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采用PMI作为标记基因进行蓝猪耳转化的研究

论文声明第1-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-9页
缩略词(Abbreviations)第9-11页
目录第11-14页
1.文献综述第14-27页
 1.1.基因工程技术的应用第14-15页
 1.2.转基因作物的安全性问题第15-17页
 1.3.转基因作物的安全对策第17-25页
  1.3.1.基因删除技术第17-20页
  1.3.2.安全标记基因第20-25页
 1.4.蓝猪耳的组织培养及基因转化研究第25-26页
  1.4.1.蓝猪耳组织培养研究第25-26页
  1.4.2.蓝猪耳遗传转化的研究第26页
 1.5.研究背景及意义第26-27页
2.蓝猪耳植株再生体系的研究第27-36页
 2.1.蓝猪耳叶片外植体再生植株条件的优化第27-30页
  2.1.1.材料与方法第27-28页
  2.1.2.结果与分析第28-30页
  2.1.3.结论与讨论第30页
 2.2TDZ诱导高效蓝猪耳根再生体系的建立第30-36页
  2.2.1.材料与方法第30-31页
  2.2.2.结果与分析第31-34页
  2.2.3.结论和讨论第34-36页
3.PMI基因克隆及其表达载体的构建第36-51页
 3.1.试验材料第36-38页
  3.1.1.载体与菌株第36页
  3.1.2.主要试剂第36-38页
 3.2.试验方法第38-45页
  3.2.1.PMI基因的克隆第38-41页
  3.2.2.PMI基因的检测和测序第41-42页
  3.2.3.表达载体pHQMK的构建第42-44页
  3.2.4.工程菌的制备第44-45页
 3.3.结果与分析第45-49页
  3.3.1.PMI基因的克隆第45页
  3.3.2.PMI基因的检测和测序第45-47页
  3.3.3.表达载体pHQMK的构建第47-48页
  3.3.4.工程菌的制备第48-49页
 3.4.讨论:第49-51页
4.以PMI为选择标记基因转化蓝猪耳的研究第51-60页
 4.1.甘露糖选择压的确定第51-56页
  4.1.1.材料与方法第51-52页
  4.1.2.结果与分析第52-55页
  4.1.3.讨论第55-56页
 4.2.农杆菌的活化与外植体的浸染第56-60页
  4.2.1.试验材料第56-57页
  4.2.2.试验方法第57-58页
  4.2.3.结果与分析第58-60页
5.转基因植株的检测与鉴定第60-72页
 5.1.蓝猪耳基因组DNA的提取第60-61页
 5.2.PCR检测转基因植株的潮霉素抗性基因第61-63页
  5.2.1.材料与药品第61页
  5.2.2.PCR反应:第61-62页
  5.2.3.结果与分析:第62-63页
 5.3.Southern blot分析第63-69页
  5.3.1.试验材料与药品第63页
  5.3.2.试验操作步骤第63-67页
  5.3.3.结果与分析第67-69页
 5.4.氯酚红试验检测PMI基因表达及6—磷酸甘露糖异构酶活性第69-70页
  5.4.1.原理第69页
  5.4.2.材料与方法第69-70页
  5.4.3.结果与分析第70页
 5.5.讨论第70-72页
参考文献第72-79页
致谢第79-80页
攻读硕士期间发表文章第80-82页

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