| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-21页 |
| ·凋亡细胞的特征 | 第11-12页 |
| ·形态学特征 | 第11页 |
| ·生物化学特征 | 第11-12页 |
| ·DNA降解 | 第11页 |
| ·钙离子浓度升高 | 第11页 |
| ·线粒体膜电位及通透性改变 | 第11-12页 |
| ·生物大分子的合成 | 第12页 |
| ·其他生化特征 | 第12页 |
| ·细胞凋亡的机制 | 第12-14页 |
| ·死亡受体途径 | 第12-13页 |
| ·线粒体途径 | 第13页 |
| ·AIF蛋白与细胞凋亡 | 第13页 |
| ·凋亡抑制剂IAP与细胞凋亡 | 第13-14页 |
| ·bcl-2基因与细胞凋亡 | 第14页 |
| ·p53基因与细胞凋亡 | 第14页 |
| ·多糖诱导肿瘤细胞凋亡的机制 | 第14-18页 |
| ·多糖能诱导肿瘤细胞凋亡 | 第14-15页 |
| ·多糖诱导肿瘤细胞凋亡的机制 | 第15-18页 |
| ·调控癌基因 | 第15-17页 |
| ·死亡受体途径 | 第17页 |
| ·线粒体途径 | 第17页 |
| ·端粒酶 | 第17页 |
| ·DNA拓扑酶 | 第17-18页 |
| ·改变钙离子浓度 | 第18页 |
| ·改变膜流动性 | 第18页 |
| ·硒多糖的生物活性 | 第18-21页 |
| ·抗金属中毒的作用 | 第19页 |
| ·抗氧化作用 | 第19页 |
| ·抗诱变作用 | 第19页 |
| ·增强免疫作用 | 第19-20页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第20-21页 |
| 第二章 灵芝硒多糖诱导K562细胞凋亡 | 第21-33页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·材料和试剂 | 第21页 |
| ·仪器 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-25页 |
| ·富硒灵芝的培养 | 第22页 |
| ·灵芝硒多糖的提取 | 第22页 |
| ·灵芝硒多糖的分离纯化 | 第22-23页 |
| ·去除蛋白 | 第22页 |
| ·去除色素 | 第22页 |
| ·分级沉淀 | 第22-23页 |
| ·DEAE纤维素柱层析 | 第23页 |
| ·细胞培养 | 第23页 |
| ·细胞生长抑制实验——MTT比色法 | 第23-24页 |
| ·光学显微镜检测K562细胞的形态变化 | 第24页 |
| ·透射电镜检测K562细胞形态学变化 | 第24-25页 |
| ·K562细胞总DNA提取及琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| ·流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-31页 |
| ·SeGLP-2B,SeGLP-3B对K562细胞的生长抑制作用 | 第25-26页 |
| ·SeGLP-2B,SeGLP-3B对K562细胞形态的影响 | 第26-29页 |
| ·光学显微镜观察结果 | 第26-27页 |
| ·透射电镜观察结果 | 第27-29页 |
| ·SeGLP-2B,SeGLP-3B对K562细胞DNA的影响 | 第29页 |
| ·流式细胞术检测K562细胞周期及凋亡率 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 灵芝硒多糖诱导K562细胞凋亡机制的研究 | 第33-45页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·材料与试剂 | 第33-34页 |
| ·仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·caspase系列酶活性的测定 | 第34-35页 |
| ·caspase抑制剂对SeGLP-2B,SeGLP-3B诱导的K56细胞凋亡的影响 | 第35页 |
| ·western blot检测caspase系列酶的表达 | 第35-37页 |
| ·处理收集细胞 | 第35页 |
| ·蛋白提取 | 第35-36页 |
| ·测定样品蛋白质浓度 | 第36页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36-37页 |
| ·转膜 | 第37页 |
| ·结合一抗 | 第37页 |
| ·二抗结合 | 第37页 |
| ·ECL显色 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-42页 |
| ·SeGLP-2B,SeGLP-3B对K562细胞中caspase活性的影响 | 第37-39页 |
| ·caspase抑制剂对SeGLP-2B,SeGLP-3B诱导的K56细胞凋亡的影响 | 第39-41页 |
| ·SeGLP-2B,SeGLP-3B对K562细胞caspase蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 灵芝硒多糖对细胞凋亡相关调控基因的影响 | 第45-51页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·材料和试剂 | 第45页 |
| ·仪器 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·流式细胞仪检测bcl-2、p53的表达 | 第45-46页 |
| ·培养及处理细胞 | 第45页 |
| ·固定细胞 | 第45-46页 |
| ·结合抗体 | 第46页 |
| ·上机检测 | 第46页 |
| ·PCR扩增检测p53基因第6、9外显子序列 | 第46-47页 |
| ·培养及处理细胞 | 第46页 |
| ·提取细胞总DNA | 第46页 |
| ·目的片段扩增 | 第46页 |
| ·目的片段序列测定及分析 | 第46页 |
| ·序列比对 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-49页 |
| ·流式细胞术检测SeGLP-2B,SeGLP-3B对p53蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
| ·流式细胞术检测SeGLP-2B,SeGLP-3B对bcl-2蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| ·SeGLP-2B,SeGLP-3B对K562细胞p53基因第6,9外显子序列的影响 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 学位论文独创性声明 | 第58页 |
| 学位论文版权的使用授权书 | 第58-59页 |
