第一章 引言 | 第1-20页 |
·单链抗体技术 | 第8-15页 |
·单链抗体的产生 | 第8-9页 |
·单链抗体的结构及特点 | 第9-10页 |
·单链抗体的来源 | 第10-12页 |
·杂交瘤细胞 | 第10-11页 |
·噬菌体抗体库 | 第11-12页 |
·体内筛选 | 第12页 |
·单链抗体的研究进展 | 第12-15页 |
·单链抗体多聚体 | 第12页 |
·双特异性单链抗体 | 第12-13页 |
·单域抗体或最小识别单位 | 第13页 |
·具有恒定区的单链抗体 | 第13-14页 |
·胞内抗体 | 第14-15页 |
·cyclin D1与肿瘤 | 第15-18页 |
·cyclin D1蛋白的发现及生物学特点 | 第15页 |
·cyclin D1 蛋白的作用机制 | 第15-17页 |
·cyclin Dl 蛋白与肿瘤的关系 | 第17页 |
·cyclin Dl 与肿瘤治疗 | 第17-18页 |
·本研究的立题依据及意义 | 第18-20页 |
第二章 实验材料与方法 | 第20-33页 |
·实验材料 | 第20-25页 |
·噬菌体抗体、菌株及细胞株 | 第20页 |
·主要试剂,缓冲液及培养基 | 第20-25页 |
·各种溶液配制 | 第20-25页 |
·实验仪器 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-33页 |
·辅助噬菌体的扩增及滴度的测定 | 第26-27页 |
·噬菌体抗体的扩增及滴度测定 | 第27页 |
·噬菌体抗体的抗原结合活性鉴定 | 第27-28页 |
·ELISA 法检测可溶性scFv 的活性 | 第28页 |
·噬菌体单链抗体的可溶性表达及纯化 | 第28-29页 |
·Westernblot 检测表达和纯化的scFv | 第29-30页 |
·竞争性ELISA 法检测scFv 的活性 | 第30页 |
·单链抗体的亲和力测定 | 第30页 |
·单链抗体与肿瘤细胞内cyclin D1 蛋白的相互作用 | 第30-33页 |
·HeLa 与MCF-7 细胞的培养 | 第30-31页 |
·HeLa 与MCF-7 细胞爬片的制备 | 第31页 |
·Dot-blot 实验 | 第31-32页 |
·免疫荧光染色实验 | 第32-33页 |
第三章 实验结果 | 第33-45页 |
·辅助噬菌体的扩增及滴度 | 第33页 |
·噬菌体抗体的扩增及滴度 | 第33页 |
·噬菌体抗体的活性鉴定 | 第33页 |
·ELISA 法检测可溶性scFv 的活性 | 第33-35页 |
·scFv 的可溶性表达及纯化 | 第35-38页 |
·Westernblot 检测scFv 的表达和纯化 | 第38页 |
·竞争性ELISA 法检测scFv 的活性 | 第38-39页 |
·scFv4 及scFv5 的亲和力及效价测定 | 第39-40页 |
·Dot-blot 实验 | 第40-45页 |
第四章 讨论 | 第45-49页 |
·抗cyclin D1 噬菌体单链抗体的表达纯化系统的建立 | 第45-46页 |
·单链抗体的亲和力测定方法的选择 | 第46-47页 |
·抗cyclin D1 蛋白单链抗体的生物学活性分析 | 第47-49页 |
第五章 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
中文摘要 | 第57-60页 |
英文摘要 | 第60-62页 |
致谢 | 第62页 |