| 独创性声明 | 第1-3页 |
| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章：综述 | 第10-27页 |
| 1 抗性机制的研究 | 第10-27页 |
| 1．1 植物防御体系的激活 | 第11页 |
| 1．1．1 直接防御 | 第11页 |
| 1．1．2 间接防御 | 第11页 |
| 1．2 抗性反应的产生 | 第11-13页 |
| 1．2．1 系统获得性抗性 | 第12页 |
| 1．2．2 临近植株获得抗性 | 第12-13页 |
| 1．3 抗性信号的传递 | 第13-20页 |
| 1．3．1 系统性信号分子 | 第13-16页 |
| 1．3．1．1 茉莉酸 | 第13-14页 |
| 1．3．1．2 脱落酸 | 第14-15页 |
| 1．3．1．3 水杨酸 | 第15-16页 |
| 1．3．2 植株间抗性信号分子 | 第16-18页 |
| 1．3．2．1 虫害诱导植物产生的挥发性物质 | 第17-18页 |
| 1．3．2．2 机械损伤诱导产生的挥发物 | 第18页 |
| 1．3．3 挥发物的合成途径 | 第18-19页 |
| 1．3．4 挥发物的释放 | 第19-20页 |
| 1．4 植物抗性物质的生物合成途径 | 第20-24页 |
| 1．4．1 茉莉酸途径 | 第20-22页 |
| 1．4．1．1 脂氧合酶(LOX) | 第20-21页 |
| 1．4．1．2 丙二烯氧化物合酶(AOS) | 第21-22页 |
| 1．4．1．3 丙二烯氧化物环化酶(AOC) | 第22页 |
| 1．4．2 水杨酸途径 | 第22页 |
| 1．4．3 苯丙氨酸途径 | 第22-23页 |
| 1．4．4 ABA信号途径 | 第23页 |
| 1．4．5 各途径之间的关系 | 第23-24页 |
| 1．4．5．1 SA与JA信号途交叉 | 第24页 |
| 1．4．5．2 ABA与JA途径的交叉 | 第24页 |
| 1．5 植物防御体系相关基因的表达 | 第24-25页 |
| 1．6 本研究的研究目的及思路 | 第25-27页 |
| 第二章：机械损伤及昆虫取食对酚类物质的影响 | 第27-32页 |
| 2．1 实验方法 | 第27-28页 |
| 2．1．1 植物材料与处理 | 第27-28页 |
| 2．1．1．1 机械损伤处理 | 第27-28页 |
| 2．1．1．2 扬扇舟蛾取食处理 | 第28页 |
| 2．1．2 样品处理与HPLC | 第28页 |
| 2．2 结果与讨论 | 第28-32页 |
| 第三章：损伤对合作杨体内POD及PPO酶活性的影响 | 第32-36页 |
| 3．1 过氧化物酶、多酚氧化酶活性测定 | 第32-36页 |
| 3．1．1 实验方法 | 第32-33页 |
| 3．1．1．1 POD活性测定 | 第32页 |
| 3．1．1．2 PPO活性测定 | 第32-33页 |
| 3．1．2 实验结果及讨论 | 第33-36页 |
| 3．1．2．1 损伤对合作杨叶片内POD酶活性的影响 | 第33-34页 |
| 3．1．2．2 损伤对合作杨叶片内PPO酶活性的影响 | 第34-36页 |
| 第四章：JA信号合成途径中JA含量与脂氧合酶的活性检测 | 第36-39页 |
| 4．1 实验方法 | 第36-37页 |
| 4．1．1 JA含量的测定 | 第36页 |
| 4．1．2 LOX活性测定 | 第36-37页 |
| 4．2 实验结果及讨论 | 第37-39页 |
| 第五章：MEJA熏蒸对植物体内酚类物质含量及酶活性的影响 | 第39-43页 |
| 5．1 材料和方法 | 第39页 |
| 5．2 结果及讨论 | 第39-43页 |
| 5．2．1 MeJA熏蒸后合作杨体内酚类物质含量的变化 | 第39-41页 |
| 5．2．2 MeJA熏蒸合作杨叶片内PPO、POD、LOX活性变化 | 第41-43页 |
| 第六章：利用快速扣除杂交技术(RASH)克隆合作杨创伤诱导基因 | 第43-54页 |
| 6．1 材料 | 第44页 |
| 6．1．1 实验材料 | 第44页 |
| 6．1．2 主要试剂 | 第44页 |
| 6．2 实验步骤及结果 | 第44-50页 |
| 6．2．1 合作杨总RNA的提取 | 第44-45页 |
| 6．2．2 用磁珠法分离total RNA中的mRNA | 第45-46页 |
| 6．2．2．1 探针的退火 | 第45页 |
| 6．2．2．2 贮液准备(溶液冷却时，准备0.5×、0.5×SSC) | 第45页 |
| 6．2．2．3 洗涤磁珠 | 第45页 |
| 6．2．2．4 寡核苷酸—RNA杂交体的捕获与清洗 | 第45-46页 |
| 6．2．3 双链cDNA的合成 | 第46页 |
| 6．2．3．1 eDNA第一链的合成 | 第46页 |
| 6．2．3．2 cDNA第二链的合成 | 第46页 |
| 6．2．3．3 补平 | 第46页 |
| 6．2．4 从磁珠上切下cDNA片段 | 第46-47页 |
| 6．2．5 cDNA与衔接子连接 | 第47页 |
| 6．2．6 RaSH—快速扣除杂交 | 第47-48页 |
| 6．2．6．1 cDNA片段的DpnⅡ酶切(tester与driver同时进行) | 第47页 |
| 6．2．6．2 酶切产物纯化 | 第47页 |
| 6．2．6．3 酶切产物补平 | 第47页 |
| 6．2．6．4 接头连接 | 第47-48页 |
| 6．2．6．5 Driver PCR扩增 | 第48页 |
| 6．2．6．6 tester 用Xho Ⅰ酶切 | 第48页 |
| 6．2．6．7 经酶切的Tester cDNA与Driver cDNA杂交 | 第48页 |
| 6．2．7 载体构建 | 第48-50页 |
| 6．2．7．1 PSP72的转化(以下均为无菌操作) | 第49页 |
| 6．2．7．2 质粒提取 | 第49页 |
| 6．2．7．3 用Xho 1酶切载体 | 第49-50页 |
| 6．2．7．4 酶切产物回收 | 第50页 |
| 6．2．8 扣除cDNA的克隆 | 第50页 |
| 6．2．8．1 转化 | 第50页 |
| 6．2．8．2 PCR结果显示有微弱的信号 | 第50页 |
| 6．3 结果与讨论 | 第50-54页 |
| 6．3．1 合作杨总RNA的提取 | 第50-51页 |
| 6．3．2 合作杨Poly(A~+)mRNA的分离 | 第51页 |
| 6．3．3 cDNA双链的合成 | 第51页 |
| 6．3．4 快速扣除杂交 | 第51-54页 |
| 6．3．4．1 结果 | 第51-54页 |
| 第七章：结论 | 第54-56页 |
| 7．1 结论与讨论 | 第54-55页 |
| 7．2 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 作者简介 | 第64-65页 |
| 导师简介 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
