| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-21页 |
| ·CT－1基因的分布及结构 | 第13-14页 |
| ·CT－1基因的表达 | 第14页 |
| ·CT－1的受体及信号传导途径 | 第14页 |
| ·CT-1与心血管疾病的关系 | 第14-19页 |
| ·CT-1对心脏及心肌细胞的保护作用 | 第15页 |
| ·CT-1的诱导促心肌肥大作用 | 第15-16页 |
| ·CT-1对心肌成纤维细胞胶原蛋白合成作用 | 第16页 |
| ·CT－1与心力衰竭 | 第16-17页 |
| ·CT－1与缺血性心脏病 | 第17-18页 |
| ·CT－1对血流动力学的作用 | 第18页 |
| ·CT－1与其他心血管疾病 | 第18-19页 |
| ·CT-1对肝脏及肝实质细胞的保护作用 | 第19页 |
| ·CT-1对神经系统的影响 | 第19-20页 |
| ·本文立题背景及研究意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-34页 |
| ·材料 | 第21-25页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·菌种及质粒 | 第21页 |
| ·主要试剂及酶类 | 第21-22页 |
| ·常规培养基、缓冲液及储备液 | 第22-24页 |
| ·细胞活性实验及动物实验试剂 | 第24页 |
| ·实验动物及细胞株 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-34页 |
| ·目的基因的克隆及重组质粒的构建 | 第25-28页 |
| ·引物设计 | 第25页 |
| ·PCR反应体系 | 第25页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第25-26页 |
| ·PCR产物及PQE-40 BamHI和HindIII的双酶切 | 第26页 |
| ·目的基因及载体酶切产物的电泳分离及纯化 | 第26页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第26-27页 |
| ·制备感受态细菌及连接产物的转化 | 第27页 |
| ·质粒提取 | 第27-28页 |
| ·重组质粒(PQE-rhCT-1)的酶切鉴定 | 第28页 |
| ·重组质粒的表达 | 第28-29页 |
| ·不同表达时间对蛋白表达量的影响 | 第29页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第29-30页 |
| ·包涵体的变性及目的蛋白的纯化 | 第30页 |
| ·复性缓冲液的选折 | 第30-31页 |
| ·不同离子强度对复性的影响 | 第30页 |
| ·不同pH对复性的影响 | 第30页 |
| ·不同脲的终浓度对复性的影响 | 第30页 |
| ·不同添加剂对复性的影响 | 第30页 |
| ·不同蛋白终浓度对复性的影响 | 第30-31页 |
| ·变性蛋白的复性 | 第31页 |
| ·等电点测定 | 第31页 |
| ·rhCT-1促进受损大鼠心肌细胞存活的生物活性鉴定 | 第31-32页 |
| ·rhCT-1预防组、治疗组对体外培养受损大鼠心肌细胞的琥珀酸脱氢酶及乳酸脱氢酶活性影响的比较 | 第32页 |
| ·rhCT-1对异丙肾上腺素造成大鼠心肌缺血损伤的保护作用 | 第32页 |
| ·rhCT-1促进Bel-7402肝癌细胞琥珀酸脱氢酶活性的生物活性鉴定 | 第32-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-51页 |
| ·表达载体PQE-huCT-1的构建 | 第34-37页 |
| ·PQE-huCT-1在M_(15)菌中的表达及可溶性分析 | 第37页 |
| ·不同表达时间对目的蛋白表达量的影响 | 第37-38页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第38-39页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·不同因素对蛋白复性的影响 | 第40-43页 |
| ·等电点的测定 | 第43页 |
| ·rhCT-1促进受损大鼠心肌细胞存活生物活性的鉴定 | 第43-45页 |
| ·rhCT-1预防组、治疗组对体外培养受损大鼠心肌细胞的琥珀酸脱氢酶及乳酸脱氢酶活性影响的比较 | 第45-47页 |
| ·rhCT-1对异丙肾上腺素损伤大鼠心肌细胞的修复作用 | 第47-50页 |
| ·rhCT-1促进Bel-7402细胞琥珀酸脱氢酶活性作用 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-56页 |
| ·质粒PQE-40和宿主M_(15)[pREP4]介绍 | 第51页 |
| ·融合蛋白基因的构建 | 第51-52页 |
| ·融合蛋白基因的表达 | 第52页 |
| ·融合蛋白的纯化及复性 | 第52-53页 |
| ·rhCT-1促进受损心肌细胞存活的生物学活性 | 第53-54页 |
| ·rhCT-1对异丙肾上腺素损伤大鼠心肌细胞的修复 | 第54-55页 |
| ·rhCT-1刺激Bel-7402肝癌细胞的增殖 | 第55-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 附图 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 参与的工作 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
