中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
第一章 引言和文献综述 | 第11-31页 |
·心脏发育的基因调控机理 | 第11-19页 |
·果蝇心脏发育的基因调控 | 第12-14页 |
·脊椎动物心脏发育的基因调控 | 第14-19页 |
·锌指蛋白转录因子在心脏发育基因调控中的作用 | 第19-25页 |
·锌指蛋白基因家族 | 第19-21页 |
·锌指的结构 | 第21-22页 |
·锌指蛋白基因在心脏发育过程中的作用 | 第22-25页 |
·MAPK信号途径与心脏发育 | 第25-28页 |
·本研究的意义与展望 | 第28-31页 |
第二章 实验材料和方法 | 第31-45页 |
·主要材料 | 第31-35页 |
·主要的基因工程酶和试剂盒 | 第31-32页 |
·菌株和质粒 | 第32页 |
·主要生化试剂 | 第32页 |
·缓冲液和培养基 | 第32-33页 |
·其他试剂和原料 | 第33页 |
·生物信息学软件和数据库 | 第33-34页 |
·主要实验仪器 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-45页 |
·总RNA提取 | 第35页 |
·人类胚胎心脏cDNA文库的构建 | 第35-36页 |
·巢式PCR(nest PCR)扩增开放阅读框 | 第36-37页 |
·凝胶回收 | 第37页 |
·连接 | 第37页 |
·感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
·连接产物的转化 | 第38页 |
·重组克隆的筛选和鉴定 | 第38页 |
·质粒酶切 | 第38-39页 |
·Northern杂交实验 | 第39页 |
·反转录RT-PCR | 第39-40页 |
·常规细胞培养及转染 | 第40-41页 |
·亚细胞定位观察 | 第41页 |
·基因信号途径的report assay | 第41-42页 |
·RNAi实验 | 第42-43页 |
·酵母双杂交 | 第43-45页 |
第三章 锌指蛋白基因ZNF325的克隆和功能研究结果 | 第45-59页 |
·ZNF325基因概况 | 第45页 |
·序列分析 | 第45-47页 |
·ZNF325蛋白与RBAK蛋白的比较 | 第47-48页 |
·ZNF325基因的人类组织Northern杂交结果 | 第48-50页 |
·ZNF325蛋白的亚细胞定位分析 | 第50-52页 |
·EGFP-N1-ZNF325重纰质粒的构建 | 第50-52页 |
·细胞培养及转染 | 第52页 |
·通过报告基因检测 ZNF325的转录活性 | 第52-59页 |
·质粒构建 | 第52-54页 |
·表达报告基因检测结果 | 第54-55页 |
·ZNF325结构域片段拆除研究 | 第55-56页 |
·RNAi对ZNF325的转录活性的影响 | 第56-59页 |
第四章 ANKZF1b基因的克隆和功能研究结果 | 第59-65页 |
·锌指新基因ANKZF1b的克降和序列分析结果 | 第59-61页 |
·ANKZF1b在人体早期胚胎中的的表达 | 第61-62页 |
·ANKZF1b基因的亚细胞定位分析 | 第62-63页 |
·ANKZF1b在MAPK信号途径中抑制AP-1和SRE的转录活性 | 第63-64页 |
·ANKZF1b基因的实验结果总结与讨论 | 第64-65页 |
第五章 AHNAKc基因的克隆和功能研究结果 | 第65-73页 |
·AHNAKc克隆和序列分析 | 第65-68页 |
·AHNAKc与AHNAKa的剪切方式比较 | 第68-70页 |
·AHNAKc蛋白的亚细胞定位 | 第70-71页 |
·酵母双杂交 | 第71-72页 |
·pGBKT7-AHNAKc重组质粒的构建 | 第71页 |
·酵母双杂交 | 第71-72页 |
·AHNAKc基因实验结果的讨论 | 第72-73页 |
结语 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
附录 | 第85-89页 |
附录1 英文缩写词简表 | 第85-87页 |
附录2 攻读学位期间发表的学术论文和综述 | 第87-89页 |