巴西橡胶树半胱氨酸蛋白酶基因HbCP1的克隆与表达分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-27页 |
| ·橡胶树形态及生理学研究 | 第9-11页 |
| ·橡胶树的分子生物学研究 | 第11-16页 |
| ·已分离的基因 | 第11-15页 |
| ·橡胶树基因工程的研究进展 | 第15-16页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶研究进展 | 第16-25页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶概述 | 第16-18页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶及其编码基因 | 第18-21页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶的功能 | 第21-25页 |
| ·小结 | 第25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| ·本研究的技术路线 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-48页 |
| ·材料与试剂 | 第27页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·质粒及菌种 | 第27页 |
| ·生化试剂 | 第27页 |
| ·方法与步骤 | 第27-48页 |
| ·RNA 的提取 | 第27-30页 |
| ·cDNA 的合成 | 第30页 |
| ·HbCP1 保守区域的扩增 | 第30-34页 |
| ·3'RACE 扩增HbCP1 的3'端 | 第34-35页 |
| ·5'RACE 扩增HbCP1 的5'端 | 第35-38页 |
| ·HbCP1 全长cDNA 的PCR 扩增 | 第38-39页 |
| ·HbCP1 基因的Southern 杂交 | 第39-43页 |
| ·HbCP1 RT-PCR 表达分析 | 第43-44页 |
| ·HbCP1 基因的原核表达 | 第44-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-68页 |
| ·RNA 的提取 | 第48页 |
| ·HBCP1 基因的克隆 | 第48-53页 |
| ·HbCP1 基因保守区的扩增 | 第48-50页 |
| ·3'RACE 扩增HbCP1 的3'端 | 第50页 |
| ·5'RACE 扩增HbCP1 的5'端 | 第50页 |
| ·HbCP1 全长的克隆 | 第50-53页 |
| ·HBCP1 的生物信息学分析 | 第53-59页 |
| ·HbCP1 蛋白质的特性分析 | 第53页 |
| ·信号肽、疏水性及跨膜区预测 | 第53-56页 |
| ·HbCP1 同源性和系统发育分析 | 第56-58页 |
| ·HbCP1 蛋白的亚细胞定位功能分类 | 第58-59页 |
| ·SOUTHERN 杂交 | 第59-61页 |
| ·探针的制备 | 第59页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第59-61页 |
| ·HBCP1 的RT-PCR 分析 | 第61-64页 |
| ·指数增长期的确定 | 第61-62页 |
| ·激素刺激对胶乳HbCP1 表达的影响 | 第62页 |
| ·伤害对HbCP1 表达的影响 | 第62页 |
| ·HbCP1 在不同组织的表达分析 | 第62-63页 |
| ·HbCP1 在健康树和死皮树中表达分析 | 第63-64页 |
| ·HBCP1 的原核表达 | 第64-68页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第64-65页 |
| ·基因表达产物分析 | 第65-68页 |
| 4 讨论 | 第68-74页 |
| ·关于采样的方法 | 第68页 |
| ·关于HBCP1 的功能 | 第68-70页 |
| ·关于HBCP1 基因的原核表达 | 第70-71页 |
| ·关于基因表达水平的检测 | 第71-74页 |
| 5 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 附录一：有关试剂的配制 | 第82-83页 |
| 附录二 缩写词 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
