| 前言 | 第1-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-61页 |
| 第一章 鱼类免疫学研究进展 | 第13-37页 |
| 1 鱼类免疫系统 | 第14-28页 |
| 2 固有性免疫应答及其调节 | 第28-30页 |
| 3 适应性免疫应答及调节 | 第30-33页 |
| 4 母源性免疫 | 第33-34页 |
| 5 影响免疫应答的因素 | 第34-35页 |
| 6 免疫学在鱼病诊断与防治中的应用 | 第35-36页 |
| 7 展望 | 第36-37页 |
| 第二章 鱼类细胞因子研究进展 | 第37-53页 |
| 1 鱼类细胞因子介绍 | 第37-49页 |
| 2 细胞因子和鱼类免疫细胞的关系 | 第49-50页 |
| 3 鱼类细胞因子和非特异性免疫系统的关系 | 第50-51页 |
| 4 鱼类细胞因子研究成果的应用 | 第51-53页 |
| 第三章 mRNA 差异显示技术的研究进展 | 第53-61页 |
| 1 mRNA 差异显示技术的原理和方法 | 第53-54页 |
| 2 模板与反转录反应 | 第54页 |
| 3 引物 | 第54-56页 |
| 4 PCR 扩增条件和参数选择 | 第56-57页 |
| 5 电泳与差异条带的显示 | 第57页 |
| 6 差异cDNA 片段的回收、纯化及再扩增 | 第57-58页 |
| 7 差异表达基因的鉴定 | 第58页 |
| 8 差异cDNA片段的克隆与序列分析 | 第58页 |
| 9 mRNA 差异显示法的优势与不足 | 第58-59页 |
| 10 mRNA 差异显示技术的应用 | 第59-61页 |
| 第二篇 研究内容 | 第61-167页 |
| 实验一 鲤鱼(Cyprinus carpio L.)正常和有丝裂原刺激的外周血白细胞cDNA文库的构建 | 第61-87页 |
| 1 材料与方法 | 第61-76页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62-76页 |
| 2 结果 | 第76-79页 |
| ·鲤鱼外周血白细胞分离和体外培养 | 第76页 |
| ·培养鲤鱼外周血白细胞总RNA的提取和mRNA分离 | 第76-78页 |
| ·cDNA 文库的质量鉴定 | 第78-79页 |
| ·HybriZAP-2.1 噬菌体文库的体外大量切割 | 第79页 |
| 3 讨论 | 第79-84页 |
| ·酵母双杂交体系及酵母双杂交载体 | 第79-81页 |
| ·cDNA 文库的构建 | 第81-83页 |
| ·白细胞cDNA文库及免疫应答相关基因 | 第83-84页 |
| 4 小结 | 第84-87页 |
| 实验二 鲤鱼(Cyprinus carpio L.)正常与有丝分裂原刺激的外周血白细胞光mRNA 的差异显示分析 | 第87-125页 |
| 1 材料与方法 | 第88-96页 |
| ·材料 | 第88-89页 |
| ·方法 | 第89-96页 |
| ·阳性克隆片段的核苷酸序列测定及同源性分析 | 第96页 |
| 2 结果 | 第96-120页 |
| ·总RNA完整性的检测 | 第96页 |
| ·差异片段的获得 | 第96-97页 |
| ·差异条带的再扩增和差异片段测序 | 第97页 |
| ·差异片段的 BLAST X 同源性生物信息学分析 | 第97-102页 |
| ·20 个不同的cDNA 序列和BLAST N 同源性生物信息学分析 | 第102-120页 |
| 3 讨论 | 第120-123页 |
| ·差异表达基因的分离方法 | 第120页 |
| ·mRNA 差异显示技术 | 第120-123页 |
| 4 小结 | 第123-125页 |
| 实验三 鲤鱼(Cyprinus carpio L.)外周血白细胞蛋白酶体激活因子PA28亚单位全长cDNA的筛选与分析 | 第125-153页 |
| 1 材料与方法 | 第125-140页 |
| ·材料 | 第125-129页 |
| ·鲤鱼蛋白酶体亚单位激活因子 PA28 的筛选和基因功能分析方法 | 第129-134页 |
| ·PA28 在鲤鱼外周血白细胞和组织中的差异表达分析 | 第134-136页 |
| ·PA28 的 Northern blot 杂交 | 第136-139页 |
| ·PA28 的 Southern blot 杂交 | 第139-140页 |
| 2 结果 | 第140-150页 |
| ·筛选PA28 cDNA 全长基因的探针制备 | 第140页 |
| ·筛选 PA28 的结果和序列分析 | 第140-142页 |
| ·PA28 分子的功能结构域及同源性分析 | 第142-143页 |
| ·不同物种PA28 氨基酸序列的聚类分析 | 第143页 |
| ·鲤鱼鳃、肾、脾脏、肌肉、脑、心、肝七个组织总RNA 提取结果 | 第143-144页 |
| ·鲤鱼外周血白细胞的 RT-PCR 结果 | 第144页 |
| ·鲤鱼鳃、肾、脾脏、肌肉、脑、心、肝七个组织的的RT-PCR 结果 | 第144-145页 |
| ·嗜水气单胞菌 Ahc501 刺激的鲤鱼鳃、肾、脾脏、肌肉、脑、心、肝七个组织的 RT-PCR 结果 | 第145页 |
| ·PA28 经过嗜水气单胞菌刺激前后组织的mRNA 表达的t 检验分析结果和图像分析结果 | 第145-146页 |
| ·鲤鱼外周血白细胞经过 LP 和 ConA 刺激前后的 PA28 mRNA 表达的t 检验分析结果和图像分析结果 | 第146-148页 |
| ·PA28 的Northern blot 和Southern blot 杂交探针 | 第148页 |
| ·鲤鱼外周血白细胞总RNA 的测定结果 | 第148页 |
| ·鲤鱼外周血白细胞总RNA的电泳结果 | 第148-149页 |
| ·PA28 亚单位的 Northern blot 杂交结果 | 第149-150页 |
| 3 讨论 | 第150-152页 |
| 4 小结 | 第152-153页 |
| 实验四 鲤鱼(Cyprinus carpio L.)外周血白细胞IL-8 全长cDNA 的克隆与分析 | 第153-167页 |
| 1 材料与方法 | 第153-157页 |
| ·材料 | 第153-154页 |
| ·方法 | 第154-156页 |
| ·IL-8 在鲤鱼外周血白细胞中的差异表达分析 | 第156-157页 |
| ·鲤鱼外周血白细胞 IL-8 的 Southern blot 杂交 | 第157页 |
| ·鲤鱼外周血白细胞IL-8 的Northern 杂交 | 第157页 |
| 2 结果与分析 | 第157-163页 |
| ·探针的制备 | 第157页 |
| ·A26 探针对有丝裂原刺激的鲤外周血白细胞cDNA 文库筛选和序列分析 | 第157-158页 |
| ·IL-8 的功能结构域及同源性分析 | 第158-159页 |
| ·不同物种 IL-8 氨基酸序列的聚类分析 | 第159页 |
| ·鲤鱼外周血白细胞IL-8 的 RT-PCR 结果 | 第159-161页 |
| ·鲤鱼 IL-8 的 Northern blot 结果 | 第161-162页 |
| ·鲤鱼 IL-8 的Southern blot 结果 | 第162-163页 |
| 3 讨论 | 第163-165页 |
| 4 小结 | 第165-167页 |
| 结论 | 第167-169页 |
| 参考文献 | 第169-179页 |
| 攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第179-181页 |
| 中文摘要 | 第181-185页 |
| 英文摘要 | 第185-188页 |
| 致谢 | 第188-190页 |
| CURRICULUM | 第190-191页 |
| 导师及作者简介 | 第191页 |
