摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第1部分 文献综述 | 第12-25页 |
1 盐胁迫 | 第12-14页 |
·盐胁迫对植物的伤害 | 第12-13页 |
·植物耐盐的生理机制 | 第13-14页 |
2 干旱胁迫 | 第14-16页 |
·干旱胁迫对植物的伤害 | 第14-15页 |
·植物耐旱的生理机制 | 第15-16页 |
3 氧化胁迫 | 第16-19页 |
·活性氧的产生 | 第17页 |
·活性氧的清除 | 第17-19页 |
·活性氧的生物学效应 | 第19页 |
4 抗坏血酸过氧化物酶研究进展 | 第19-23页 |
·APX 分子特性 | 第19-20页 |
·APX 作用机制 | 第20-21页 |
·APX 研究进展和研究方向 | 第21-23页 |
5 本论文的目的意义和技术路线 | 第23-25页 |
·本论文的目的意义 | 第23-24页 |
·本研究技术路线 | 第24-25页 |
第2部分 741 毛白杨 APX 基因的生物信息学分析 | 第25-36页 |
1 实验材料 | 第25页 |
2 实验方法 | 第25-26页 |
·APX 核酸序列分析及对应的氨基酸序列推导 | 第25页 |
·APX 蛋白一级结构理化特性分析 | 第25-26页 |
·APX 蛋白二级结构分析 | 第26页 |
·APX 蛋白功能结构域分析 | 第26页 |
·APX 蛋白三级结构分析 | 第26页 |
3 结果与分析 | 第26-34页 |
·APX 核苷酸序列一致性分析及氨基酸水平进化树构建 | 第26-27页 |
·APX 一级结构和理化性质分析 | 第27-28页 |
·APX 氨基酸序列亲水性/疏水性分析 | 第28-29页 |
·APX 信号肽及跨膜结构区预测及分析 | 第29-31页 |
·APX 亚细胞定位分析 | 第31-32页 |
·APX 二级结构分析 | 第32-33页 |
·APX 功能结构域分析 | 第33页 |
·APX 三级结构分析 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-36页 |
第3部分 过量表达毛白杨 APX 基因烟草的获得及分子鉴定 | 第36-48页 |
1 实验材料 | 第36页 |
2 实验方法 | 第36-42页 |
·植物表达载体转化大肠杆菌 | 第36-38页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第38-39页 |
·农杆菌介导法转化烟草 | 第39-41页 |
·转基因烟草的分子检测 | 第41-42页 |
·烟草的 GUS 染色 | 第42页 |
3 结果与分析 | 第42-47页 |
·APX 过量表达载体的构建及酶切鉴定 | 第42-43页 |
·APX 过量表达载体转化农杆菌及 PCR 检测 | 第43-44页 |
·烟草的转化及再生 | 第44-45页 |
·转基因烟草的 DNA 提取及 PCR 检测 | 第45-46页 |
·转基因烟草 GUS 染色 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-48页 |
第4部分 过量表达毛白杨 APX 基因提高转基因烟草的耐盐能力 | 第48-59页 |
1 材料与处理 | 第48-49页 |
·实验材料 | 第48页 |
·材料处理 | 第48页 |
·数据处理 | 第48-49页 |
2 实验方法 | 第49-51页 |
·烟草形态学观察与指标测定 | 第49页 |
·抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性测定 | 第49页 |
·烟草叶片 H2O2含量的测定 | 第49-50页 |
·烟草叶片中 ASA 含量的测定 | 第50页 |
·烟草叶片中丙二醛(MDA)含量的测定 | 第50-51页 |
·烟草叶片细胞膜透性(相对电导率)的测定 | 第51页 |
·烟草叶片总叶绿素含量的测定 | 第51页 |
3 结果与分析 | 第51-57页 |
·盐胁迫对转基因植株与对照植株表型的影响 | 第51-53页 |
·盐胁迫对转基因植株与对照植株叶片 APX 酶活性的影响 | 第53-54页 |
·盐胁迫对转基因植株与对照植株叶片 H2O2含量的影响 | 第54-55页 |
·盐胁迫对转基因植株与对照植株叶片 ASA 含量的影响 | 第55页 |
·盐胁迫对转基因植株与对照植株叶片 MDA 含量的影响 | 第55-56页 |
·盐胁迫对转基因植株与对照植株叶片细胞膜透性的影响 | 第56-57页 |
·盐胁迫对转基因植株与对照植株叶片总叶绿素含量的影响 | 第57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
第5部分 过量表达毛白杨 APX 基因提高转基因烟草的抗旱能力 | 第59-65页 |
1 材料与处理 | 第59-60页 |
·实验材料 | 第59页 |
·材料处理 | 第59页 |
·数据处理 | 第59-60页 |
2 实验方法 | 第60页 |
·烟草叶片相对含水量测定 | 第60页 |
·其他生理指标测定 | 第60页 |
3 结果与分析 | 第60-64页 |
·干旱胁迫对转基因植株与对照植株表型、组织含水量的影响 | 第60-61页 |
·干旱胁迫对转基因植株与对照植株叶片 APX 酶活性的影响 | 第61-62页 |
·干旱胁迫对转基因植株与对照植株叶片 H2O2含量的影响 | 第62页 |
·干旱胁迫对转基因植株与对照植株叶片 MDA 含量的影响 | 第62-63页 |
·干旱胁迫对转基因植株与对照植株叶片总叶绿素含量的影响 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-65页 |
第6部分 过量表达毛白杨 APX 基因提高转基因烟草的抗氧化胁迫能力 | 第65-72页 |
1 材料与处理 | 第65-66页 |
·实验材料 | 第65页 |
·材料处理 | 第65页 |
·数据处理 | 第65-66页 |
2 实验方法 | 第66页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第66页 |
·其他生理指标测定 | 第66页 |
3 结果与分析 | 第66-71页 |
·氧化胁迫对转基因植株与对照植株表型的影响 | 第66页 |
·氧化胁迫对转基因植株与对照植株叶片 APX 酶活性的影响 | 第66-67页 |
·氧化胁迫对转基因植株与对照植株叶片 SOD 酶活性的影响 | 第67-68页 |
·氧化胁迫对转基因植株与对照植株叶片 H2O2含量的影响 | 第68-69页 |
·氧化胁迫对转基因植株与对照植株叶片 ASA 含量的影响 | 第69页 |
·氧化胁迫对转基因植株与对照植株叶片 MDA 含量的影响 | 第69-70页 |
·氧化胁迫对转基因植株与对照植株叶片总叶绿素含量的影响 | 第70-71页 |
4 讨论 | 第71-72页 |
主要结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-80页 |
附录 | 第80-87页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第87-88页 |
致谢 | 第88页 |