| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-27页 |
| ·昆虫嗅觉感受机制 | 第12-17页 |
| ·昆虫嗅觉识别 | 第12-13页 |
| ·昆虫嗅觉受体 | 第13-15页 |
| ·OR83b 及类似受体蛋白 | 第15-17页 |
| ·内含子简介 | 第17-18页 |
| ·RNA 干扰生物学原理与应用 | 第18-26页 |
| ·RNA 干扰研究历程 | 第18-19页 |
| ·基因沉默的作用机制 | 第19-21页 |
| ·昆虫RNA 干扰技术 | 第21-24页 |
| ·RNAi 在昆虫领域的应用 | 第24-26页 |
| ·研究内容和意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-41页 |
| ·供试昆虫及饲养条件 | 第27页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·昆虫核酸提取 | 第28-29页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·昆虫总RNA 的提取 | 第29页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第29-30页 |
| ·昆虫Sexi\Orco 的基因结构鉴定 | 第30-33页 |
| ·引物设计 | 第30页 |
| ·PCR 扩增 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物纯化、克隆、测序和序列分析 | 第31-33页 |
| ·Sexi\Orco 基因的组织表达分析 | 第33-34页 |
| ·引物设计 | 第33-34页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第34页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因的定量分析 | 第34-35页 |
| ·引物设计 | 第34-35页 |
| ·实时荧光定量PCR 反应 | 第35页 |
| ·实时荧光定量PCR 反应效率的确定 | 第35页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因mRNA 表达量比较 | 第35页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因RNA 干扰 | 第35-41页 |
| ·总RNA 提取 | 第35页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第35-36页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·PCR 扩增 | 第37页 |
| ·dsRNA 的体外转录合成 | 第37-38页 |
| ·试虫注射 | 第38页 |
| ·注射后试虫存活率调查 | 第38页 |
| ·注射后Sexi\Orco 基因表达的RT-PCR 分析 | 第38-39页 |
| ·注射后Sexi\Orco 基因表达的荧光定量PCR 分析 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-53页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因结构 | 第41页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因系统发育分析 | 第41-43页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因在不同发育时期的表达情况 | 第43-44页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因的组织定位分析 | 第44-45页 |
| ·PCR 产物熔解曲线及荧光定量PCR 扩增效率一致性分析 | 第45-46页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因相对表达量比较 | 第46-49页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因不同发育时期的表达量比较 | 第46-47页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因不同组织的表达量比较 | 第47-49页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因的RNA 沉默分析 | 第49-53页 |
| ·引物设计及PCR 产物鉴定 | 第49页 |
| ·体腔注射法将dsRNA 导入试虫体内死亡率分析 | 第49-50页 |
| ·RNA 干扰后Sexi\Orco 基因的RT-PCR 检测 | 第50页 |
| ·RNA 干扰后Sexi\Orco 基因实时荧光定量PCR 检测 | 第50-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因结构 | 第53页 |
| ·甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因的组织特异性和时空表达 | 第53-54页 |
| ·甜菜夜蛾不同发育期Sexi\Orco 基因表达情况 | 第53-54页 |
| ·甜菜夜蛾成虫Sexi\Orco 基因表达谱及表达量 | 第54页 |
| ·小结 | 第54页 |
| ·甜菜夜蛾RNAi | 第54-57页 |
| ·甜菜夜蛾RNAi 方法的选择 | 第54-55页 |
| ·甜菜夜蛾RNAi 的特异性 | 第55页 |
| ·影响RNAi 的因素 | 第55页 |
| ·小结 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 甜菜夜蛾Sexi\Orco 基因及其氨基酸序列 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间学术论文的发表情况 | 第76-77页 |
