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棉铃虫对拟除虫菊酯+有机磷混剂的抗性演化及抗性机理

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-14页
符号及缩略语等的说明第14-15页
第一章 文献综述第15-43页
 1 棉铃虫抗药性的研究现状第15-24页
   ·棉铃虫抗药性的发生发展概况第15-20页
     ·棉铃虫对有机磷类杀虫剂的抗药性第16-17页
     ·棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性第17-19页
     ·棉铃虫对Bt生物农药、转Bt基因作物的抗药性第19-20页
   ·棉铃虫抗药性的生理生化机制第20-24页
     ·棉铃虫对有机磷类杀虫剂抗性的生理生化机制第20-21页
     ·棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂抗性的生理生化机制第21-23页
     ·棉铃虫对Bt-d内毒素抗性的生理生化机制第23-24页
 2 杀虫剂代谢抗性与靶标抗性的分子机理第24-35页
   ·代谢抗性的分子遗传学研究进展第24-27页
     ·与昆虫抗性相关的P450基因第24-25页
     ·与昆虫抗性相关的酯酶基因第25-26页
     ·与昆虫抗性相关的谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)基因第26-27页
   ·昆虫靶标抗性的分子遗传学研究进展第27-35页
     ·乙酰胆碱酯酶及其敏感性下降与昆虫对有机磷杀虫剂的抗性第27-32页
       ·乙酰胆碱酯酶的高级结构第27-30页
       ·乙酰胆碱酯酶敏感性降低与昆虫对有机磷杀虫剂的抗性第30-31页
       ·昆虫体内两个乙酰胆碱酯酶基因的存在第31-32页
     ·神经轴突钠离子通道突变与昆虫对菊酯类杀虫剂的击倒抗性第32-33页
     ·烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)突变与昆虫对新烟碱类杀虫剂的抗性第33-35页
 3 杀虫剂混剂在抗药性治理中的作用第35-43页
   ·农药混剂的发展过程第35-38页
   ·我国农药混剂迅速发展的原因第38页
   ·农药混剂延缓抗性的原理第38-39页
   ·用于延缓抗性的混剂在研究和开发中存在的问题第39-41页
     ·用于延缓抗性的混剂在研究中存在的问题第40页
     ·用于延缓抗性的混剂在开发中存在的问题第40-41页
   ·对混剂开发的建议第41-43页
第二章 棉铃虫对拟除虫菊酯+有机磷混剂的抗性演化及交互抗性研究第43-56页
 1 材料与方法第44-46页
   ·供试昆虫第44页
   ·供试药剂第44-45页
   ·棉铃虫对杀虫剂的毒力测定方法第45页
   ·棉铃虫抗性品系的选育方法第45页
   ·交互抗性测定第45-46页
 2 结果与分析第46-48页
   ·棉铃虫抗药性选育第46页
   ·棉铃虫YS-FP和YS-FM品系对相应混剂及其单剂的抗药性发展动态第46-47页
   ·混剂筛选过程中氰戊菊酯和有机磷之间共毒系数的变化第47页
   ·交互抗性第47-48页
 3 讨论第48-56页
第三章 结构活性关系与棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的代谢抗性机理第56-64页
 1 材料与方法第57-58页
   ·供试昆虫第57页
   ·供试药剂和增效剂第57-58页
   ·生物测定第58页
   ·增效剂增效测定第58页
 2 结果与分析第58-60页
   ·棉铃虫YS-FP和YS-FM抗性品系对不同结构拟除虫菊酯的抗性第58-59页
   ·PBO和DEF的增效结果第59-60页
 3 讨论第60-64页
第四章 棉铃虫对拟除虫菊酯+有机磷混剂抗性的生化机制第64-77页
 1 材料与方法第66-69页
   ·供试昆虫第66页
   ·供试药剂、生化试剂第66页
   ·解毒代谢酶活性测定第66-68页
     ·酶液准备:第66-67页
     ·细胞色素P450氧化酶活性测定第67页
     ·谷胱甘肽S-转移酶活性测定第67-68页
     ·酯酶活性测定第68页
   ·乙酰胆碱酯酶测定第68-69页
     ·酶液准备:第69页
     ·抑制中浓度(I_(50))测定第69页
     ·K_m和V_(max)测定第69页
   ·蛋白质浓度测定第69页
 2 结果与分析第69-71页
   ·棉铃虫6龄幼虫中肠细胞色素P450氧化酶、谷胱甘肽S-转移酶、酯酶活性第69-70页
   ·棉铃虫3龄幼虫谷胱甘肽S-转移酶、酯酶活性第70-71页
   ·乙酰胆碱酯酶敏感性第71页
 3 讨论第71-77页
第五章 棉铃虫乙酰胆碱酯酶基因的克隆与序列分析第77-92页
 1 材料与方法第78-85页
   ·供试昆虫第78页
   ·主要试剂和仪器第78-79页
   ·总RNA提取和cDNA第一链的合成第79-80页
     ·棉铃虫幼虫头部总RNA提取第79页
     ·琼脂糖凝胶检测总RNA第79-80页
     ·cDNA第一链的合成第80页
   ·PCR扩增反应第80-81页
     ·PCR引物设计第80页
     ·PCR扩增第80-81页
   ·PCR产物回收与纯化第81-82页
   ·质粒载体的连接反应和转化第82-84页
     ·连接反应:第82页
     ·感受态细胞的制备第82-83页
     ·转化反应和细菌培养:第83-84页
   ·外源目标片段的检测第84-85页
     ·PCR反应检测第84页
     ·限制性内切酶酶切检测第84-85页
   ·测序及同源性比较第85页
 2 结果与分析第85-87页
   ·棉铃虫乙酰胆碱酯酶cDNA序列及推导的氨基酸序列分析第85-86页
   ·同源性比较第86页
   ·棉铃虫抗、感品系AChE氨基酸序列的比较第86-87页
 3 讨论第87-92页
全文总结第92-93页
参考文献第93-112页
附录:攻读博士学位期间发表的学术论文第112-113页
致谢第113页

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