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人类心脏发育相关的三个候选基因的克隆和功能研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
第一章 引言和文献综述第11-31页
   ·心脏发育的基因调控机理第11-19页
     ·果蝇心脏发育的基因调控第12-14页
     ·脊椎动物心脏发育的基因调控第14-19页
   ·锌指蛋白转录因子在心脏发育基因调控中的作用第19-25页
     ·锌指蛋白基因家族第19-21页
     ·锌指的结构第21-22页
     ·锌指蛋白基因在心脏发育过程中的作用第22-25页
   ·MAPK信号途径与心脏发育第25-28页
   ·本研究的意义与展望第28-31页
第二章 实验材料和方法第31-45页
   ·主要材料第31-35页
     ·主要的基因工程酶和试剂盒第31-32页
     ·菌株和质粒第32页
     ·主要生化试剂第32页
     ·缓冲液和培养基第32-33页
     ·其他试剂和原料第33页
     ·生物信息学软件和数据库第33-34页
     ·主要实验仪器第34-35页
   ·实验方法第35-45页
     ·总RNA提取第35页
     ·人类胚胎心脏cDNA文库的构建第35-36页
     ·巢式PCR(nest PCR)扩增开放阅读框第36-37页
     ·凝胶回收第37页
     ·连接第37页
     ·感受态细胞的制备第37-38页
     ·连接产物的转化第38页
     ·重组克隆的筛选和鉴定第38页
     ·质粒酶切第38-39页
     ·Northern杂交实验第39页
     ·反转录RT-PCR第39-40页
     ·常规细胞培养及转染第40-41页
     ·亚细胞定位观察第41页
     ·基因信号途径的report assay第41-42页
     ·RNAi实验第42-43页
     ·酵母双杂交第43-45页
第三章 锌指蛋白基因ZNF325的克隆和功能研究结果第45-59页
   ·ZNF325基因概况第45页
   ·序列分析第45-47页
   ·ZNF325蛋白与RBAK蛋白的比较第47-48页
   ·ZNF325基因的人类组织Northern杂交结果第48-50页
   ·ZNF325蛋白的亚细胞定位分析第50-52页
     ·EGFP-N1-ZNF325重纰质粒的构建第50-52页
     ·细胞培养及转染第52页
   ·通过报告基因检测 ZNF325的转录活性第52-59页
     ·质粒构建第52-54页
     ·表达报告基因检测结果第54-55页
     ·ZNF325结构域片段拆除研究第55-56页
     ·RNAi对ZNF325的转录活性的影响第56-59页
第四章 ANKZF1b基因的克隆和功能研究结果第59-65页
   ·锌指新基因ANKZF1b的克降和序列分析结果第59-61页
   ·ANKZF1b在人体早期胚胎中的的表达第61-62页
   ·ANKZF1b基因的亚细胞定位分析第62-63页
   ·ANKZF1b在MAPK信号途径中抑制AP-1和SRE的转录活性第63-64页
   ·ANKZF1b基因的实验结果总结与讨论第64-65页
第五章 AHNAKc基因的克隆和功能研究结果第65-73页
   ·AHNAKc克隆和序列分析第65-68页
   ·AHNAKc与AHNAKa的剪切方式比较第68-70页
   ·AHNAKc蛋白的亚细胞定位第70-71页
   ·酵母双杂交第71-72页
     ·pGBKT7-AHNAKc重组质粒的构建第71页
     ·酵母双杂交第71-72页
   ·AHNAKc基因实验结果的讨论第72-73页
结语第73-75页
参考文献第75-84页
致谢第84-85页
附录第85-89页
 附录1 英文缩写词简表第85-87页
 附录2 攻读学位期间发表的学术论文和综述第87-89页

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