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棉铃虫核型多角体病毒ORF115a和ORF127基因的克隆及表达

摘要第1-11页
1 文献综述第11-29页
   ·杆状病毒第11-18页
     ·杆状病毒对宿主的侵染第11页
     ·杆状病毒的生活史第11-12页
     ·杆状病毒的分类及特性第12-13页
     ·杆状病毒的基因组研究第13-14页
     ·杆状病毒杀虫剂研究进展第14-15页
     ·重组杆状病毒杀虫剂研究第15-18页
       ·扩大宿主域第15页
       ·删除egt基因第15-16页
       ·表达昆虫激素第16页
       ·表达昆虫特异性毒素第16-17页
       ·表达Bt杀虫蛋白第17页
       ·插入保幼激素酯酶基因重组杆状病毒第17-18页
       ·表达植物蛋白酶抑制剂第18页
   ·棉铃虫核型多角体病毒研究进展第18-29页
     ·HaSNPV基因组结构的研究第18-20页
     ·HaSNPV基因组中基因排列的研究第20-21页
     ·HaSNPV重组病毒杀虫剂的研究进展第21页
     ·HaSNPV部分基因功能研究进展第21-28页
       ·HaSNPV相关的结构蛋白基因第21-23页
       ·病毒DNA复制与调控相关基因第23-27页
       ·与宿主细胞相互作用的基因第27-28页
     ·HaSNPV分子生物学研究展望第28-29页
2 引言第29页
3 材料与方法第29-40页
   ·Ha115a和ORF 127生物学信息分析第29-30页
     ·材料第29-30页
       ·数据来源第29-30页
     ·方法第30页
       ·计算机分析第30页
   ·Ha115a和ORF 127基因的克隆及在大肠杆菌中的表达第30-40页
     ·研究内容和技术路线第30-32页
       ·研究内容第30-31页
       ·技术路线第31-32页
     ·材料第32-34页
       ·菌种和载体第32页
       ·昆虫、病毒第32页
       ·供试酶类、抗体与Marker第32-33页
       ·供试试剂盒第33页
       ·常规试剂的配制第33页
       ·碱法提取质粒所用的试剂第33页
       ·琼脂糖凝胶电泳第33页
       ·SDS-PAGE电泳分析所用的试剂第33-34页
       ·Western blotting分析所用的试剂第34页
       ·其它试剂第34页
     ·方法第34-40页
       ·棉铃虫核型多角体的增殖与纯化第34-35页
       ·HaSNPV C1基因组DNA的提取第35页
       ·引物设计第35页
       ·PCR反应第35-36页
       ·目的片段分离回收第36页
       ·外源基因与载体的连接第36页
       ·E.coli感受态细胞的制备第36-37页
       ·连接产物转化E.coli感受态细胞第37页
       ·阳性克隆的筛选(蓝白斑筛选)第37页
       ·碱法小批量抽提重组克隆质粒DNA第37页
       ·连接质粒的酶切鉴定第37-38页
       ·ORF115a和ORF127基因表达载体的构建第38-40页
       ·SDS-PAGE第40页
       ·Western blotting第40页
4 结果与分析第40-52页
   ·HaSNPVORF115a、ORF127基因序列分析第40-47页
     ·Ha115a基因序列分析第40-43页
       ·Ha115a基因序列特征第40-42页
       ·Ha115a基因同源性比较第42页
       ·Ha115a的进化分析第42-43页
     ·Ha127基因序列分析第43-47页
       ·Ha127基因序列特征第43-45页
       ·Ha127基因同源性比较第45-46页
       ·Ha127的进化分析第46-47页
   ·Ha115a和Ha127的克隆及在大肠杆菌中的表达第47-49页
     ·Ha 115a和Ha 127的克隆和鉴定第47-49页
       ·Ha115a的克隆和鉴定第47页
       ·Ha127的克隆和鉴定第47-49页
     ·原核表达载体的构建与鉴定第49页
       ·Ha115a的原核表达载体的构建与鉴定第49页
       ·Ha127的原核表达载体的构建与鉴定第49页
   ·在大肠杆菌中的表达第49-52页
     ·Ha115a在大肠杆菌中的表达第49-50页
     ·Ha127在大肠杆菌中的表达第50-52页
     ·Western blotting鉴定Ha115a的表达产物第52页
     ·Western blotting鉴定Ha127的表达产物第52页
5 结论与讨论第52-55页
   ·结论第52-53页
     ·Ha115a和Ha127的生物信息学分析第52页
       ·Ha115a的生物信息学分析第52页
       ·Ha127的生物信息学分析第52页
     ·Ha115a和Ha127的克隆及在大肠杆菌中的表达第52-53页
       ·Ha115a的克隆及在大肠杆菌中的表达第52-53页
       ·Ha127的克隆及在大肠杆菌中的表达第53页
   ·讨论第53-55页
     ·大肠杆菌中表达系统第53页
     ·本研究的意义第53-54页
     ·Ha115a基因第54页
     ·Ha127基因第54-55页
参考文献第55-62页
Abstract第62-63页

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