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野油菜黄单胞菌野油菜致病变种panD基因的功能研究

第一章 前言第1-23页
   ·植物病原菌一野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xcc)的概述第9-10页
     ·Xcc的分类地位第9页
     ·Xcc的形态和特征第9页
     ·Xcc引起的侵染过程及症状第9-10页
     ·Xcc基因组的分析第10页
   ·植物病原菌致病因子研究第10-13页
     ·依赖于Ⅲ型分泌系统(TTSS)的效应物第10-11页
     ·胞外酶第11-12页
     ·多糖第12页
     ·毒素第12-13页
     ·生长激素第13页
   ·胞外多糖(EPS)研究进展第13-18页
     ·胞外多糖的结构第13-14页
     ·胞外多糖的理化性能第14页
     ·胞外多糖的应用第14页
     ·胞外多糖生物合成途径及调控第14-17页
     ·胞外多糖与致病性第17-18页
   ·panD基因研究进展第18-21页
     ·大肠杆菌中panD基因功能研究第18-21页
     ·棒状杆菌中panD功能研究第21页
     ·结核分支杆菌中panD功能研究第21页
     ·茄青枯甲单胞茵中panD功能研究第21页
   ·本工作的目的及意义第21-23页
第二章 材料与方法第23-34页
   ·材料第23-27页
     ·菌株和质粒第23页
     ·培养基及生长条件第23-25页
     ·抗生素及其贮存、使用浓度第25页
     ·溶液与缓冲液第25-27页
   ·方法第27-34页
     ·常规PCR反应第27-28页
     ·琼脂糖凝胶电泳第28页
     ·PCR产物的回收与纯化第28-29页
     ·细菌总DNA的提取第29页
     ·质粒的提取第29-30页
     ·限制性内切酶酶切第30页
     ·DNA连接第30页
     ·DNA的电脉冲转化第30-31页
     ·三亲本接合第31-32页
     ·突变体的功能互补第32页
     ·胞外多糖的检测第32页
     ·胞外酶的检测第32-33页
     ·致病性试验第33页
     ·细菌在培养基中的生长繁殖曲线的绘制第33-34页
第三章 结果与分析第34-49页
   ·Xcc中存在一个编码蛋白与大肠杆菌PanD氨基酸序列高度同源的基因第34-35页
   ·panD突变体的获得第35页
   ·XC2380 Tn5gusA5插入突变体121C07与其转录下游基因XC2379的关系第35-36页
   ·互补菌株的构建第36-38页
   ·突变体在MMX培养基上的生长情况检测第38-40页
     ·平板检测第38-39页
     ·摇瓶培养绘制生长曲线第39-40页
   ·突变体的致病性实验第40页
   ·突变体的EPS产量检测第40-41页
     ·EPS的平板检测第40-41页
     ·EPS的摇瓶发酵检测第41页
   ·突变体的胞外酶检测第41-44页
     ·胞外蛋白酶第41-42页
     ·胞外纤维素酶第42页
     ·胞外淀粉酶第42-43页
     ·细胞分泌物胞外酶活性检测第43-44页
   ·突变体耐盐性检测第44-49页
     ·平板检测第44-45页
     ·摇瓶培养绘制生长曲线第45-49页
第四章 讨论第49-51页
   ·Xcc中存在不同于大肠杆菌的泛酸生物合成途径第49页
   ·Xcc中panD基因与致病相关第49-50页
   ·Xcc中panD基因与Xcc细胞耐盐性有关第50-51页
参考文献第51-58页
附表一第58-59页
附表二第59-60页
附表三第60页
附表四第60-61页
致谢第61页

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