中文摘要 | 第1-3页 |
ABSTRACT | 第3-9页 |
前言 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-20页 |
·人体内血栓形成与溶栓药物 | 第11-15页 |
·人体内血栓形成与溶解的概况 | 第11页 |
·溶栓制剂的的研究概况 | 第11-12页 |
·葡激酶的研究进展 | 第12-15页 |
·大肠杆菌发酵工艺的优化 | 第15-20页 |
·培养基 | 第15-17页 |
·培养条件的影响 | 第17-18页 |
·基因工程菌的高密度发酵培养 | 第18-20页 |
第二章 大肠杆菌发酵培养基的优化研究 | 第20-40页 |
·实验材料与仪器 | 第20-22页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·实验仪器 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-27页 |
·试剂的配制 | 第22-24页 |
·培养方法 | 第24页 |
·SDS-PAGE 方法 | 第24页 |
·rSAK 蛋白含量测定(Lowry 法) | 第24-25页 |
·测定还原糖 | 第25-26页 |
·测定氨基氮 | 第26-27页 |
·细胞干重的测定 | 第27页 |
·结果与讨论 | 第27-39页 |
·培养基种类对rSAK 表达的影响 | 第27-28页 |
·M9 培养基的优化 | 第28-37页 |
·镁含量的优化 | 第37-38页 |
·优化培养基中大肠杆菌 DH5α/pBV220 的优化 | 第38-39页 |
·小结 | 第39-40页 |
第三章 大肠杆菌生产rSAK 的摇瓶发酵工艺研究 | 第40-55页 |
·实验材料与仪器 | 第40-41页 |
·实验材料 | 第40-41页 |
·实验仪器 | 第41页 |
·实验方法 | 第41-43页 |
·试剂的配制 | 第41-42页 |
·培养方法 | 第42页 |
·SDS-PAGE 方法 | 第42页 |
·rSAK 蛋白含量测定(Lowry 法) | 第42页 |
·测定还原糖 | 第42页 |
·测定氨基氮 | 第42-43页 |
·细胞干重的测定 | 第43页 |
·结果与讨论 | 第43-54页 |
·温度对大肠杆菌生长和rSAK 表达的影响 | 第43-47页 |
·pH 值对大肠杆菌生长和rSAK 表达的影响 | 第47-48页 |
·种子菌龄对大肠杆菌生长和rSAK 表达的影响 | 第48-49页 |
·接种量对大肠杆菌生长和rSAK 表达的影响 | 第49页 |
·摇瓶溶氧对大肠杆菌生长和rSAK 表达的影响 | 第49-51页 |
·优化条件下大肠杆菌 DH5α/pBV220/rSAK 的培养 | 第51-54页 |
·小结 | 第54-55页 |
第四章 大肠杆菌在发酵罐上的间歇培养研究 | 第55-66页 |
·实验材料与仪器 | 第55-57页 |
·实验材料 | 第55-56页 |
·实验仪器 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-59页 |
·试剂的配制 | 第57页 |
·培养方法 | 第57-58页 |
·SDS-PAGE 方法 | 第58页 |
·rSAK 蛋白含量测定(Lowry 法) | 第58页 |
·测定还原糖 | 第58页 |
·测定氨基氮 | 第58页 |
·细胞干重的测定 | 第58-59页 |
·结果与讨论 | 第59-64页 |
·溶氧(DO)对菌体生长和rSAK 表达的影响 | 第59-60页 |
·接种量对菌体生长和rSAK 表达的影响 | 第60-61页 |
·诱导时机的选择 | 第61-63页 |
·优化条件下的间歇培养 | 第63-64页 |
·小结 | 第64-66页 |
第五章 中试制备的rSAK 蛋白质量研究 | 第66-83页 |
·实验材料与仪器 | 第66-67页 |
·实验材料 | 第66-67页 |
·实验仪器 | 第67页 |
·实验方法 | 第67-69页 |
·SDS-PAGE 电泳测定纯度和分子量 | 第67-68页 |
·RP-HPLC 测定纯度 | 第68页 |
·rSAK 蛋白含量测定(Lowry 法) | 第68页 |
·rSAK 蛋白工程菌菌体蛋白残留量测定 | 第68页 |
·rSAK 蛋白细菌内毒素测定 | 第68页 |
·rSAK 蛋白等电点(PI)测定 | 第68-69页 |
·紫外光谱扫描 | 第69页 |
·免疫印迹 | 第69页 |
·外源残余DNA含量测定 | 第69页 |
·生物学活性和比活性测定 | 第69页 |
·N’-末端氨基酸序列测定 | 第69页 |
·结果与讨论 | 第69-82页 |
·SDS-PAGE 电泳测定纯度和分子量 | 第69-72页 |
·RP-HPLC 测定纯度 | 第72-73页 |
·rSAK 蛋白含量测定(Lowry 法) | 第73页 |
·rSAK 蛋白工程菌菌体蛋白残留量测定 | 第73-74页 |
·rSAK 蛋白细菌内毒素测定 | 第74页 |
·rSAK 蛋白等电点(PI)测定 | 第74-75页 |
·紫外光谱扫描 | 第75-76页 |
·免疫印迹 | 第76页 |
·外源残余DNA含量测定 | 第76-77页 |
·生物学活性和比活性测定 | 第77-78页 |
·N’-末端氨基酸序列测定 | 第78-82页 |
·小结 | 第82-83页 |
第六章 结论与展望 | 第83-85页 |
·结论 | 第83-84页 |
·对今后工作的建议 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-92页 |
发表论文情况 | 第92-93页 |
附录 | 第93-99页 |
致谢 | 第99页 |