摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 绪论 | 第9-16页 |
1.1 引言 | 第9-10页 |
1.2 研究现状 | 第10-11页 |
1.3 研究进展 | 第11-15页 |
1.3.1 GH的结构特点 | 第11-12页 |
1.3.2 GH的多态性研究 | 第12-13页 |
1.3.3 GH调节分泌 | 第13页 |
1.3.4 GH作用机制 | 第13-14页 |
1.3.5 GH结合蛋白(CHBP) | 第14页 |
1.3.6 GH的应用及待解决的问题 | 第14-15页 |
1.4 研究方向与应用前景 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-27页 |
2.1 技术路线 | 第16-17页 |
2.2 试验材料 | 第17-19页 |
2.2.1 样品 | 第17页 |
2.2.2 菌种与载体 | 第17-18页 |
2.2.3 引物 | 第18页 |
2.2.4 酶 | 第18-19页 |
2.2.5 试剂盒 | 第19页 |
2.2.6 实验用的其它试剂 | 第19页 |
2.2.7 常用仪器 | 第19页 |
2.3 方法 | 第19-25页 |
2.3.1 fGH基因的获得 | 第19-21页 |
2.3.2 fGH基因的克隆 | 第21-23页 |
2.3.3 fGH基因真核表达质粒pcDNA3.1-fGH的构建与鉴定 | 第23-24页 |
2.3.4 fGH基因在小鼠肌肉内的表达 | 第24页 |
2.3.5 fGH基因原核表达质粒pPROEX~(TM)HTa-fGH的构建与鉴定 | 第24页 |
2.3.6 fGH基因原核重组蛋白的鉴定 | 第24-25页 |
2.4 本章小结 | 第25-27页 |
3 结果与分析 | 第27-44页 |
3.1 fGH基因的 RT-PCR扩增 | 第27页 |
3.2 fGH基因cDNA克隆和鉴定 | 第27页 |
3.3 fGH基因cDNA序列测定和分析 | 第27-28页 |
3.3.1 fGHcDNA序列测定 | 第27页 |
3.3.2 序列比较分析 | 第27-28页 |
3.4 fGH基因原核表达质粒pPROEX~(TM)HTa-fGH的构建 | 第28页 |
3.4.1 fGH基因原核表达质粒pPROEX~(TM)HTa-fGH的构建与鉴定 | 第28页 |
3.4.2 fGH基因原核表达质粒的序列测定 | 第28页 |
3.5 fGH基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第28-29页 |
3.5.1 fGH基因原核表达产物的鉴定 | 第28页 |
3.5.2 fGH原核重组蛋白可溶性分析 | 第28-29页 |
3.5.3 fGH原核重组蛋白的回收纯化 | 第29页 |
3.6 fGH基因真核表达质粒的构建与鉴定 | 第29页 |
3.7 fGH基因在小鼠肌肉内的表达 | 第29-43页 |
3.7.1 RT- PCR检测转染小鼠肌肉组织中的fGH基因 | 第29-43页 |
3.8 本章小结 | 第43-44页 |
结论与讨论 | 第44-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |