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基于二维电泳的蛋白质组学分析基础上的蛋白磷酸化研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-11页
第一章 引言第11-34页
   ·课题概述第11页
   ·磷酸化蛋白质组学概述第11-15页
     ·蛋白质组学第11-12页
     ·磷酸化蛋白组学第12-15页
       ·蛋白质的磷酸化第12-14页
       ·磷酸化蛋白质组学第14-15页
   ·磷酸化蛋白质组学研究策略第15-18页
     ·磷酸化蛋白质组学的研究方式第15-17页
       ·从蛋白质到位点的研究顺序第15-16页
       ·从位点到蛋白质的研究顺序第16-17页
     ·磷酸化蛋白质组学研究的基本步骤第17-18页
   ·磷酸化蛋白质组学研究方法第18-33页
     ·磷酸化蛋白的预测第18-19页
     ·磷酸化蛋白(肽段)的制备第19-20页
     ·磷酸化蛋白(肽段)的富集第20-24页
       ·基于免疫沉淀反应的富集第20-21页
       ·基于物理吸附的富集第21-24页
       ·基于化学修饰的富集第24页
     ·磷酸化蛋白质(肽段)的分离第24-25页
     ·磷酸化蛋白(肽段)的鉴定第25-31页
       ·磷酸化抗体杂交法第25-26页
       ·磷酸化染料染色法第26-27页
       ·放射性同位素标记法第27-28页
       ·磷酸酯酶处理法第28-30页
       ·质谱法第30-31页
     ·磷酸化蛋白(肽段)的定量第31-33页
   ·研究方法与论文结构第33-34页
第二章 水稻叶片磷酸化蛋白的提取与检测第34-55页
   ·本章引论第34页
   ·材料与方法第34-41页
     ·材料与试剂第34-35页
     ·水稻叶片蛋白的提取第35-36页
       ·水稻幼苗的准备第35页
       ·TCA/丙酮沉淀法提取水稻叶片全蛋白第35-36页
       ·苯酚抽提法提取水稻叶片全蛋白第36页
     ·IMAC 技术富集水稻叶片磷酸化蛋白第36-38页
       ·IMAC 树脂的准备第36-37页
       ·IMAC 富集磷酸化蛋白的上样第37-38页
       ·IMAC 富集磷酸化蛋白的洗脱第38页
     ·磷酸化蛋白的检测第38-41页
       ·λ磷酸酯酶处理检测磷酸化蛋白第38-39页
       ·牛小肠碱性磷酸酯酶检测磷酸化蛋白第39页
       ·磷酸化蛋白二维电泳分析第39-40页
       ·磷酸化酪氨酸抗体检测磷酸化蛋白第40-41页
   ·结果与分析第41-50页
     ·水稻叶片全蛋白的提取及其磷酸化水平检测第41-44页
       ·水稻叶片全蛋白二维电泳图谱第41页
       ·水稻叶片全蛋白中Rubisco 蛋白的去除第41-44页
       ·TCA/丙酮法提取的水稻叶片全蛋白中磷酸化蛋白含量第44页
     ·IMAC 富集水稻叶片磷酸化蛋白第44-47页
       ·沉淀上样法富集磷酸化蛋白第44-45页
       ·稀释上样法富集磷酸化蛋白第45-47页
     ·磷酸酯酶处理法检测水稻叶片磷酸化蛋白第47-50页
       ·固定化牛小肠碱性磷酸酯酶处理法检测磷酸化蛋白第47-48页
       ·λ磷酸酯酶处理法检测磷酸化蛋白第48-49页
       ·水稻叶片全蛋白中的磷酸化蛋白第49-50页
   ·结果讨论第50-55页
     ·不同提取方法对水稻叶片磷酸化蛋白提取的影响第50-51页
     ·RUBISCO 对水稻叶片磷酸化蛋白提取的影响第51页
     ·IMAC 富集磷酸化蛋白第51-53页
     ·磷酸酯酶处理法鉴定磷酸化蛋白第53页
     ·水稻叶片中的磷酸化蛋白第53-55页
第三章 基于蛋白鉴定结果的磷酸化预测第55-78页
   ·本章引论第55页
   ·原理与方法第55-59页
     ·磷酸化位点的预测第56-58页
     ·蛋白磷酸化水平预测第58-59页
   ·棉花胚珠发育过程差异蛋白质的磷酸化预测第59-75页
     ·棉花胚珠发育过程差异蛋白质磷酸化位点预测第59-72页
     ·棉花胚珠发育过程差异蛋白质磷酸化水平预测第72-75页
   ·结果讨论第75-78页
     ·蛋白质组学数据的进一步挖掘第75-76页
     ·磷酸化位点的预测第76-77页
     ·蛋白磷酸化水平第77-78页
第四章 面向差异蛋白点的磷酸化筛选第78-86页
   ·本章引论第78页
   ·材料与方法第78-80页
     ·材料与试剂第78-79页
     ·基于磷酸酯酶处理的筛选第79-80页
   ·结果与分析第80-83页
     ·磷酸酯酶处理标准样品第80-81页
     ·棉花胚珠发育差异蛋白的筛选第81-83页
   ·结果讨论第83-86页
     ·面向差异蛋白点的磷酸化筛选第83页
     ·磷酸酯酶处理结合电泳检测磷酸化蛋白第83-85页
     ·棉花胚珠发育过程差异蛋白点的磷酸化筛选第85-86页
第五章 结论与展望第86-88页
   ·结论第86-87页
   ·展望第87-88页
参考文献第88-94页
致谢第94-95页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第95页

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