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H7亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备及ELISA诊断方法的建立

独创声明第1页
学位论文版权使用授权书第7-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 引言第10-26页
   ·禽流感流行历史及现状第10-13页
     ·LPAI第11页
     ·HPAI第11-13页
   ·我国禽流感流行历史及现状第13-15页
     ·H5亚型禽流感第14页
     ·H9N2亚型禽流感第14-15页
   ·高致病力禽流感病毒的研究进展第15-19页
     ·致病性(毒力)的测定第15-16页
     ·HA和NA对致病力的影响第16-19页
     ·低致病力禽流感病毒向高致病力禽流感病毒的转变第19页
   ·高致病力禽流感诊断的研究进展第19-25页
     ·临床诊断第20页
     ·实验室诊断第20-25页
   ·本研究的目的和意义第25-26页
2 材料与方法第26-36页
   ·材料第26-27页
     ·主要仪器设备及耗材第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·实验动物第27页
     ·病毒第27页
     ·阴性和阳性抗原对照第27页
   ·方法第27-36页
     ·单克隆抗体的制备第27-31页
     ·多克隆抗体的制备第31-32页
     ·抗原捕捉ELISA方法的建立第32-34页
     ·试剂盒的组装及保存期试验第34-36页
3 结果第36-58页
   ·单抗的制备第36-37页
     ·抗原的制备第36页
     ·动物免疫与抗体水平检测第36页
     ·阳性杂交瘤细胞株的筛选及HA蛋白单克隆抗体细胞株的建立第36页
     ·单克隆抗体特性的鉴定第36-37页
     ·杂交瘤细胞株抗体分泌稳定性的测定第37页
   ·抗原捕捉ELISA方法的建立第37-51页
     ·捕获抗体和一抗工作浓度的确定第37-38页
     ·酶标抗体工作浓度的确定第38页
     ·封闭、一抗反应时间和酶标抗体的确定第38页
     ·标准阳性抗原对照和标准阴性对照的确定第38-39页
     ·尿囊液临界值的确定第39-40页
     ·用血凝试验和鸡胚接种实验来验证的抗原捕获ELISA第40页
     ·特异性交叉试验第40页
     ·尿囊液敏感性比较试验第40-41页
     ·酶标板均一性和结合率的检测第41-42页
     ·重复性实验第42页
     ·H7亚型高致病性禽流感病毒感染临床样本的检测第42-50页
     ·临床样本阴阳性判定标准的确定及检测靶器官的选择第50-51页
     ·敏感性实验第51页
   ·试剂盒的组装及保存期试验第51-58页
     ·试剂盒的组成第51-52页
     ·试剂盒保存期试验第52-58页
4 讨论第58-62页
   ·抗原的制备第58页
   ·动物免疫与抗体水平检测第58页
   ·细胞融合第58-59页
   ·HA亚型单克隆抗体特异性抗体的筛选第59页
   ·杂交瘤细胞克隆及单克隆抗体特性的鉴定第59页
   ·多克隆抗体的制备第59页
   ·免疫动物第59-60页
   ·多克隆抗体的鉴定第60页
   ·抗原捕捉ELISA方法的建立第60-61页
     ·抗原捕获ELISA工作条件的建立第60页
     ·标准阳性抗原对照和标准阴性对照的确定第60页
     ·检测样本阴阳性判定标准的确定及检测靶器官的选择第60-61页
   ·试剂盒的组装及保存期试验第61页
   ·抗原捕获ELISA的优缺点第61-62页
5 结论第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-74页
攻读硕士期间发表的学术论文第74页

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