 第4章 泛素连接酶 Smurf1 促进转录因子 KLF2 的泛素化降解 | 第45-53页 |
| ·在肺癌细胞 H1299 中 Smurf1 促进 KLF2 蛋白的泛素-蛋白酶体降解 | 第46-48页 |
| ·在肺癌细胞 H1299 中 Smurf1 和 KLF2 存在相互作用 | 第48页 |
| ·Smurf1 降解 KLF2 而影响其转录活性 | 第48-51页 |
| ·小结 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第5章 ATM磷酸化修饰微管结合蛋白NuSAP参与M期调控 | 第53-62页 |
| ·过表达 NuSAP 造成 G2/M 期阻滞依赖于 ATM 的存在 | 第54页 |
| ·ATM 磷酸化修饰 NuSAP S124 位点造成 G2/M 期阻滞 | 第54-58页 |
| ·ATM 磷酸化修饰 NuSAP 发生于 M 期 | 第58页 |
| ·ATM 在 M 期结合 NuSAP | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 第6章 泛素连接酶 RBBP6 对 BTB 家族成员 ZBTB38 的降解及在细胞周期调控中的功能 | 第62-69页 |
| ·RBBP6 与 ZBTB38 相互作用 | 第63-65页 |
| ·RBBP6 泛素化修饰 ZBTB3855 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 第7章 结论 | 第69-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 附录 A 实时定量 PCR 所需引物 | 第85-86页 |
| 附录 B 质粒构建的相关信息 | 第86-91页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文和研究成果 | 第91页 |
