| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1 rolC基因及其研究现状 | 第13-15页 |
| ·Ri质粒与rol基因 | 第13-14页 |
| ·rolC基因在植物基因工程育种中的应用 | 第14-15页 |
| ·rolC基因在烟草上的应用 | 第14页 |
| ·rolC基因在观赏植物上的应用 | 第14页 |
| ·rolC基因在蔬菜上的应用 | 第14页 |
| ·rolC基因在林木上的应用 | 第14-15页 |
| ·rolC基因在果树上的应用 | 第15页 |
| ·rolC基因在药用植物上的应用 | 第15页 |
| 2 葡萄转基因研究进展 | 第15-19页 |
| ·葡萄再生体系的研究进展 | 第15-16页 |
| ·器官发生途径 | 第15-16页 |
| ·体细胞胚(体胚)发生途径 | 第16页 |
| ·葡萄遗传转化常用的方法 | 第16-19页 |
| ·农杆菌介导法 | 第17-18页 |
| ·农杆菌介导葡萄砧木品种的遗传转化 | 第17-18页 |
| ·农杆菌介导葡萄栽培品种的遗传转化 | 第18页 |
| ·基因枪法 | 第18-19页 |
| 3 影响农杆菌介导的葡萄遗传转化效率的因素 | 第19-20页 |
| ·农杆菌的侵染能力及载体的影响 | 第19页 |
| ·农杆菌vir基因的活化 | 第19-20页 |
| ·再生系统 | 第20页 |
| ·共培养后受体材料的坏死 | 第20页 |
| 4 超声波辅助农杆菌介导法在植物遗传转化中的应用 | 第20-22页 |
| ·超声波的作用原理 | 第20-21页 |
| ·SAAT法在植物遗传转化中的应用 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-28页 |
| 第二章 离体条件下葡萄砧木‘5BB’植株再生 | 第28-36页 |
| 1 材料与方法 | 第28-30页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·外植体来源及接种方法 | 第28-29页 |
| ·培养方法 | 第29页 |
| ·‘5BB’不同外植体类型不定芽再生 | 第29页 |
| ·‘5BB’叶柄不定芽再生 | 第29页 |
| ·不同基本培养基对‘5BB’叶柄不定芽再生的影响 | 第29页 |
| ·不同节位对‘5BB’叶柄不定芽再生的影响 | 第29页 |
| ·植物生长调节剂种类及浓度组合对‘5BB’叶柄不定芽再生的影响 | 第29页 |
| ·试管苗生根诱导及驯化移栽 | 第29页 |
| ·结果调查与统计方法 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-33页 |
| ·‘5BB’不同外植体类型不定芽再生 | 第30页 |
| ·‘5BB’叶柄不定芽再生 | 第30-33页 |
| ·不同基本培养基对‘5BB’叶柄不定芽再生的影响 | 第30-31页 |
| ·不同节位对‘5BB’叶柄不定芽再生的影响 | 第31页 |
| ·植物生长调节剂种类及其浓度组合对‘5BB’叶柄不定芽再生的影响 | 第31-33页 |
| ·BA/IBA浓度组合对‘5BB’叶柄不定芽再生的影响 | 第31-33页 |
| ·TDZ/IBA浓度组合对‘5BB’叶柄不定芽再生的影响 | 第33页 |
| ·不定芽生根诱导及驯化移栽 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-36页 |
| 第三章 葡萄砧木‘5BB’农杆菌介导遗传转化体系的优化 | 第36-48页 |
| 1 材料和方法 | 第36-42页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·工程菌株和载体质粒 | 第36-37页 |
| ·工程菌株 | 第36-37页 |
| ·目的基因和载体质粒 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37-38页 |
| ·农杆菌培养基(液) | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌培养基(液) | 第38页 |
| ·组培苗培养基 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·质粒及农杆菌的准备 | 第38-41页 |
| ·质粒的准备 | 第39-40页 |
| ·质粒向根癌农杆菌中的转化 | 第40页 |
| ·农杆菌的培养和活化 | 第40-41页 |
| ·农杆菌对外植体的侵染和共培养 | 第41页 |
| ·农杆菌侵染时间的确定 | 第41页 |
| ·共培养时间的确定 | 第41页 |
| ·预培养天数的确定 | 第41页 |
| ·卡那霉素选择压的确定 | 第41页 |
| ·头孢霉素浓度的确定 | 第41页 |
| ·计算公式 | 第41-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-45页 |
| ·农杆菌侵染时间的确定 | 第42-43页 |
| ·共培养时间的确定 | 第43页 |
| ·预培养天数的确定 | 第43-45页 |
| ·卡那霉素选择压的确定 | 第45页 |
| ·头孢霉素浓度的确定 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-48页 |
| 第四章 葡萄砧木‘5BB’超声波辅助农杆菌介导的遗传转化体系的建立 | 第48-54页 |
| 1 材料和方法 | 第48-50页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·植物材料 | 第48页 |
| ·工程菌株和载体质粒 | 第48-49页 |
| ·工程菌株 | 第48-49页 |
| ·目的基因和载体质粒 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·仪器 | 第49页 |
| ·方法 | 第49页 |
| ·外植体类型对‘5BB’再生率的影响 | 第49页 |
| ·超声波处理时间对‘5BB’茎段再生率的影响 | 第49页 |
| ·超声波处理功率对‘5BB’茎段再生率的影响 | 第49页 |
| ·AS浓度对‘5BB’叶片GUS瞬时表达率的影响 | 第49页 |
| ·计算公式 | 第49-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-52页 |
| ·外植体类型对‘5BB’再生率的影响 | 第50页 |
| ·超声波处理时间对‘5BB’茎段再生率的影响 | 第50-51页 |
| ·超声波处理功率对‘5BB’茎段再生率的影响 | 第51-52页 |
| ·AS浓度对‘5BB’叶片瞬时表达率的影响 | 第52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-54页 |
| 第五章 转rolC基因的葡萄砧木‘5BB’转基因植株的获得与检测 | 第54-59页 |
| 1 材料与方法 | 第54-56页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·菌株、质粒和目的基因 | 第54页 |
| ·GUS染色液的配方 | 第54-55页 |
| ·方法 | 第55-56页 |
| ·基因转化方法 | 第55页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第55页 |
| ·植物材料DNA的提取 | 第55页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第55页 |
| ·PCR检测 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-58页 |
| ·转基因植株的获得 | 第56页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第56-57页 |
| ·PCR扩增 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 全文结论 | 第59-60页 |
| 图版 | 第60-61页 |
| 硕士在读期间发表的文章 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
