| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| ·棉花纤维发育机理的研究进展 | 第13-15页 |
| ·棉花的分类与研究意义 | 第13页 |
| ·棉花纤维的发育及其分子机制研究进展 | 第13-15页 |
| ·棉花纤维的起始 | 第13-14页 |
| ·棉花纤维的伸长 | 第14页 |
| ·棉花纤维次生壁的增厚 | 第14-15页 |
| ·棉花纤维脱水转曲 | 第15页 |
| ·V-ATPase的研究进展 | 第15-21页 |
| ·V-ATPase的基本结构 | 第16-17页 |
| ·V-ATPase对植物生长和发育的调控作用 | 第17-19页 |
| ·V-ATPase C亚基基因的分子研究进展 | 第19-21页 |
| 第二章 引言 | 第21-24页 |
| ·立论依据 | 第21-23页 |
| ·技术路线 | 第23-24页 |
| 第三章 材料与方法 | 第24-37页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·克隆载体与宿主菌 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·主要缓冲液 | 第25-27页 |
| ·方法 | 第27-37页 |
| ·筛选目标 EST序列 | 第27页 |
| ·所选 EST序列的整合 | 第27页 |
| ·整合序列分析 | 第27页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·cDNA序列的3’-RACE扩增 | 第28页 |
| ·扩增产物的电泳、回收、克隆和测序 | 第28-29页 |
| ·植物基因组 DNA的提取 | 第29页 |
| ·Southern杂交分析 | 第29-30页 |
| ·Quantitative real-time PCR分析 | 第30页 |
| ·克隆基因的序列分析 | 第30-31页 |
| ·GhDET3基因序列的扩增 | 第31页 |
| ·感受态细胞的制备及重组菌株的转化 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及重组菌株的转化 | 第31-32页 |
| ·根癌农杆菌菌感受态的制备及重组菌株的转化 | 第32页 |
| ·植物遗传转化 | 第32-33页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第32页 |
| ·农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第32-33页 |
| ·转化植株的鉴定 | 第33页 |
| ·组织化学鉴定 | 第33页 |
| ·GUS基因的PCR鉴定 | 第33页 |
| ·转基因烟草GhDET3基因的表达分析 | 第33页 |
| ·转基因烟草T_1代的表型变异分析 | 第33页 |
| ·转基因烟草T_2代根系发育和下胚轴伸长等性状的变异分析 | 第33-34页 |
| ·转基因烟草对植物激素反应的变异分析 | 第34-35页 |
| ·转基因烟草对NaCl盐胁迫反应的变异分析 | 第35页 |
| ·扫描电镜样品制备和观察 | 第35-36页 |
| ·石蜡切片显微观察 | 第36页 |
| ·棉花胚珠离体培养 | 第36-37页 |
| 第四章 GhDET3基因克隆和表达分析 | 第37-45页 |
| ·获得与拟南芥DET3同源的棉花EST序列 | 第37页 |
| ·目标EST序列的整合及序列分析 | 第37页 |
| ·棉花液泡H~+-ATPase C亚基基因的克隆和测序 | 第37-39页 |
| ·GhDET3蛋白质推导序列的同源性比较 | 第39-40页 |
| ·GhDET3蛋白质序列结构预测 | 第40-41页 |
| ·GhDET3基因的基因组序列 | 第41-42页 |
| ·GhDET3基因在棉花器官和组织中的表达特征 | 第42-43页 |
| ·油菜素类固醇类物质促进GhDET3基因的表达 | 第43-45页 |
| 第五章 烟草中超量表达GhDET3基因 | 第45-60页 |
| ·GhDET3基因正义和反义表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草的的分子验证及表达分析 | 第46-47页 |
| ·T_1代转基因烟草的生长变异 | 第47-49页 |
| ·超量表达GhDET3基因促进转基因烟草营养器官的生长 | 第47-49页 |
| ·超量表达GhDET3基因促进转基因烟草生殖器官发育 | 第49页 |
| ·T_2代转基因烟草幼苗的生长变异 | 第49-52页 |
| ·超量表达 GhDET3基因促进烟草种子萌发 | 第49-50页 |
| ·超量表达 GhDET3基因促进烟草根和下胚轴伸长 | 第50-52页 |
| ·超量表达 GhDET3烟草幼苗对植物激素的反应 | 第52-57页 |
| ·24-EBL对转基因烟草根和下胚轴生长的影响 | 第52-53页 |
| ·GA对转基因烟草根和下胚轴生长的影响 | 第53-54页 |
| ·KT对转基因烟草根和下胚轴生长的影响 | 第54-56页 |
| ·转基因烟草对 ABA反应的变化 | 第56-57页 |
| ·转基因烟草对NaCl反应的变化 | 第57-60页 |
| 第六章 反义抑制GhDET3基因的棉花 | 第60-65页 |
| ·反义抑制 GhDET3的棉花植株的分子验证 | 第60-61页 |
| ·反义抑制 GhDET3的转基因棉花基因的表达分析 | 第61页 |
| ·反义抑制 GhDET3的转基因棉花的性状变异 | 第61-65页 |
| ·反义抑制 GhDET3基因对棉花生长变异 | 第61-64页 |
| ·反义抑制 GhDET3基因对棉花纤维细胞起始的影响 | 第64页 |
| ·反义抑制 GhDET3基因对棉花纤维细胞伸长的影响 | 第64-65页 |
| 第七章 小结与讨论 | 第65-72页 |
| ·小结 | 第65-67页 |
| ·克隆到棉花液泡 H~+-ATPase酶 C亚基基因(GhDET3) | 第65页 |
| ·GhDET3基因的表达特征 | 第65页 |
| ·超量表达 GhDET3转基因烟草的性状变异 | 第65-66页 |
| ·利用转基因烟草分析了BRs与GA和 KT的相互关系 | 第66页 |
| ·利用转基因烟草分析了BRs与胁迫因子之间的关系 | 第66页 |
| ·反义抑制 GhDET3基因棉花生长受到严重抑制作用 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-72页 |
| ·DET3基因与BRs信号转导途径的关系 | 第67-68页 |
| ·GhDET3基因在棉花纤维中的功能 | 第68页 |
| ·GhDET3基因在 BRs所诱导的对植物细胞生长和发育的作用 | 第68-70页 |
| ·超量表达 GhDET3基因烟草与赤霉素之间的相互作用 | 第70页 |
| ·DET3对V-ATPase酶活性的调节作用 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 附录 | 第79-80页 |
| 硕士在读期间研究成果 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
