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丹参毛状根基因诱导表达分析及其有效成分生物合成基因的克隆研究

摘要第1-9页
Abstracts第9-14页
Abbreviations第14-15页
前言第15-17页
第一部分 文献综述第17-37页
 1 丹参研究概况第17-20页
 2 丹参的人工培养及代谢工程研究第20-24页
 3 丹参酮类成分生物合成途径及相关的酶第24-32页
 4 丹参次生代谢相关酶基因的克隆策略第32-34页
 5 实验思路与技术路线第34-37页
第二部分 实验研究第37-141页
 第1章 材料与方法(汇总)第37-52页
   ·材料第37页
   ·实验方法第37-52页
     ·诱导子的制备第37-38页
     ·丹参酮类成分HPLC含量测定第38页
     ·总RNA的提取第38-40页
     ·芯片杂交、扫描及数据分析第40-43页
     ·cDNA全长的RACE技术克隆第43-46页
     ·克隆测序第46-49页
     ·SYB-GREEN荧光定量PCR第49-52页
 第2章 诱导子对悬浮培养丹参毛状根丹参酮类成分积累影响第52-58页
   ·实验材料第52页
   ·实验方法第52页
   ·实验结果第52-56页
   ·小结与讨论第56-58页
 第3章 丹参毛状根RNA的提取、cDNA芯片杂交及分析第58-78页
   ·实验材料第58页
   ·实验方法第58-59页
   ·实验结果第59-76页
     ·总RNA的提取结果第59-60页
     ·芯片杂交结果与数据分析第60-64页
     ·实验数据的筛选第64-65页
     ·测序结果第65页
     ·差异基因的生物信息学分析第65-74页
     ·荧光定量PCR对芯片结果的验证第74-76页
   ·小结与讨论第76-78页
 第4章 丹参有效成分生物合成相关基因的cDNA全长克隆第78-84页
   ·总RNA的提取第78页
   ·丹参有效成分生物合成相关基因cDNA全长的RACE克隆第78-81页
   ·RACE-PCR产物的克隆测序第81-83页
   ·小结与讨论第83-84页
 第5章 丹参有效成分代谢相关酶基因特性分析第84-131页
   ·丹参乙酰辅酶A酰基转移酶(SmAACT)基因的克隆分析第84-93页
   ·丹参4-(5’-焦磷酸胞苷)-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶(SmCMK)基因的克隆分析第93-102页
   ·丹参异戊烯基焦磷酸异构酶(SmIPPI)基因的克隆分析第102-110页
   ·丹参法呢基焦磷酸合酶(SmFPPS)基因的克隆分析第110-119页
   ·丹参内根-贝壳杉烯合酶(SmKS)基因的克隆分析第119-130页
   ·小结与讨论第130-131页
 第6章 丹参酮类成分生物合成相关酶基因表达分析第131-138页
   ·材料的培养及诱导子处理第131页
   ·实验方法第131-132页
   ·实验结果第132-136页
   ·小结与讨论第136-138页
 第7章 丹参酮类成分次生代谢途径的推导第138-141页
第三部分 结论第141-144页
参考文献第144-152页
博士期间文章发表情况第152-154页
致谢第154页

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