| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1. 植物转录因子的研究进展 | 第10页 |
| 2. WRKY转录因子的研究进展 | 第10-12页 |
| 3. cDNA克隆的方法研究进展 | 第12-17页 |
| ·cDNA文库分类 | 第13-14页 |
| ·cDNA文库的构建方法 | 第14-16页 |
| ·cDNA文库的筛选方法 | 第16-17页 |
| 第二章 辣椒叶片cDNA文库的构建 | 第17-37页 |
| 1. 材料与方法 | 第17-28页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-28页 |
| ·辣椒栽培以及紫外线处理 | 第17-18页 |
| ·总 RNA提取 | 第18-19页 |
| ·RNA质量检测 | 第19-20页 |
| ·cDNA文库构建 | 第20-28页 |
| 2. 结果与分析 | 第28-32页 |
| ·辣椒叶片总RNA提取 | 第28-29页 |
| ·单链cDNA和双链cDNA的合成 | 第29页 |
| ·双链cDNA的过柱分级 | 第29-30页 |
| ·cDNA与载体的连接效率分析 | 第30页 |
| ·cDNA与载体的正式连接以及包装 | 第30-31页 |
| ·cDNA文库正式包装后滴度测定 | 第31页 |
| ·cDNA文库扩繁与滴度测定 | 第31-32页 |
| ·文库cDNA插入片段的大小及重组率的鉴定 | 第32页 |
| 3. 讨论 | 第32-37页 |
| ·RNA的提取方法 | 第32-33页 |
| ·RNA提取过程中应该注意的问题 | 第33页 |
| ·cDNA的合成及 LD-PCR的应用 | 第33-35页 |
| ·通过柱层析进一步纯化ds cDNA | 第35页 |
| ·连接效率 | 第35页 |
| ·cDNA文库的扩繁 | 第35-37页 |
| 第三章 利用构建的辣椒文库来筛选 WRKY的cDNA | 第37-52页 |
| 1. 材料与方法 | 第37-42页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-42页 |
| ·辣椒cDNA文库的准备 | 第37页 |
| ·WKRY特异性引物与文库测序引物 | 第37-38页 |
| ·文库筛选 | 第38-42页 |
| 2. 结果与分析 | 第42-49页 |
| ·目标cDNA PCR扩增的模板最大稀释倍数的确定 | 第42页 |
| ·三轮 PCR筛选 | 第42-46页 |
| ·第一轮 PCR电泳结果 | 第42-43页 |
| ·第二轮 PCR电泳结果 | 第43-45页 |
| ·第三轮 PCR电泳结果 | 第45-46页 |
| ·阳性克隆的获得及保存 | 第46-47页 |
| ·阳性克隆的测序以及同源性比较 | 第47-48页 |
| ·由辣椒 WRKY的基因序列推导出的氨基酸序列的分析 | 第48-49页 |
| ·辣椒 WRKY基因的结构分析及功能预测 | 第49页 |
| 3. 讨论 | 第49-52页 |
| ·筛选特定基因cDNA克隆的cDNA文库构建 | 第49-50页 |
| ·关于引物的设计 | 第50页 |
| ·96孔板文库筛选的研究 | 第50-51页 |
| ·WRKY转录因子在辣椒中的功能分析 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录1 缩略词及英汉对照 | 第57-58页 |
| 附录2 主要仪器与主要试剂 | 第58-59页 |
| 附录3 所用培养基的配制 | 第59-60页 |
| 附录4 常用 DNA Marker图 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
