| 摘要 | 第1-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-29页 |
| ·杆状病毒 | 第11-18页 |
| ·杆状病毒对宿主的侵染 | 第11页 |
| ·杆状病毒的生活史 | 第11-12页 |
| ·杆状病毒的分类及特性 | 第12-13页 |
| ·杆状病毒的基因组研究 | 第13-14页 |
| ·杆状病毒杀虫剂研究进展 | 第14-15页 |
| ·重组杆状病毒杀虫剂研究 | 第15-18页 |
| ·扩大宿主域 | 第15页 |
| ·删除egt基因 | 第15-16页 |
| ·表达昆虫激素 | 第16页 |
| ·表达昆虫特异性毒素 | 第16-17页 |
| ·表达Bt杀虫蛋白 | 第17页 |
| ·插入保幼激素酯酶基因重组杆状病毒 | 第17-18页 |
| ·表达植物蛋白酶抑制剂 | 第18页 |
| ·棉铃虫核型多角体病毒研究进展 | 第18-29页 |
| ·HaSNPV基因组结构的研究 | 第18-20页 |
| ·HaSNPV基因组中基因排列的研究 | 第20-21页 |
| ·HaSNPV重组病毒杀虫剂的研究进展 | 第21页 |
| ·HaSNPV部分基因功能研究进展 | 第21-28页 |
| ·HaSNPV相关的结构蛋白基因 | 第21-23页 |
| ·病毒DNA复制与调控相关基因 | 第23-27页 |
| ·与宿主细胞相互作用的基因 | 第27-28页 |
| ·HaSNPV分子生物学研究展望 | 第28-29页 |
| 2 引言 | 第29页 |
| 3 材料与方法 | 第29-40页 |
| ·Ha115a和ORF 127生物学信息分析 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·数据来源 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30页 |
| ·计算机分析 | 第30页 |
| ·Ha115a和ORF 127基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第30-40页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第30-32页 |
| ·研究内容 | 第30-31页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第32-34页 |
| ·菌种和载体 | 第32页 |
| ·昆虫、病毒 | 第32页 |
| ·供试酶类、抗体与Marker | 第32-33页 |
| ·供试试剂盒 | 第33页 |
| ·常规试剂的配制 | 第33页 |
| ·碱法提取质粒所用的试剂 | 第33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析所用的试剂 | 第33-34页 |
| ·Western blotting分析所用的试剂 | 第34页 |
| ·其它试剂 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-40页 |
| ·棉铃虫核型多角体的增殖与纯化 | 第34-35页 |
| ·HaSNPV C1基因组DNA的提取 | 第35页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·PCR反应 | 第35-36页 |
| ·目的片段分离回收 | 第36页 |
| ·外源基因与载体的连接 | 第36页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·连接产物转化E.coli感受态细胞 | 第37页 |
| ·阳性克隆的筛选(蓝白斑筛选) | 第37页 |
| ·碱法小批量抽提重组克隆质粒DNA | 第37页 |
| ·连接质粒的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·ORF115a和ORF127基因表达载体的构建 | 第38-40页 |
| ·SDS-PAGE | 第40页 |
| ·Western blotting | 第40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-52页 |
| ·HaSNPVORF115a、ORF127基因序列分析 | 第40-47页 |
| ·Ha115a基因序列分析 | 第40-43页 |
| ·Ha115a基因序列特征 | 第40-42页 |
| ·Ha115a基因同源性比较 | 第42页 |
| ·Ha115a的进化分析 | 第42-43页 |
| ·Ha127基因序列分析 | 第43-47页 |
| ·Ha127基因序列特征 | 第43-45页 |
| ·Ha127基因同源性比较 | 第45-46页 |
| ·Ha127的进化分析 | 第46-47页 |
| ·Ha115a和Ha127的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第47-49页 |
| ·Ha 115a和Ha 127的克隆和鉴定 | 第47-49页 |
| ·Ha115a的克隆和鉴定 | 第47页 |
| ·Ha127的克隆和鉴定 | 第47-49页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第49页 |
| ·Ha115a的原核表达载体的构建与鉴定 | 第49页 |
| ·Ha127的原核表达载体的构建与鉴定 | 第49页 |
| ·在大肠杆菌中的表达 | 第49-52页 |
| ·Ha115a在大肠杆菌中的表达 | 第49-50页 |
| ·Ha127在大肠杆菌中的表达 | 第50-52页 |
| ·Western blotting鉴定Ha115a的表达产物 | 第52页 |
| ·Western blotting鉴定Ha127的表达产物 | 第52页 |
| 5 结论与讨论 | 第52-55页 |
| ·结论 | 第52-53页 |
| ·Ha115a和Ha127的生物信息学分析 | 第52页 |
| ·Ha115a的生物信息学分析 | 第52页 |
| ·Ha127的生物信息学分析 | 第52页 |
| ·Ha115a和Ha127的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第52-53页 |
| ·Ha115a的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第52-53页 |
| ·Ha127的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| ·大肠杆菌中表达系统 | 第53页 |
| ·本研究的意义 | 第53-54页 |
| ·Ha115a基因 | 第54页 |
| ·Ha127基因 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| Abstract | 第62-63页 |