| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-26页 |
| ·猪瘟及猪瘟病毒概述 | 第14-19页 |
| ·猪瘟病毒 | 第14-15页 |
| ·猪瘟的防治 | 第15-16页 |
| ·猪瘟疫苗 | 第16-19页 |
| ·蛋白转导 | 第19-20页 |
| ·Prime-boost 免疫策略 | 第20-21页 |
| ·病毒特异性细胞免疫评价方法 | 第21-25页 |
| ·T 细胞的增殖 | 第22页 |
| ·细胞因子分泌的检测 | 第22-23页 |
| ·CTL 杀伤能力 | 第23-24页 |
| ·MHC 四聚体技术 | 第24-25页 |
| ·本研究的背景与目的 | 第25-26页 |
| 第二章 表达猪瘟病毒 E2 蛋白的重组痘苗病毒的构建及免疫效果初步评价 | 第26-33页 |
| ·材料与方法 | 第27-29页 |
| ·质粒、病毒和细胞 | 第27页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第27页 |
| ·PCR 扩增与基因克隆 | 第27-28页 |
| ·病毒重组、筛选和纯化 | 第28页 |
| ·重组痘苗病毒的PCR 鉴定 | 第28页 |
| ·应用免疫荧光试验检测重组痘苗病毒表达E2 蛋白 | 第28-29页 |
| ·Western blot 检测重组痘苗病毒中 E2 蛋白表达 | 第29页 |
| ·重组痘苗病毒动物免疫 | 第29页 |
| ·抗体的检测 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-32页 |
| ·重组病毒的PCR 鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组痘苗病毒表达 E2 蛋白的鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组痘苗病毒免疫小鼠后可以诱导E2 抗体 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 猪瘟甲病毒复制子载体疫苗在小鼠体内诱导的细胞免疫的评价 | 第33-43页 |
| ·材料与方法 | 第34-37页 |
| ·病毒与细胞 | 第34页 |
| ·主要实验仪器及试剂 | 第34页 |
| ·质粒构建 | 第34-35页 |
| ·小鼠免疫 | 第35页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第35-36页 |
| ·细胞因子ELISA 试验 | 第36页 |
| ·ICS 试验 | 第36页 |
| ·抗体检测 | 第36页 |
| ·数据分析 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·基于CFSE 染色的淋巴细胞增殖试验的优化 | 第37-38页 |
| ·复制子疫苗可以诱导CSFV 特异性的淋巴细胞增殖 | 第38-39页 |
| ·复制子 DNA 疫苗诱导CSFV 特异性的IFN-γ和IL-4 产生 | 第39-40页 |
| ·ICS 可以检测到免疫小鼠的抗原特异性淋巴细胞 | 第40-41页 |
| ·复制子 DNA 疫苗免疫小鼠可以诱导低水平的抗体 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 联合免疫策略加强复制子 DNA 疫苗的免疫效果 | 第43-53页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·病毒与细胞 | 第44页 |
| ·仪器和试剂 | 第44页 |
| ·免疫原 | 第44页 |
| ·免疫 | 第44-45页 |
| ·抗体检测 | 第45页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第45页 |
| ·细胞内细胞因子染色试验 | 第45页 |
| ·数据分析 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-51页 |
| ·用 rAdV-E2 或 rE2 蛋白异源加强可以诱导高水平的抗体反应 | 第45-47页 |
| ·DNA 初免重组腺病毒加强可以诱导更强的淋巴细胞增殖反应 | 第47-49页 |
| ·Prime-boost 免疫诱导更多的 CSFV 特异性T 细胞 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 基于 CFSE 染色的猪淋巴细胞增殖试验方法的建立 | 第53-61页 |
| ·材料与方法 | 第54-55页 |
| ·试验猪 | 第54页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第54页 |
| ·PBMCs 的分离 | 第54页 |
| ·CFSE 标记细胞 | 第54页 |
| ·细胞的刺激培养 | 第54页 |
| ·流式细胞术检测分析不同细胞的增殖 | 第54-55页 |
| ·MTT 增殖试验 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-59页 |
| ·CFSE 染色浓度的确定 | 第55-56页 |
| ·CFSE 染色方法可以同时检测不同淋巴细胞的增殖 | 第56-57页 |
| ·猪淋巴细胞的增殖与 ConA 浓度的关系 | 第57-58页 |
| ·猪淋巴细胞增殖与刺激时间的关系 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简历 | 第70页 |
