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小麦不同外植体农杆菌转化体系研究

第一章 绪论第1-25页
   ·小麦遗传转化的主要方法第13-16页
     ·基因枪法介导的小麦转化第13-14页
     ·农杆菌介导的小麦转化第14-15页
     ·其它方法介导的小麦转化第15-16页
   ·小麦农杆菌转化研究现状第16-18页
     ·单子叶植物农杆菌转化回顾第16-17页
     ·小麦农杆菌转化研究进展第17-18页
   ·影响农杆菌法转化小麦的因素第18-23页
     ·小麦植株生长条件控制第19页
     ·小麦基因型第19页
     ·外植体类型第19页
     ·农杆菌菌株和载体第19-20页
     ·接种预培养和共培养的条件第20-21页
     ·选择标记基因第21-22页
     ·小麦农杆菌转化存在的问题第22-23页
   ·本研究的意义、主要内容及技术路线第23-25页
     ·立题意义第23页
     ·研究内容第23-24页
     ·技术路线第24-25页
第二章 小麦成熟胚农杆菌转化体系研究第25-45页
   ·实验材科第25-27页
     ·外源基因、质粒载体及其农杆菌菌系第25页
     ·小麦材料第25-26页
     ·试剂及耗材第26-27页
     ·仪器设备第27页
     ·PCR引物第27页
   ·研究方法第27-33页
     ·农杆菌介导法转化小麦成熟胚第27-30页
     ·小麦抗性再生植株DNA提取第30页
     ·质粒DNA提取方法第30-31页
     ·DNA片段的回收与纯化第31页
     ·组织化学染色检测第31页
     ·抗性再生植株的PCR检测第31-32页
     ·抗性再生植株的ELISA检测第32页
     ·转基因植株的Southern blotting分析第32-33页
   ·结果与分析第33-43页
     ·愈伤组织诱导结果第33-34页
     ·组织化学染色结果第34-35页
     ·T_0代转基因植株获得第35-36页
     ·T_0代转基因植株PCR检测和ELISA检测第36-38页
     ·T_1代转基因植株检测和遗传分析第38-39页
     ·T_2代转基因植株跟踪检测第39-42页
     ·转基因植株Southern blot检测第42-43页
   ·问题讨论第43-45页
     ·关于成熟胚外植体的处理方法和转化效率第43页
     ·关于PCR和ELISA结果不一致的原因第43-44页
     ·T_1代植株分离比例不符合3:1的可能原因第44页
     ·关于高分子量麦谷蛋白亚基基因在小麦中的表达第44-45页
第三章 小麦幼胚农杆菌转化体系研究第45-57页
   ·实验材科第45-47页
     ·外源基因、质粒载体及农杆菌菌系第45-46页
     ·小麦材料第46-47页
     ·试剂及耗材第47页
     ·仪器设备第47页
     ·PCR引物第47页
   ·研究方法第47-50页
     ·农杆菌介导法转化小麦幼胚第47-49页
     ·抗性再生植株DNA提取第49页
     ·组织化学染色检测第49页
     ·抗性再生植株的PCR检测第49页
     ·抗性再生植株的ELISA检测第49-50页
   ·结果与分析第50-55页
     ·不同小麦基因型幼胚农杆菌敏感性差异第50-53页
     ·抗性再生植株获得第53页
     ·T_0代抗性再生植株PCR检测和ELISA检测第53-55页
   ·讨论第55-57页
     ·关于农杆菌敏感性小麦基因型筛选第55页
     ·关于小麦与农杆菌共培养方式第55-56页
     ·关于诱导愈伤组织培养基的改进第56-57页
第四章 小麦幼穗农杆菌转化体系研究第57-65页
   ·实验材科第57-58页
     ·外源基因、质粒载体及其农杆菌菌系第57-58页
     ·小麦材料第58页
     ·试剂及耗材第58页
     ·仪器设备第58页
   ·研究方法第58-60页
     ·农杆菌介导法转化小麦幼穗第58-59页
     ·小麦植株DNA提取第59页
     ·组织化学染色检测第59页
     ·抗性再生植株的PCR检测第59-60页
   ·结果与分析第60-63页
     ·愈伤组织诱导结果第60页
     ·组织化学染色结果第60-63页
     ·抗性再生植株的获得第63页
     ·抗性再生植株PCR检测第63页
   ·问题讨论第63-65页
第五章 结论第65-66页
参考文献第66-71页
致谢第71-72页
作者简历第72页

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