根癌农杆菌介导的PG反义基因转化甜瓜的研究
| 摘要 | 第1-3页 |
| Summary | 第3-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-21页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 1 多聚半乳糖醛酸酶（PG）研究进展 | 第9-14页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶的种类和作用方式 | 第9-10页 |
| ·PG 作用方式 | 第9页 |
| ·PG 同工酶 | 第9-10页 |
| ·PG 的分化单位 | 第10页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶基因及其表达调控 | 第10-13页 |
| ·PG 基因 | 第10-12页 |
| ·PG 基因表达调控 | 第12-13页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶基因及其反义基因的应用 | 第13-14页 |
| 2 根癌农杆菌介导技术简介 | 第14-15页 |
| ·转化机理 | 第14-15页 |
| ·农杆菌转化的特点 | 第15页 |
| 3 甜瓜基因工程研究进展 | 第15-19页 |
| ·甜瓜组织培养研究进展 | 第16-17页 |
| ·甜瓜转基因技术的建立 | 第17页 |
| ·甜瓜抗病毒基因工程 | 第17-18页 |
| ·甜瓜耐贮藏基因工程 | 第18-19页 |
| 4 本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 5 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 甜瓜再生体系的建立与优化 | 第21-26页 |
| 1 试验材料、试剂和设备 | 第21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·试验试剂 | 第21页 |
| 2 试验方法 | 第21-22页 |
| ·甜瓜无菌体系的建立 | 第21页 |
| ·不定芽的诱导 | 第21页 |
| ·诱导生根获得完整再生植株 | 第21-22页 |
| ·试管苗的茎段快繁 | 第22页 |
| 3 试验结果与与分析 | 第22-24页 |
| ·培养基盐浓度对甜瓜发芽率及畸形苗的影响 | 第22页 |
| ·激素对不定芽诱导的影响 | 第22-23页 |
| ·不定芽诱导的形态学观察 | 第23-24页 |
| ·试管苗的茎段繁殖 | 第24页 |
| 4 讨论 | 第24-26页 |
| ·培养基盐浓度对甜瓜畸形苗的影响 | 第24页 |
| ·激素对不定芽诱导的影响 | 第24-25页 |
| ·玻璃化 | 第25-26页 |
| 第三章 根癌农杆菌介导甜瓜转化反义PG 基因 | 第26-36页 |
| 1 试验材料、试剂和设备 | 第26-27页 |
| ·菌种和质粒 | 第26页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·主要试剂和药品 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| 2 试验方法 | 第27-29页 |
| ·质粒的验证 | 第27-28页 |
| ·质粒的提取 | 第27页 |
| ·质粒的 PCR 检测 | 第27-28页 |
| ·选择压力的筛选 | 第28页 |
| ·根癌农杆菌介导PG 反义基因转化甜瓜 | 第28-29页 |
| ·菌种活化及菌液的准备 | 第28页 |
| ·外植体的获得 | 第28-29页 |
| ·农杆菌对外植体的侵染和共培养 | 第29页 |
| ·不定芽选择培养 | 第29页 |
| 3 试验结果与分析 | 第29-33页 |
| ·质粒验证 | 第29-30页 |
| ·抗生素浓度的筛选 | 第30-31页 |
| ·根癌农杆菌介导的反义PG 基因转化甜瓜 | 第31-33页 |
| ·添加乙酰丁香酮对甜瓜不定芽分化率的影响 | 第31页 |
| ·不同载体对甜瓜转化率的影响 | 第31-32页 |
| ·甜瓜Kan 抗性植株的培养 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-36页 |
| ·转化植株的选择 | 第33页 |
| ·有关假转化体 | 第33-34页 |
| ·乙酰丁香酮对甜瓜不定芽分化率的影响 | 第34页 |
| ·不同植物表达载体对甜瓜转化率的影响 | 第34-36页 |
| 第四章 转PG 反义基因甜瓜植株检测 | 第36-42页 |
| 1 试验材料、试剂和设备 | 第36页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·试验试剂 | 第36页 |
| 2 试验方法 | 第36-38页 |
| ·植株抗 Kan 检测 | 第36页 |
| ·GUS 酶活性检测 | 第36页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第36-38页 |
| ·转化植株遗传性状观察分析 | 第38页 |
| 3 实验结果与分析 | 第38-40页 |
| ·转化株的Kan 抗性检测 | 第38页 |
| ·GUS 基因在转基因甜瓜中的表达 | 第38-39页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第39-40页 |
| ·转反义PG 基因甜瓜植株的遗传性状分析 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| ·有关选择标记基因 | 第40-41页 |
| ·有关报告基因 | 第41-42页 |
| 第五章 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 图版 | 第50-52页 |
| 个人简介 | 第52-53页 |
| 导师简介 | 第53-54页 |
