| 前言 | 第1-7页 |
| 第一部分 椎间盘退变动物模型的制造 | 第7-18页 |
| 材料和方法 | 第7-18页 |
| 一、材料 | 第7页 |
| 1.实验动物 | 第7页 |
| 2.实验试剂和仪器 | 第7页 |
| 二、方法 | 第7-9页 |
| 1.兔椎间盘退变模型的制造 | 第7-8页 |
| ·实验动物分组 | 第7-8页 |
| ·动物体内Fn-f显微注射 | 第8页 |
| 2.制造模型兔腰椎DR成像 | 第8页 |
| 3.实验椎间盘石蜡切片番红0染色 | 第8-9页 |
| ·载玻片预粘片处理 | 第8页 |
| ·动物处死及收获椎间盘 | 第8-9页 |
| ·椎间盘脱钙及石蜡切片 | 第9页 |
| ·番红0染色液的配制及染色 | 第9页 |
| 4.实验椎间盘石蜡切片HE染色 | 第9页 |
| 三、结果 | 第9-17页 |
| 1.影像学观察结果 | 第9-11页 |
| 2.实验椎间盘番红0染色结果 | 第11-12页 |
| 3.实验椎间盘HE染色结果 | 第12-17页 |
| 四、结论 | 第17-18页 |
| 第二部分 hTGFβ1和hTGFβ3单基因或双基因联合转染兔退变椎间盘的生物学效应 | 第18-34页 |
| 材料和方法 | 第18-34页 |
| 一、材料 | 第18-19页 |
| 1.实验动物和病毒载体 | 第18页 |
| 2.实验试剂和仪器 | 第18-19页 |
| 二、方法 | 第19-27页 |
| 1.实验动物分组 | 第19-20页 |
| 2.动物体内椎间盘基因转染 | 第20页 |
| 3.实验椎间盘髓核组织TGFβ1的免疫组化观察 | 第20-21页 |
| ·收获椎间盘髓核组织及冰冻切片 | 第20页 |
| ·免疫组化染色 | 第20-21页 |
| 4.实验椎间盘髓核组织EGFP的观察 | 第21页 |
| 5.~(35)S整合法测定髓核组织蛋白多糖合成率 | 第21-22页 |
| ·原理 | 第21页 |
| ·试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·实验椎间盘髓核组织的培养及处理 | 第22页 |
| ·~(35)S放射率的测定 | 第22页 |
| 6.免疫印迹Western-Blot法检测髓核组织Ⅱ型胶原的含量 | 第22-27页 |
| ·试剂的配制 | 第22-23页 |
| ·Western-Blot免疫印迹 | 第23-27页 |
| 三、结果 | 第27-34页 |
| 1.实验椎间盘髓核组织TGFβ1免疫组化染色结果 | 第27-28页 |
| 2.实验椎间盘髓核组织EGFP荧光显微镜观察结果 | 第28页 |
| 3.髓核组织~(35)S蛋白多糖合成率结果 | 第28-29页 |
| ·髓核组织~(35)S-DMEM培养基培养48h观察结果 | 第28-29页 |
| ·不同时间~(35)S蛋白多糖合成结果 | 第29页 |
| 4.髓核组织Ⅱ型胶原含量的Western-Blot检测结果 | 第29-31页 |
| ·凝胶考马斯亮蓝染色和DAB染色 | 第29-30页 |
| ·不同时间Western-Blot显像和数据分析 | 第30-31页 |
| 5.统计学分析 | 第31-34页 |
| 讨论 | 第34-39页 |
| 小结 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 综述 | 第44-61页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 版权声明 | 第67页 |
