摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
·野生稻重要基因的挖掘与利用 | 第11-13页 |
·野生稻蕴含的丰富的有利基因是水稻育种的未来 | 第11页 |
·现有的野生稻利用技术存在诸多局限 | 第11-12页 |
·全基因组嵌入突变体库用于挖掘野生稻有利基因的策略 | 第12-13页 |
·植物基因克隆技术的发展 | 第13-16页 |
·PCR 扩增克隆 | 第13-14页 |
·表型基因克隆法 | 第14页 |
·转座子标签法和T-DNA 标签技术法(T-DNA Tagging) | 第14页 |
·鸟枪克隆法(Shotgun Cloning) | 第14页 |
·mRNA 差异显示技术 | 第14-15页 |
·定位克隆 | 第15页 |
·同源序列克隆 | 第15-16页 |
·大片段文库研究进展 | 第16-19页 |
·λ噬菌体文库 | 第16页 |
·Cosmids 文库 | 第16页 |
·酵母人工染色体(YAC) | 第16-17页 |
·细菌人工染色体(BAC) | 第17-18页 |
·P1 克隆系统和源于P1 的人工染色体(PAC) | 第18页 |
·双元细菌人工染色体( BIBAC) | 第18-19页 |
·TAC 文库研究进展 | 第19-24页 |
·TAC 载体研究进展 | 第19-22页 |
·TAC 文库的研究进展 | 第22-24页 |
·本论文立题依据、技术路线 | 第24-26页 |
·立题依据 | 第24-25页 |
·技术路线 | 第25-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-35页 |
·实验材料 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-35页 |
·载体处理 | 第26-29页 |
·基因组大片段DNA 的制备 | 第29-32页 |
·载体与回收的外源片段的连接 | 第32-33页 |
·文库的检测 | 第33页 |
·文库的杂交筛选 | 第33-35页 |
第三章 实验结果与分析 | 第35-44页 |
·pYLTAC27 载体的检测 | 第35-37页 |
·pYLTAC27 质粒的鉴定 | 第35-36页 |
·pYLTAC27 质粒的浓度测定 | 第36页 |
·载体的酶切与去磷酸化 | 第36-37页 |
·载体的连接测试 | 第37页 |
·小粒野生稻大片段DNA 的制备 | 第37-40页 |
·小粒野生稻核基因组DNA 的质量的鉴定 | 第37-38页 |
·小粒野生稻核基因组DNA 的酶切条件的确定 | 第38-39页 |
·大量酶切后大片段的第一次分离 | 第39页 |
·大片段的第二次分离 | 第39页 |
·回收大片段及浓度测定 | 第39-40页 |
·大片段和载体的连接及转化 | 第40页 |
·文库质量的检测 | 第40-43页 |
·文库的限制性酶切分析 | 第40-41页 |
·TAC 克隆继代培养的稳定性分析 | 第41-42页 |
·TAC 克隆穿梭培养的稳定性分析 | 第42-43页 |
·文库的杂交筛选 | 第43-44页 |
第四章 实验讨论 | 第44-46页 |
·构建TAC 文库的优势 | 第44页 |
·对实验过程的优化 | 第44-45页 |
·高效率TAC 文库构建体系的建立 | 第45-46页 |
第五章 结束语 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
作者在学期间取得的学术成果 | 第53-54页 |
附录A 主要仪器设备 | 第54-55页 |
附录B 主要试剂的配制 | 第55-57页 |