体细胞克隆牛TTF-1的表达及甲基化研究
| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-23页 |
| ·体细胞克隆及其存在问题 | 第12页 |
| ·DNA 甲基化与基因表达调控 | 第12-14页 |
| ·TTF-1 研究进展 | 第14-20页 |
| ·TTF-1 基因和蛋白质的结构 | 第15-17页 |
| ·TTF-1 基因的表达谱 | 第17-18页 |
| ·TTF-1 基因在肺中的功能 | 第18页 |
| ·TTF-1 蛋白质的修饰及与其他因子的相互作用 | 第18-19页 |
| ·TTF-1 基因的信号转导 | 第19-20页 |
| ·荧光定量PCR 的基本原理 | 第20-23页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第20-21页 |
| ·几个概念 | 第21页 |
| ·荧光化学 | 第21-22页 |
| ·光谱技术和计算机科学的结合 | 第22-23页 |
| 2 本研究的目的意义 | 第23-24页 |
| 3 材料和方法 | 第24-34页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·主要仪器、设备 | 第24-25页 |
| ·主要试剂及来源 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-34页 |
| ·培养基、缓冲液与常用试剂的配制 | 第25-27页 |
| ·总RNA 的提取 | 第27页 |
| ·DNA 的亚硫酸氢盐处理 | 第27-28页 |
| ·总RNA 的纯化和qRT-PCR | 第28-29页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·网站和软件 | 第30页 |
| ·牛TTF-1 的克隆 | 第30-31页 |
| ·扩增产物的纯化、克隆、鉴定和测序 | 第31-32页 |
| ·荧光定量PCR | 第32-33页 |
| ·甲基化分析 | 第33-34页 |
| 4 结果与分析 | 第34-44页 |
| ·总RNA 的纯化与检测 | 第34页 |
| ·牛TTF-1 基因的克隆与分析 | 第34-37页 |
| ·牛TTF-1 基因的克隆 | 第34-35页 |
| ·序列的拼接与分析 | 第35-37页 |
| ·定量PCR 结果 | 第37-39页 |
| ·牛肺总RNA 反转录结果 | 第37-38页 |
| ·数据分析结果 | 第38-39页 |
| ·甲基化结果 | 第39-41页 |
| ·亚硫酸氢盐处理基因组DNA 后的PCR 结果 | 第39-40页 |
| ·甲基化检测结果的分析 | 第40-41页 |
| ·TTF-1 基因启动子区分析 | 第41-44页 |
| 5 讨论 | 第44-48页 |
| ·TTF-1 的鉴定和序列分析 | 第44页 |
| ·甲基化分析位点的选择 | 第44-45页 |
| ·定量PCR 和甲基化结果分析 | 第45-46页 |
| ·定量PCR 数据处理方法 | 第46-48页 |
| 6 小结 | 第48-50页 |
| ·分离鉴定了牛TTF-1 基因 | 第48页 |
| ·牛肺中TTF-1 的表达量结果 | 第48页 |
| ·牛TTF-1 启动子区甲基化结果 | 第48-49页 |
| ·牛TTF-1 启动子区在各样品中的差异 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
