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刺梨(Rosa roxburghii Tratt)抗白粉病的分子机制

缩略词表第1-9页
摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
第一章 文献综述第13-32页
   ·白粉病及其危害第13-14页
   ·病原物致病的分子基础第14-15页
   ·植物抗病机制研究第15-25页
     ·植物抗病性第15-17页
     ·抗病的分子机制第17-25页
       ·抗病基因(R gene)第18-23页
       ·抗病基因在染色体上的排列方式及其起源进化第23-24页
       ·防卫相关基因第24-25页
     ·植物系统获得性抗性及信号分子第25页
   ·植物抗病相关基因分离策略第25-30页
     ·转座子标签技术第26页
     ·图位克隆技术第26页
     ·同源序列法第26-28页
     ·转录水平的差异表达基因克隆方法第28-30页
       ·差别筛选第28页
       ·差异显示第28页
       ·代表性差异分析第28-29页
       ·cDNA-AFLP技术第29页
       ·SSH技术第29-30页
     ·从蛋白质入手第30页
   ·刺梨研究进展第30-32页
第二章 刺梨白粉菌及其与寄主互作、抗性遗传第32-45页
   ·引言第32页
   ·材料方法第32-36页
     ·试验材料第32页
     ·病害发生规律的观察第32页
     ·刺梨白粉病菌分离第32页
     ·白粉病菌的离体培养第32-33页
     ·白粉病菌孢子及相关的形态学观察第33页
     ·观察菌丝与细胞表面的互作第33-34页
     ·双氧水H_2O_2的检测和含量测定第34页
       ·植物 H_2O_2的检测第34页
       ·H_2O_2含量测定第34页
     ·半薄切片第34页
     ·刺梨抗病相关酶活性测定第34-35页
     ·刺梨抗白粉病指数鉴定第35-36页
   ·结果与分析第36-44页
     ·刺梨白粉菌形态结构和病原发生规律第36-38页
     ·刺梨与白粉菌的互作及寄主生化反应第38-41页
     ·刺梨不同基因型的抗性表现、F_1代群体的创造及抗性遗传分析第41-44页
   ·讨论第44-45页
     ·刺梨白粉病及其白粉菌分类第44页
     ·本章研究有助于理解刺梨抗白粉病机制第44-45页
第三章 抗病基因类似物(RGA)的克隆、分子进化分析及其抗白粉病分子标记的挖掘第45-82页
   ·引言第45-46页
   ·材料和方法第46-53页
     ·实验材料第46页
     ·基因组DNA的提取第46-47页
     ·简并引物第47-48页
     ·PCR策略第48-49页
     ·RGA基因侧翼序列的分离第49-50页
     ·特异产物的回收、连接、转化第50页
     ·序列分析第50-51页
     ·基于RGA基因的STS,CAPS,和RFLP标记第51-52页
     ·作图和连锁分析第52-53页
     ·反向Northern杂交第53页
   ·结果与分析第53-75页
     ·刺梨TIR和非TIR类型RGA基因的克隆第53-58页
     ·刺梨RGA基因的系统进化分析第58-60页
     ·基于刺梨RGA的STS,CAPS和RFLP标记第60-63页
     ·刺梨遗传作图分析第63-66页
     ·RGA基因侧翼序列分析第66-68页
     ·蔷薇科RGA基因的比较分析第68-74页
     ·刺梨RGA基因表达分析第74-75页
   ·讨论第75-82页
     ·刺梨基因组中RGA的克隆、分析及利用第75-79页
     ·蔷薇科果树RGA基因的分析第79-81页
     ·本章研究的启示第81-82页
第四章 病程相关基因(PR-GENE)、PTO-LIKE激酶基因的克隆、进化分析及其分子标记的开发第82-97页
   ·前言第82页
   ·材料和方法第82-84页
     ·实验材料第82页
     ·PR基因克隆第82页
     ·PTO-like丝氨酸-苏氨酸激酶的克隆第82-83页
     ·PCR产物的回收、连接、转化第83页
     ·序列分析第83页
     ·SNAP标记的开发第83-84页
     ·作图和连锁分析第84页
     ·反向Northern杂交第84页
   ·结果与分析第84-94页
     ·PTO-like激酶基因的克隆第84-87页
     ·PR2和PR5基因的克隆第87-89页
     ·序列分析第89-91页
     ·SNAP标记的开发第91-93页
     ·遗传作图和连锁分析第93页
     ·PR2、PR5基因的表达第93-94页
   ·讨论第94-97页
     ·刺梨PR蛋白的克隆及其基因家族可能的功能第94-95页
     ·刺梨基因组SNP频率及其SNAP标记特点第95-96页
     ·本章研究的启示第96-97页
第五章 刺梨响应白粉菌的转录水平研究第97-130页
   ·引言第97页
   ·材料和方法第97-104页
     ·实验材料第97页
     ·RNA提取方法第97-98页
     ·SSH文库构建第98-99页
     ·反向Northern筛选第99页
     ·序列分析第99-100页
     ·RACE扩增cDNA全长第100-101页
     ·Real-time PCR第101-102页
     ·几个基因的DNA区扩增第102页
     ·H_2O_2和SA含量测定第102页
     ·光呼吸相关酶活性测定第102-104页
   ·结果与分析第104-124页
     ·刺梨RNA大量提取方法第104-105页
     ·SSH cDNA文库构建第105-106页
     ·反向Northern筛选第106页
     ·序列EST分析,功能分类第106-110页
     ·光呼吸基因的表达分析与验证第110-112页
     ·全长克隆,RACE,结构预测第112-117页
     ·光呼吸基因遗传作图及其基因DNA序列比较分析第117-122页
     ·光呼吸酶分析第122-123页
     ·SA和H_2O_2的变化第123-124页
   ·讨论第124-130页
     ·研究过程中的一些技术性问题第124-125页
     ·刺梨抗白粉病新机制——光呼吸作用第125-129页
     ·刺梨抗白粉病的模型第129-130页
参考文献第130-152页
附录A: 过氧化物酶、葡聚糖酶、几丁质酶活性测定第152-154页
附录B: PCR产物的TA克隆第154-155页
附录C: 刺梨及蔷薇科RGA基因第155-162页
附录D: 本研究所涉及的基因在F_1各单株的情况第162-166页
附录E: 分离刺梨RGA基因侧翼序列时所使用的引物第166-167页
附录F: RGA基因在蔷薇科九种植物的计带结果第167-168页
附录G: SSH文库构建详细步骤第168-173页
附录H: 博士期间发表的论文第173-175页
致谢第175页

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