| 第一章 绪论 | 第1-35页 |
| ·气味结合蛋白研究进展 | 第14-15页 |
| ·昆虫触角气味受体的研究进展 | 第15-17页 |
| ·感觉神经元膜蛋白(SNMP)的研究进展 | 第17-20页 |
| ·SNMP的生化特性： | 第17-18页 |
| ·SNMP的分布及时空表达情况： | 第18-19页 |
| ·SNMP的生理作用： | 第19-20页 |
| ·昆虫触角G蛋白的研究进展 | 第20-26页 |
| ·G蛋白的基本结构和种类 | 第20-22页 |
| ·G蛋白的调控循环 | 第22-23页 |
| ·G蛋白α亚基 | 第23-26页 |
| ·昆虫G蛋白信号途径的研究进展 | 第26页 |
| ·酵母双杂交简介 | 第26-33页 |
| ·酵母双杂交系统的基本原理 | 第26-27页 |
| ·酵母双杂交系统的特点及优点 | 第27-28页 |
| ·酵母双杂交系统的应用 | 第28-29页 |
| ·酵母双杂交系统的缺陷 | 第29-32页 |
| ·酵母双杂交系统的拓展 | 第32-33页 |
| ·研究的背景和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 棉铃虫GQα亚基及SNMP的基因克隆与组织分布 | 第35-78页 |
| ·材料与方法 | 第35-51页 |
| ·供试昆虫 | 第35-36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36-37页 |
| ·仪器设备 | 第37-38页 |
| ·试验技术路线 | 第38-39页 |
| ·总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·cDNA的合成 | 第40页 |
| ·引物的设计 | 第40-42页 |
| ·RT-PCR反应 | 第42页 |
| ·Gq 5'-RACE反应 | 第42-44页 |
| ·Gq 3'-RACE反应 | 第44-45页 |
| ·PCR和RACE产物的回收纯化 | 第45-46页 |
| ·连接反应 | 第46页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第46页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第46页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第46-47页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第47-48页 |
| ·序列测定 | 第48页 |
| ·棉铃虫G蛋白α亚基及SNMP的时空表达 | 第48-49页 |
| ·实验室不同品系棉铃虫中肠G蛋白α亚基基因变异情况 | 第49-51页 |
| ·G蛋白α亚基基因内含子情况 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-74页 |
| ·G蛋白α亚基基因克隆及序列分析 | 第51-62页 |
| ·α亚基在不同组织及各虫期的转录水平 | 第62-65页 |
| ·SNMP的基因克隆及序列分析 | 第65-69页 |
| ·棉铃虫SNMP在不同组织及各虫期的转录水平 | 第69-71页 |
| ·实验室不同品系棉铃虫中肠G蛋白α亚基蛋白变异情况 | 第71-73页 |
| ·G蛋白α亚基基因内含子情况 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-78页 |
| ·对克隆的棉铃虫Gqα和SNMP的基因及其时空表达情况的分析 | 第74-76页 |
| ·关于半定量RT-PCR方法的探讨 | 第76-77页 |
| ·关于RACE技术的探讨 | 第77-78页 |
| 第三章 棉铃虫Gα及SNMP的原核表达及纯化 | 第78-90页 |
| ·材料与方法 | 第78-83页 |
| ·菌种和质粒 | 第78页 |
| ·主要化学试剂 | 第78页 |
| ·主要仪器设备 | 第78页 |
| ·储存液和主要试剂配方 | 第78-80页 |
| ·引物设计 | 第80页 |
| ·融合表达载体的构建 | 第80-82页 |
| ·连接产物的转化、鉴定 | 第82页 |
| ·细胞培养和诱导表达 | 第82页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第82-83页 |
| ·Gqα基因的融合表达 | 第83页 |
| ·包涵体的破碎和重折叠 | 第83页 |
| ·结果与分析 | 第83-88页 |
| ·G蛋白α亚基和SNMP融合表达载体的构建 | 第83-85页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第85-88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| 第四章 酵母双杂交筛选与GQα及SNMP作用的蛋白 | 第90-119页 |
| ·材料与方法 | 第90-107页 |
| ·材料 | 第90页 |
| ·试剂 | 第90-96页 |
| ·技术路线 | 第96-97页 |
| ·分别用棉铃虫Gqα和SNMP构建诱饵蛋白 | 第97-101页 |
| ·构建cDNA文库 | 第101-103页 |
| ·用构建好的诱饵蛋白筛选cDNA文库 | 第103-107页 |
| ·酵母共转化法研究克隆的Gα和SNMP之间的互作 | 第107页 |
| ·结果与分析 | 第107-116页 |
| ·诱饵蛋白的构建 | 第107-111页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第111-112页 |
| ·用棉铃虫G蛋白α亚基做诱饵蛋白筛选cDNA文库的结果 | 第112-115页 |
| ·酵母双杂交研究克隆的G蛋白α亚基与SNMP之间的互作关系 | 第115-116页 |
| ·讨论 | 第116-119页 |
| ·对酵母双杂交实验结果的讨论 | 第116-117页 |
| ·酵母双杂交试验常见问题 | 第117-118页 |
| ·下一步工作计划 | 第118-119页 |
| 第五章 结论 | 第119-122页 |
| 参考文献 | 第122-130页 |
| 作者简历 | 第130-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
