摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
第一章 前言 | 第9-16页 |
·野油菜黄单胞菌(XANTHOMONAS CAMPESTRIS)概况 | 第9-11页 |
·野油菜黄单胞菌简介 | 第9页 |
·野油菜黄单胞菌一些重要的致病因子和致病相关基因 | 第9-11页 |
·海藻糖生物合成研究进展 | 第11-15页 |
·海藻糖的物理特性 | 第11-12页 |
·海藻糖的生物合成途径 | 第12-13页 |
·海藻糖生物合成在碳代谢调节中的作用 | 第13-15页 |
·海藻糖生物合成与致病性 | 第15页 |
·本工作的目的与内容 | 第15-16页 |
第二章 材料与方法 | 第16-30页 |
·材料 | 第16-20页 |
·菌株和质粒 | 第16页 |
·培养基及生长条件 | 第16-18页 |
·抗生素及其贮存、使用浓度 | 第18-19页 |
·溶液与缓冲液 | 第19-20页 |
·方法 | 第20-30页 |
·常规 PCR反应 | 第20-21页 |
·反转录 PCR | 第21-22页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第22页 |
·细菌总 DNA的提取 | 第22-23页 |
·总RNA的提取 | 第23-24页 |
·质粒的提取 | 第24页 |
·限制性内切酶酶切 | 第24页 |
·DNA连接 | 第24-25页 |
·DNA的电脉冲转化 | 第25页 |
·三亲本接合 | 第25-26页 |
·突变体的功能互补 | 第26页 |
·细菌在完全培养基中的生长繁殖曲线的绘制 | 第26页 |
·细菌在MMX培养基中的生长繁殖曲线的绘制 | 第26-27页 |
·细菌在寄主中的生长繁殖的测定 | 第27页 |
·细菌在不同碳源中的生长测定 | 第27页 |
·细菌在 NCM+NaAc培养基中的生长繁殖曲线的绘制 | 第27页 |
·细菌NaCl敏感性实验 | 第27页 |
·胞外酶的检测 | 第27-28页 |
·胞外多糖的检测 | 第28页 |
·致病性试验 | 第28-30页 |
第三章 结果与分析 | 第30-50页 |
·野油菜黄单胞菌中存在与大肠杆菌OTSAB基因、鼻疽奴卡菌的6-磷酸海藻糖磷酸化酶基因同源的基因 | 第30-32页 |
·XC1076、XC1077、XC1078在基因组上的位置 | 第32-33页 |
·XC1076、XC1077、XC1078突变体的获得 | 第33-34页 |
·突变体006B12、110C01、237E11的功能互补 | 第34-37页 |
·互补片段的扩增 | 第34-35页 |
·将互补片段连接到载体pLAFR6上 | 第35-36页 |
·三亲本接合获得突变体 | 第36-37页 |
·突变体的生长测定 | 第37-43页 |
·突变体在完全培养基中的生长测定 | 第37-38页 |
·突变体在基本培养基中的生长测定 | 第38-39页 |
·突变体在寄主中的生长繁殖的测定 | 第39-40页 |
·突变体在不同碳源中的生长测定 | 第40-42页 |
·突变体在 NCM+NaAc培养基中的生长繁殖曲线的绘制 | 第42-43页 |
·突变体 NaCl敏感性实验 | 第43-44页 |
·突变体的过敏性(HR)反应 | 第44-45页 |
·突变体的胞外多糖、胞外蛋白酶、胞外纤维素酶、胞外淀粉酶检测 | 第45-47页 |
·突变体的致病性实验 | 第47-48页 |
·XC1078突变体237E11的转录分析 | 第48-50页 |
·XC1078的突变体237E11总RNA的提取 | 第48-49页 |
·反转录 PCR | 第49-50页 |
第四章 讨论 | 第50-54页 |
·XC1078是单独转录的 | 第50页 |
·XC1076的实验结果 | 第50-51页 |
·XC1077的实验结果 | 第51-52页 |
·XC1078与糖酵解和糖异生有关 | 第52页 |
·XC1078与致病性有关 | 第52页 |
·XC1078与抗高渗有关 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58页 |